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miR-513b-5p靶向趋化因子CXCL8抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 张宇良 薛绪亭 +3 位作者 王瑛 贺龙 关晓雅 张春明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1627-1635,共9页
侵袭转移是喉鳞癌预后不良的主要危险因素,肿瘤微环境中的趋化因子与侵袭转移密切相关。CXCL8是一种细胞因子样的分泌蛋白质,在多种肿瘤的恶性发展过程中发挥重要作用,但其在喉鳞癌的作用尚未阐明。本文以喉鳞癌细胞为研究对象,阐明CXCL... 侵袭转移是喉鳞癌预后不良的主要危险因素,肿瘤微环境中的趋化因子与侵袭转移密切相关。CXCL8是一种细胞因子样的分泌蛋白质,在多种肿瘤的恶性发展过程中发挥重要作用,但其在喉鳞癌的作用尚未阐明。本文以喉鳞癌细胞为研究对象,阐明CXCL8在喉鳞癌细胞的作用,并寻找靶向CXCL8的miRNA,为喉鳞癌的诊断和治疗提供新靶点。GEPIA网站显示,CXCL8在头颈肿瘤组织中高表达(P<0.05)。实时荧光定量PCR发现,CXCL8在喉鳞癌细胞中高表达,酶联免疫检测也发现,CXCL8在喉鳞癌细胞上清中分泌量较高(P<0.001)。CCK8检测证实,降低CXCL8表达会明显抑制喉鳞癌细胞FD-LSC-1和AMC-HN8增殖(平均抑制率分别为34.0%,19.5%);EdU实验也证实,降低CXCL8表达明显抑制喉鳞癌细胞的增殖(P<0.05)。Transwell小室实验证实,降低CXCL8表达明显抑制喉鳞癌细胞FD-LSC-1迁移和侵袭(平均抑制率分别为40.0%,38.5%);降低CXCL8表达也明显抑制喉鳞癌细胞AMC-HN8迁移和侵袭(平均抑制率分别为37.5%,53.5%)。生物信息学网站预测,CXCL 8可能是miR-513b-5p靶基因,双荧光素酶报告检测证实,miR-513b-5p能够与CXCL 8-3′UTR结合,在喉鳞癌细胞中过表达miR-513b-5p,CXCL 8 mRNA表达量下降60%(P<0.01)。细胞功能恢复实验证实,miR-513b-5p削弱喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力可被外源表达的CXCL8有效逆转(P<0.05)。综上所述,miR-513b-5p通过靶向CXCL 8抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 喉鳞癌细胞 miR-513b-5p CXCL8 增殖 侵袭
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原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的相关性 被引量:5
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作者 张继华 陈春菊 +3 位作者 韩彩莉 苏静 李丹 王来 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期453-458,共6页
目的探讨原代人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达相关性。方法取新鲜人喉鳞状细胞癌组织,进行原代细胞培养,利用基因干扰技术,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向si RNA转染至人喉鳞癌细胞,转染成功后将实验细胞分为5组:A组(未转染... 目的探讨原代人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达相关性。方法取新鲜人喉鳞状细胞癌组织,进行原代细胞培养,利用基因干扰技术,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向si RNA转染至人喉鳞癌细胞,转染成功后将实验细胞分为5组:A组(未转染组)、B组(转染空载体组)、C组(SIX1-si RNA组)、D组(TGFβ-si RNA组)、E组(SIX1+TGF-β-si RNA组)。Western blot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C m RNA的表达。结果 SIX1、TGF-β、VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在未转染组、转染空载体组中差异无统计学意义。同未转染组相比,SIX1蛋白及其m RNA的表达在SIX1-si RNA组降低的同时出现了VEGF-C表达的降低;TGF-β蛋白及其m RNA的表达在TGFβ-si RNA组降低的同时也出现了VEGF-C表达的降低,差异均有统计学意义。同SIX1-si RNA组、TGFβ-si RNA组相比,VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在SIX1+TGF-β-si RNA组未出现进一步降低。结论 SIX1和TGF-β能够共同作用促进VEGF-C蛋白及其m RNA的表达,进而促进人喉鳞癌的淋巴转移。SIX1、TGF-β的变化可能成为临床抑制人喉鳞癌淋巴结转移的潜在靶点。 展开更多
关键词 SIX1 TGF-Β VEGF-C 原代人喉鳞癌细胞
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人参皂苷Rg3对原代人喉鳞癌细胞SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响 被引量:2
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作者 张继华 陈帅 +3 位作者 董凯峰 苏静 李丹 王来 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第7期1700-1703,I0015,共5页
