BCL-x_1和BCL-2在喉鳞状细胞癌细胞中的表达

目的探讨B细胞淋巴瘤 /白血病 2 (B celllymphoma/leukemia 2 ,BCL 2 )基因及B细胞淋巴瘤/白血病 x基因长片段 (B celllymphoma/keukemia x ,long ,BCL x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素 α对其表达的影响。方法采用SABC免疫组织化学染色 ,观察比较干扰素治疗 1 0周后喉癌组织( 2 5例 )和未治疗组 ( 2 7例 )喉癌组织中喉鳞状细胞中BCL x1、BCL 2蛋白的表达。结果①治疗组喉癌组织中BCL x1表达OD值为 0 .1 2 ,未治疗组OD值为 0 .2 1 ,两组表达率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;② 5 2例喉癌组织中均无BCL 2蛋白表达。结论BCL x1可能在喉癌细胞凋亡中发挥抗凋亡作用 ,干扰素 α可能通过抑制BCL

芒柄花黄素通过调控miR-140-5p/TIGIT轴影响喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡

目的:探讨芒柄花黄素对喉鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:体外培养人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2,以MTT法检测0、5、10、20、40、60μmol/L芒柄花黄素处理24 h后Hep-2细胞活力,根据IC50值筛选出芒柄花黄素合适作用浓度。Hep-2细胞分别采用20、40μmol/L芒柄花黄素,40μmol/L芒柄花黄素+阴性对照(转染mirRNA-140-5p抑制剂阴性对照),40μmol/L芒柄花黄素+miR-140-5p inhibitor干预细胞敲减干预Hep-2细胞。分组转染及药物处理后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫印迹检测Hep-2细胞miR-140-5p与T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)表达;采用MTT法和平板集落形成实验检测Hep-2细胞增殖;采用流式细胞实验检测Hep-2细胞凋亡;采用免疫印迹检测Hep-2细胞增殖(PCNA、Cyclin D1)与凋亡相关蛋白(Bax、cleaved caspase-3)表达。于裸鼠背部皮下注射Hep-2细胞构建裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组,25、50 mg/kg芒柄花黄素组,50 mg/kg芒柄花黄素+阴性对照组,50 mg/kg芒柄花黄素+miR-140-5p敲减组,分组处理后,检测各组裸鼠移植瘤质量与体积;采用双荧光素酶报告实验分析Hep-2细胞miR-140-5p对TIGIT的靶向调控。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果:与对照比较,20、40μmol/L芒柄花黄素干预细胞miR-140-5p表达(1.79±0.16、2.58±0.22比1.04±0.11)、凋亡率[(36.17±8.14)%、(68.65±14.20)%比(2.10±0.65)%]、Bax与cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),TIGIT蛋白(0.56±0.12、0.17±0.01比0.98±0.10)与mRNA表达(0.68±0.10、0.34±0.03比1.05±0.13)、集落生成率[(60.82±12.24)%、(35.36±8.20)%比(100.0±0.00)%]、细胞活力(63.12±11.03、39.75±7.14比100.0±0.00)、PCNA与Cyclin D1蛋白表达降低(P<0.05);与40μmol/L芒柄花黄素比较,芒柄花黄素+miR-140-5p敲减细胞miR-140-5p表达(1.11±0.13比2.58±0.22)、凋亡率[(5.04±1.51)%比(68.65±14.20)%]、Bax与cleaved caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),TIGIT蛋白(0.92±0.18比0.17±0.01)与mRNA表达(0.97±0.14比0.34±0.03)、集落生成率[(90.76±15.02)%比(35.36±8.20)%]、细胞活力(92.01±17.13比39.75±7.14)、PCNA与Cyclin D1蛋白表达升高(P<0.05);动物实验中,与对照组比较,25、50 mg/kg芒柄花黄素组裸鼠移植瘤质量[(609.23±58.14)、(465.87±41.26)比(762.14±76.51)mg]降低,体积[(532.82±60.28)、(396.34±48.10)比(681.70±72.44)mm^(3)]减小(P<0.05);与50 mg/kg芒柄花黄素组比较,芒柄花黄素+miR-140-5p敲减组裸鼠移植瘤质量[(735.48±80.12)比(465.87±41.26)mg]升高,体积[(654.79±75.85)比(396.34±48.10)mm^(3)]增加(P<0.05);Hep-2细胞miR-140-5p可靶向下调TIGIT表达。结论:芒柄花黄素通过调控miR-140-5p/TIGIT轴表达抑制喉鳞状细胞癌细胞增殖活性,并促进其凋亡。

整合素连接激酶反义寡脱氧核苷酸对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株的作用

目的探讨整合素连接激酶(ILK)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对喉鳞状细胞癌 Hep-2细胞株生物学特性的影响及抑制ILK活性以控制喉鳞状细胞癌细胞生长的可能性。方法应用脂质体包裹的ILK ASODN转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,阻断ILK表达;应用光学显微镜观察凋亡细胞的形态学改变;通过细胞生长曲线检测细胞的增殖活性;于处理后120h采用膜联蛋白(Annexin- V)／碘化丙啶(PI)联合标记法于荧光显微镜下观察细胞凋亡;于处理后72h以流式细胞术测定细胞凋亡及细胞周期。结果 ASODN组转染后,Hep-2细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加,细胞周期发生显著变化:G0／G1期细胞数增多,S期及G2／M期细胞数则减少,与对照组相比,差异有显著意义 (P<0．05);而SODN及NODN组与对照组相比则无明显变化(P>0．05)。结论 ILK ASODN可以抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的生长和增殖,诱导细胞凋亡;应用反义技术抑制ILK活性可能对喉鳞状细胞癌的治疗有意义。

中国耳鼻咽喉头颈外科

内皮抑素体外抑制喉鳞状细胞癌细胞的效果观察,鼻腔结构异常的修正性鼻内镜手术,单侧慢性筛上颌窦炎症的CT特征分析，脉搏传导时间在儿童睡眠呼吸阻塞诊断中的应用，