目的:探讨人参皂苷Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响。方法:培养原代人喉鳞癌细胞,待细胞稳定传代后将其分为3组:A组(正常对照组)、B组(顺铂对照组)、C组(Rg3处理组)。Westernblot及细胞爬片免疫荧光检测各... 目的:探讨人参皂苷Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响。方法:培养原代人喉鳞癌细胞,待细胞稳定传代后将其分为3组:A组(正常对照组)、B组(顺铂对照组)、C组(Rg3处理组)。Westernblot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C mRNA的表达。结果:正常对照组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白及其mRNA表达均呈现强阳性。同正常对照组相比,顺铂对照组及Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及其mRNA表达下调,差异有统计学意义;同顺铂对照组相比,Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及mRNA表达出现了明显下调,差异有统计学意义。结论:Rg3能够通过降低人喉鳞癌细胞SIX1表达下调VEGF-C蛋白表达,进一步抑制喉鳞癌淋巴转移。同时提示,Rg3有比顺铂更强的抑制喉鳞癌淋巴转移的作用。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 SIX1 TGF-Β VEGF-C 原代人喉鳞癌细胞
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SIX1和TGF-β对原代人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的影响 被引量:2
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作者 张继华 董凯峰 +2 位作者 苏静 李丹 田君海 《疑难病杂志》 CAS 2020年第4期389-393,398,共6页
目的探讨原代培养的人喉鳞癌细胞中SIX1和转化生长因子-β(TGF-β)共同作用对上皮—间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法收集2016年1月—2018年1月于河北医科大学第一医院耳鼻咽喉科行喉鳞癌手术患者21例,均留存切除组织,并对其进行人... 目的探讨原代培养的人喉鳞癌细胞中SIX1和转化生长因子-β(TGF-β)共同作用对上皮—间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法收集2016年1月—2018年1月于河北医科大学第一医院耳鼻咽喉科行喉鳞癌手术患者21例,均留存切除组织,并对其进行人喉鳞癌原代细胞培养,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向siRNA,并转染至原代人喉鳞癌细胞,成功转染后分5组,即未转染组、空转组、SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组。应用免疫组化荧光法及蛋白印记Western-blot法检测细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin的蛋白表达。PCR方法检测各组细胞中SIX1、TGF-β及E-cadherin mRNA表达。结果与未转染组比较,空转组细胞中SIX1、TGF-β、E-cadherin mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组E-cadherin蛋白及mRNA表达均上调,差异均有统计学意义(F/P=6.846/0.006、13.396/0.000、9.673/0.000)。SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组3组比较,E-cadherin mRNA及其蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论人喉鳞癌细胞上皮—间质转化呈SIX1及TGF-β依赖性。SIX1和TGF-β共同作用可能是人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的关键;SIX1和TGF-β是人喉鳞癌细胞转移潜能的重要标志。 展开更多
关键词 上皮—间质转化 SIX1 转化生长因子-Β 喉鳞癌细胞
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人参皂甙Rg3对人喉鳞癌细胞中SIX1和TGF-β诱导上皮-间质转化的作用研究 被引量:3
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作者 张继华 张皓蕾 +2 位作者 刘玲玲 王燕 王来 《现代中西医结合杂志》 CAS 2021年第6期593-597,602,共6页
目的探讨中药单体人参皂甙Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞上皮-间质转化的影响及SIX1和TGF-β在上皮-间质转化中的作用。方法术中留存人喉鳞状细胞癌组织,常规处理后,体外进行人喉鳞癌原代细胞培养,待细胞传代稳定后分为对照组、顺铂组、Rg... 目的探讨中药单体人参皂甙Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞上皮-间质转化的影响及SIX1和TGF-β在上皮-间质转化中的作用。方法术中留存人喉鳞状细胞癌组织,常规处理后,体外进行人喉鳞癌原代细胞培养,待细胞传代稳定后分为对照组、顺铂组、Rg3组。顺铂组加入顺铂,使其终浓度为3μg/mL;Rg3组加入Rg3,使其终浓度为300μg/mL。处理后继续培养细胞24 h,免疫组化及Western blot检测3组细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测各组原代细胞中SIX1 mRNA、TGF-βmRNA及E-cadherin mRNA表达情况。结果免疫组化染色显示对照组SIX1、TGF-β蛋白强阳性表达,E-cadherin蛋白弱阳性表达;顺铂组SIX1和E-cadherin蛋白阳性表达,TGF-β蛋白强阳性表达;Rg3组SIX1蛋白弱阳性表达,E-cadherin和TGF-β蛋白强阳性表达。顺铂组及Rg3组SIX1蛋白及mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),且Rg3组均明显低于顺铂组(P均<0.05);顺铂组及Rg3组E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P均<0.05),且Rg3组明显高于顺铂组(P均<0.05);3组间TGF-β蛋白及mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论Rg3能够通过下调SIX1表达起到抑制人喉鳞癌细胞上皮-间质转化的作用,且其作用强于顺铂。 展开更多
关键词 人参皂甙RG3 上皮-间质转化 SIX1 TGF-Β 喉鳞癌细胞
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氧化砷和顺铂对喉鳞癌细胞Hep-2的作用及其机制
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作者 肖辉 金德钧 +3 位作者 王超 徐秀玉 杨静波 李呼伦 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2004年第6期540-542,共3页
目的 探讨氧化砷 (arsenousoxide ,As2 O3)和顺铂 (cisplatin ,DDP)对喉鳞癌细胞 (Hep 2 )的作用及其机制。方法 用Hep 2细胞株进行传代培养 ,观察As2 O3和DDP对不同培养时间细胞的生长抑制情况 ;MTT法检测不同浓度的As2 O3和DDP对He... 目的 探讨氧化砷 (arsenousoxide ,As2 O3)和顺铂 (cisplatin ,DDP)对喉鳞癌细胞 (Hep 2 )的作用及其机制。方法 用Hep 2细胞株进行传代培养 ,观察As2 O3和DDP对不同培养时间细胞的生长抑制情况 ;MTT法检测不同浓度的As2 O3和DDP对Hep 2细胞存活率的影响 ,并记录细胞形态的变化 ;电镜和 3’ 原位末端标记法 (TUNEL)检测Hep 2细胞凋亡的发生和形态学改变。结果 ①随着药物对Hep 2细胞作用时间的延长 ,细胞生存率明显降低 ,存在时间依赖性。②MTT检测显示 ,As2 O3和DDP对细胞增殖的抑制效应具有剂量依赖性。③光镜观察发现 ,药物作用组细胞出现病变。④电镜和TUNEL染色证实 ,As2 O3和DDP对Hep 2细胞的抑制作用是以促进细胞凋亡为主。结论 As2 O3和DDP可能通过促进细胞凋亡发挥抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 氧化砷 顺铂 喉鳞癌细胞 凋亡
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长链非编码RNA XIST可能通过miR-22/NLRP3促进喉鳞癌细胞增殖 被引量:2
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作者 王剑 周兴玮 何娴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期191-195,共5页
目的:探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)通过miR-22/NLRP3通路对喉鳞状细胞癌(LSCC)增殖的影响。方法:RT-PCR检测34例LSCC患者癌组织和癌旁组织中XIST的表达;CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖活性;Western b... 目的:探讨长链非编码RNA X染色体失活特异转录本(XIST)通过miR-22/NLRP3通路对喉鳞状细胞癌(LSCC)增殖的影响。方法:RT-PCR检测34例LSCC患者癌组织和癌旁组织中XIST的表达;CCK-8法和平板细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖活性;Western blot检测蛋白表达水平。荧光素酶报告分析法验证XIST对miR-22/NLRP3的靶向作用。用XIST siRNA慢病毒治疗BALB/c肿瘤小鼠,观察肿瘤生长变化。结果:与癌旁组织相比,LSCC组织中XIST表达水平较高(P<0.05)。肿瘤分期越高,XIST表达水平越高(P<0.05)。下调XIST表达可抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)。荧光素酶报告分析结果显示,XIST可通过靶向miR-22调节NLRP3。抑制XIST后,miR-22表达水平显著上调(P<0.05),下调XIST表达或miR-22过表达可导致NLRP3表达上调(P<0.05)。用shXIST慢病毒干预LSCC小鼠后,肿瘤体积和重量明显缩小,肿瘤增殖抗原Ki-67和NLRP3表达水平降低(P<0.05)。结论:XIST过表达可通过调控miR-22/NLRP3通路促进LSCC增殖,靶向XIST可能为LSCC的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 长链非编码RNA X染色体失活特异转录本 喉鳞癌细胞 miR-22 NLRP3
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RNA干扰沉默c-Met对喉鳞癌细胞生物学行为影响 被引量:5
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作者 曹峰 曹磊 +3 位作者 张建军 范才 陈坤 张翠红 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第13期1034-1039,共6页
目的近年来细胞间质上皮转换因子(cellular-mesenchymal to epithelial transition factor,c-Met)基因在恶性肿瘤的防治研究中越来越受到关注,本研究旨在探讨c-Met基因对喉鳞癌细胞Hep-2增殖和迁移的影响。方法利用小干扰RNA技术构建低... 目的近年来细胞间质上皮转换因子(cellular-mesenchymal to epithelial transition factor,c-Met)基因在恶性肿瘤的防治研究中越来越受到关注,本研究旨在探讨c-Met基因对喉鳞癌细胞Hep-2增殖和迁移的影响。方法利用小干扰RNA技术构建低表达c-Met的喉癌细胞株Hep-2。实验分为siRNA干扰组、阴性对照组(转染阴性干扰片段)和空白对照组(细胞不做处理)。利用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerse chain reaction,qRT-PCR)检测喉鳞癌细胞Hep-2中c-Met表达含量;采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测c-Met基因对喉癌细胞增殖的影响;应用细胞划痕实验检测c-Met基因对喉癌细胞迁移能力的影响。采用SPSS 25.0对数据进行统计学分析,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两多重比较采用LSD法。结果 qRT-PCR检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组Hep-2细胞中c-Met mRNA的相对表达量分别为1.00±0.00、0.94±0.05和0.42±0.03,3组c-Met mRNA表达均值差异有统计学意义,F=326.9,P<0.000 1;两两多重比较结果显示,空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义,P=0.07。蛋白质印迹法检测结果显示,空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组Hep-2细胞中c-Met蛋白的相对表达量分别为100.00±0.00、117.04±10.56和61.98±15.95,3组c-Met蛋白表达均值差异有统计学意义,F=19.54,P=0.002 4;两两多重比较结果显示,空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义,P=0.108。MTT法检测结果显示,转染24h后,空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组Hep-2细胞吸光度(A)值分别为0.620±0.010、0.600±0.011和0.440±0.046,3组Hep-2细胞A值均值差异有统计学意义,F=37.980,P=0.000 4;两两多重比较结果显示,空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义,P=0.808 3。转染48h后,空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组Hep-2细胞A值分别为1.083±0.038、1.040±0.010和0.643±0.061,3组Hep-2细胞A值均值差异有统计学意义,F=100.500,P<0.000 1;两两多重比较结果显示,空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义,P=0.425 6。细胞划痕实验结果显示,空白对照组、阴性对照组和siRNA干扰组Hep-2细胞划痕修复率分别为(53.381±2.616)%、(54.223±1.935)%和(13.542±0.104)%,3组细胞划痕修复率均值差异有统计学意义,F=458.9,P<0.000 1;两两多重比较结果显示,空白对照组与阴性对照组之间差异无统计学意义,P>0.999 9。结论下调c-Met基因表达能够引起喉鳞癌细胞生物学行为的改变,抑制细胞增殖及细胞迁移,从而在一定程度上抑制肿瘤的发生、发展。 展开更多
关键词 喉鳞癌细胞 C-MET基因 肿瘤增殖 迁移 调控机制
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微小RNA-134靶向叉头盒蛋白M1对喉鳞癌细胞顺铂耐药性的影响 被引量:1
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作者 白云飞 崔晓波 +4 位作者 王博谦 王亚平 杨莉娜 刘佳荣 覃洁 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期2151-2156,共6页
目的探讨微小RNA-134(miR-134)靶向叉头盒蛋白M1(FOXM1)对喉鳞癌细胞顺铂(DDP)耐药株FD-LSC-1/DDP的DDP耐药性的影响。方法体外培养NP69、FD-LSC-1、FD-LSC-1/DDP细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测NP69、FD-LSC-1、... 目的探讨微小RNA-134(miR-134)靶向叉头盒蛋白M1(FOXM1)对喉鳞癌细胞顺铂(DDP)耐药株FD-LSC-1/DDP的DDP耐药性的影响。方法体外培养NP69、FD-LSC-1、FD-LSC-1/DDP细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测NP69、FD-LSC-1、FD-LSC-1/DDP细胞中miR-134、FOXM1 mRNA表达水平。将FD-LSC-1/DDP细胞分为空白对照组、miR-134-mimics-NC组(阴性对照组)、miR-134-mimics组(过表达miR-134)、miR-134-mimics+pcDNA组(共转染miR-134-mimics和pcDNA)、miR-134-mimics+pcDNA-FOXM1组(共转染miR-134-mimics和pcDNA-FOXM1)。倒置荧光显微镜下观察转染效果;以空白对照组、miR-134-mimics-NC组、miR-134-mimics组FD-LSC-1/DDP细胞为研究对象,以qRT-PCR法检测细胞中miR-134表达;以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力及对DDP的耐药性;以流式细胞仪检测细胞凋亡率;以蛋白质印迹法检测FOXM1、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞增殖相关核抗原(Ki-67)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。用TargetScan数据库预测miR-134与FOXM1的靶向关系,通过双荧光素酶报告基因实验加以验证并检测miR-134对FOXM1的调控作用。结果与NP69细胞比较,FD-LSC-1细胞中miR-134表达水平显著降低,FOXM1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与FD-LSC-1细胞比较,FD-LSC-1/DDP细胞miR-134表达水平显著降低、FOXM1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。空白对照组、miR-134-mimics-NC组、miR-134-mimics组的miR-134表达水平分别为1.02±0.15,1.01±0.15,1.57±0.23,药物半数抑制浓度(IC_(50))分别为(24.25±2.05),(23.67±1.78),(8.64±1.57)μg·mL^(-1),细胞增殖抑制率分别为(17.65±2.66)%,(17.63±2.65)%,(45.87±6.88)%,凋亡率分别为(15.09±2.26)%,(14.97±2.25)%,(38.77±5.82)%,miR-134-mimics组与空白对照组、miR-134-mimics-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组、miR-134-mimics-NC组比较,miR-134-mimics组FD-LSC-1/DDP细胞Bax、caspase-3蛋白表达均显著升高,PCNA、Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05)。TargetScan数据库预测显示FOXM1是miR-134的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系;上调FOXM1逆转了miR-134过表达对FD-LSC-1/DDP细胞顺铂耐药性的作用。结论过表达miR-134能提高FD-LSC-1/DDP细胞化疗敏感性,可能是通过靶向下调FOXM1表达实现的。 展开更多
关键词 微小RNA-134 叉头盒蛋白M1 喉鳞癌细胞 顺铂耐药性
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BCL-x_1和BCL-2在喉鳞状细胞癌细胞中的表达
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作者 吕红 《咸宁医学院学报》 2003年第1期39-41,共3页
目的探讨B细胞淋巴瘤 /白血病 2 (B celllymphoma/leukemia 2 ,BCL 2 )基因及B细胞淋巴瘤/白血病 x基因长片段 (B celllymphoma/keukemia x ,long ,BCL x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素 α对其表达的影响。方法采用SABC免... 目的探讨B细胞淋巴瘤 /白血病 2 (B celllymphoma/leukemia 2 ,BCL 2 )基因及B细胞淋巴瘤/白血病 x基因长片段 (B celllymphoma/keukemia x ,long ,BCL x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素 α对其表达的影响。方法采用SABC免疫组织化学染色 ,观察比较干扰素治疗 1 0周后喉癌组织( 2 5例 )和未治疗组 ( 2 7例 )喉癌组织中喉鳞状细胞中BCL x1、BCL 2蛋白的表达。结果①治疗组喉癌组织中BCL x1表达OD值为 0 .1 2 ,未治疗组OD值为 0 .2 1 ,两组表达率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;② 5 2例喉癌组织中均无BCL 2蛋白表达。结论BCL x1可能在喉癌细胞凋亡中发挥抗凋亡作用 ,干扰素 α可能通过抑制BCL 展开更多
关键词 BCL-X1 BCL-2 细胞癌细胞 白血病 干扰素 治疗
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流体剪切力诱导喉鳞癌Hep2细胞上皮-间充质转化 被引量:3
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作者 张莹莹 冯唐 +4 位作者 沈阳 刘静霞 闫志平 刘双凤 刘肖珩 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期384-389,共6页
目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细... 目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细胞迁移能力的变化;共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布;Western blotting检测EMT相关蛋白的表达。结果 FSS力学加载后,Hep2细胞形态由多边形向梭形转变,撤销FSS后,细胞恢复初始的多边形;Hep2细胞迁移能力的增加依赖于FSS加载时间。FSS促使细胞骨架蛋白F-actin重排,从而增强Hep2细胞的迁移行为。FSS使Hep2细胞EMT标志蛋白发生了时序性变化。结论 FSS是诱导Hep2细胞发生EMT的一个重要物理因素。 展开更多
关键词 流体剪切力 喉鳞癌细胞 细胞迁移 上皮-间充质转化
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尼美舒利对人喉鳞癌Hep-2细胞祼鼠移植瘤CD44和MMP-7表达的影响 被引量:2
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作者 覃纲 刘文军 +3 位作者 梁灼萍 陈祖尧 余玲 黎万荣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期490-494,共5页
目的探讨尼美舒利对喉鳞状细胞癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用及机制。方法建立人喉鳞癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤模型,应用尼美舒利处理裸鼠,观察肿瘤生长情况并绘制生长曲线,免疫组织化学技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7蛋白表达,... 目的探讨尼美舒利对喉鳞状细胞癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用及机制。方法建立人喉鳞癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤模型,应用尼美舒利处理裸鼠,观察肿瘤生长情况并绘制生长曲线,免疫组织化学技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7蛋白表达,RT-PCR技术检测移植瘤组织中COX-2、CD44和MMP-7 mRNA表达情况。结果与对照组相比,治疗组肿瘤体积增长较对照组缓慢,体积抑瘤率为63.36%,重量抑瘤率达51.81%,肿瘤体积和重量均明显低于对照组(P均<0.05)。实验组和对照组治疗前后裸鼠体重增长值差异无统计学意义(P>0.05)。实验组COX-2、CD44和MMP-7蛋白及mRNA表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论尼美舒利可有效抑制人喉鳞癌细胞系Hep-2裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制COX-2、CD44及MMP-7表达有关。 展开更多
关键词 选择性环氧化酶-2抑制剂 肿瘤 细胞黏附分子-44 基质金属蛋白酶-7 喉鳞癌细胞
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整合素连接激酶反义寡脱氧核苷酸对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株的作用
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作者 蹇华 陈乾美 +1 位作者 耿勇 裴华 《贵州医药》 CAS 2006年第5期387-390,共4页
目的探讨整合素连接激酶(ILK)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对喉鳞状细胞癌 Hep-2细胞株生物学特性的影响及抑制ILK活性以控制喉鳞状细胞癌细胞生长的可能性。方法应用脂质体包裹的ILK ASODN转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,阻断ILK表达;应用光学... 目的探讨整合素连接激酶(ILK)反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对喉鳞状细胞癌 Hep-2细胞株生物学特性的影响及抑制ILK活性以控制喉鳞状细胞癌细胞生长的可能性。方法应用脂质体包裹的ILK ASODN转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞,阻断ILK表达;应用光学显微镜观察凋亡细胞的形态学改变;通过细胞生长曲线检测细胞的增殖活性;于处理后120h采用膜联蛋白(Annexin- V)/碘化丙啶(PI)联合标记法于荧光显微镜下观察细胞凋亡;于处理后72h以流式细胞术测定细胞凋亡及细胞周期。结果 ASODN组转染后,Hep-2细胞生长受到抑制,细胞凋亡增加,细胞周期发生显著变化:G0/G1期细胞数增多,S期及G2/M期细胞数则减少,与对照组相比,差异有显著意义 (P<0.05);而SODN及NODN组与对照组相比则无明显变化(P>0.05)。结论 ILK ASODN可以抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的生长和增殖,诱导细胞凋亡;应用反义技术抑制ILK活性可能对喉鳞状细胞癌的治疗有意义。 展开更多
关键词 反义寡脱氧核苷酸 整合素连接激酶 细胞癌细胞 细胞凋亡 细胞周期
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Tumstatin治疗喉鳞癌的实验研究 被引量:3
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作者 肖辉 金德均 +3 位作者 王超 徐秀玉 杨静波 刘兴汉 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第4期294-297,共4页
目的探讨肿瘤抑素(Tumstatin)对喉鳞癌细胞(Hep-2)的治疗作用。方法用Hep-2细胞株进行传代培养,台盼蓝法观察Tumstatin和顺铂对不同培养时间细胞的生长抑制情况;MTT法检测不同浓度的Tumstatin对Hep-2细胞存活率的影响,光镜观察细胞形态... 目的探讨肿瘤抑素(Tumstatin)对喉鳞癌细胞(Hep-2)的治疗作用。方法用Hep-2细胞株进行传代培养,台盼蓝法观察Tumstatin和顺铂对不同培养时间细胞的生长抑制情况;MTT法检测不同浓度的Tumstatin对Hep-2细胞存活率的影响,光镜观察细胞形态的变化;电镜和3′-原位末端标记法(TUNEL)检测Hep-2细胞凋亡的发生和形态学改变。结果①随着药物对Hep-2细胞作用时间的延长,细胞生存率明显降低,存在时间依赖性;②MTT检测显示,Tumstatin对细胞的增殖的抑制效应具有剂量依赖性;③光镜观察发现,药物作用组细胞出现病变;④电镜和TUNEL染色证实,Tumstatin对Hep-2细胞的抑制作用是以促进细胞凋亡为主。结论Tumstatin可能通过促进细胞凋亡发挥抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 TUMSTATIN 喉鳞癌细胞 凋亡
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内皮抑素抑制喉鳞癌作用机制的初步探讨 被引量:1
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作者 金德均 王宇 +3 位作者 肖辉 王超 何晶晶 刘兴汉 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第4期282-285,共4页
目的探讨内皮抑素对喉鳞癌细胞(Hep-2)的作用及其可能的机制。方法①MTT法检测不同浓度(10—50μg/ml)的内皮抑素作用72h和30μg/ml的内皮抑素作用不同时间(24—72h)对Hep-2细胞的影响;②电镜观察Hep-2细胞超微结构的变化;③RT-... 目的探讨内皮抑素对喉鳞癌细胞(Hep-2)的作用及其可能的机制。方法①MTT法检测不同浓度(10—50μg/ml)的内皮抑素作用72h和30μg/ml的内皮抑素作用不同时间(24—72h)对Hep-2细胞的影响;②电镜观察Hep-2细胞超微结构的变化;③RT-PCR法检测Hep-2细胞内皮抑素作用组中Survivin基因的表达。结果①MTT检测显示,内皮抑素(20—50μg/ml)能抑制Hep-2细胞的增殖(P〈0.05,P〈0.01),具有剂量.时间依赖性;②电镜观察,Hep-2细胞内皮抑素作用组均出现凋亡改变;③RT-PCR结果,与正常Hep-2细胞对照组相比较药物作用组Survivin基因表达受到部分抑制,差异呈显著性(P〈0.01)。结论内皮抑素能抑制喉鳞癌Hep-2细胞,并具有时间-剂量依赖性,机制可能为诱导细胞凋亡。提示,内皮抑素可能通过诱导喉癌细胞本身的凋亡,对喉癌的生长与转移起到抑制作用。 展开更多
关键词 内皮抑素 喉鳞癌细胞 凋亡
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芒柄花黄素通过调控miR-140-5p/TIGIT轴影响喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡
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作者 武川军 彭丽娜 +1 位作者 韩海平 冯志星 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2023年第1期1-9,共9页
目的:探讨芒柄花黄素对喉鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:体外培养人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2,以MTT法检测0、5、10、20、40、60μmol/L芒柄花黄素处理24 h后Hep-2细胞活力,根据IC50值筛选出芒柄花黄素合适作用浓... 目的:探讨芒柄花黄素对喉鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:体外培养人喉鳞状细胞癌细胞系Hep-2,以MTT法检测0、5、10、20、40、60μmol/L芒柄花黄素处理24 h后Hep-2细胞活力,根据IC50值筛选出芒柄花黄素合适作用浓度。Hep-2细胞分别采用20、40μmol/L芒柄花黄素,40μmol/L芒柄花黄素+阴性对照(转染mirRNA-140-5p抑制剂阴性对照),40μmol/L芒柄花黄素+miR-140-5p inhibitor干预细胞敲减干预Hep-2细胞。分组转染及药物处理后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫印迹检测Hep-2细胞miR-140-5p与T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白(TIGIT)表达;采用MTT法和平板集落形成实验检测Hep-2细胞增殖;采用流式细胞实验检测Hep-2细胞凋亡;采用免疫印迹检测Hep-2细胞增殖(PCNA、Cyclin D1)与凋亡相关蛋白(Bax、cleaved caspase-3)表达。于裸鼠背部皮下注射Hep-2细胞构建裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组,25、50 mg/kg芒柄花黄素组,50 mg/kg芒柄花黄素+阴性对照组,50 mg/kg芒柄花黄素+miR-140-5p敲减组,分组处理后,检测各组裸鼠移植瘤质量与体积;采用双荧光素酶报告实验分析Hep-2细胞miR-140-5p对TIGIT的靶向调控。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果:与对照比较,20、40μmol/L芒柄花黄素干预细胞miR-140-5p表达(1.79±0.16、2.58±0.22比1.04±0.11)、凋亡率[(36.17±8.14)%、(68.65±14.20)%比(2.10±0.65)%]、Bax与cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),TIGIT蛋白(0.56±0.12、0.17±0.01比0.98±0.10)与mRNA表达(0.68±0.10、0.34±0.03比1.05±0.13)、集落生成率[(60.82±12.24)%、(35.36±8.20)%比(100.0±0.00)%]、细胞活力(63.12±11.03、39.75±7.14比100.0±0.00)、PCNA与Cyclin D1蛋白表达降低(P<0.05);与40μmol/L芒柄花黄素比较,芒柄花黄素+miR-140-5p敲减细胞miR-140-5p表达(1.11±0.13比2.58±0.22)、凋亡率[(5.04±1.51)%比(68.65±14.20)%]、Bax与cleaved caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),TIGIT蛋白(0.92±0.18比0.17±0.01)与mRNA表达(0.97±0.14比0.34±0.03)、集落生成率[(90.76±15.02)%比(35.36±8.20)%]、细胞活力(92.01±17.13比39.75±7.14)、PCNA与Cyclin D1蛋白表达升高(P<0.05);动物实验中,与对照组比较,25、50 mg/kg芒柄花黄素组裸鼠移植瘤质量[(609.23±58.14)、(465.87±41.26)比(762.14±76.51)mg]降低,体积[(532.82±60.28)、(396.34±48.10)比(681.70±72.44)mm^(3)]减小(P<0.05);与50 mg/kg芒柄花黄素组比较,芒柄花黄素+miR-140-5p敲减组裸鼠移植瘤质量[(735.48±80.12)比(465.87±41.26)mg]升高,体积[(654.79±75.85)比(396.34±48.10)mm^(3)]增加(P<0.05);Hep-2细胞miR-140-5p可靶向下调TIGIT表达。结论:芒柄花黄素通过调控miR-140-5p/TIGIT轴表达抑制喉鳞状细胞癌细胞增殖活性,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 芒柄花黄素 miR-140-5p/TIGIT 细胞癌细胞 增殖 凋亡
原文传递
组合培养下Hep-2对EPCs的影响
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作者 赖怡 张怡 +2 位作者 刘肖珩 曾烨 吴江 《浙江临床医学》 2015年第9期1470-1472,共3页
目的探讨喉鳞癌细胞与内皮祖细胞组合培养后对两种细胞的影响。方法在组合培养后,观察内皮祖细胞的细胞增殖、凋亡、细胞周期以及成血管能力变化。通过免疫组化检测细胞表面分子标注物的变化。结果在与喉鳞癌细胞组合培养后,内皮祖细... 目的探讨喉鳞癌细胞与内皮祖细胞组合培养后对两种细胞的影响。方法在组合培养后,观察内皮祖细胞的细胞增殖、凋亡、细胞周期以及成血管能力变化。通过免疫组化检测细胞表面分子标注物的变化。结果在与喉鳞癌细胞组合培养后,内皮祖细胞的细胞增殖和凋亡均增加,上调细胞表面标志物。喉鳞癌细胞~scin.1表达上调,内皮祖细胞的成血管能力加强。结论内皮祖细胞与喉鳞癌细胞组合培养可以导致细胞生物学特性和成血管能力的变化,从而促进肿瘤血管生成。 展开更多
关键词 FASCIN-1 组合培养 喉鳞癌细胞 内皮祖细胞 肿瘤血管生成
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颈、甲状腺
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《中国癌症防治杂志》 CAS 1994年第2期100-103,共4页
关键词 喉鳞癌细胞 滤泡状癌 头颈部 未分化癌 滤泡状腺癌 功能性颈廓清术 杀伤活性 术中冰冻切片 乳头状癌 陈铭忠
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Prognostic Value of Ki67 and VE6F Expression in Laryngeal Squamous Cell Carcinoma 被引量:1
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作者 Dawei Sun Yanjun Wang Weijia Kong Banghua Liu 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2006年第1期20-24,共5页
OBJECTIVE To investigate the prognostic value of measuring Ki67 and VEGF expression in laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). METHODS The expression of Ki67 and VEGF in 32 LSCC tissues was studied by immunohistoche... OBJECTIVE To investigate the prognostic value of measuring Ki67 and VEGF expression in laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). METHODS The expression of Ki67 and VEGF in 32 LSCC tissues was studied by immunohistochemical staining. Of these cases, 5 recurred (recurrent group), 3 cases metastasized (metastatic group), 8 cases died (deceased group) and 24 cased survived (survival group) over a 3 year period of follow-up after their operation. RESULTS The expression of Ki67 and VEGF in the deceased group was higher compared to that in the survival group (P<0.01). Overexpression of Ki67 was found in the recurrent group and in the metastatic group (P< 0.05). VEGF expression was higher in the recurrent group than in the non recurrent group (P<0.05). With Cox-regression of multivariate analysis, Ki67 (RR:3.236; P=0.001), the clinical T stage (RR: 1.382; P=0.029) and metastasis in lymph nodes (RR:0.316; P=0.033) were shown to be independent prognostic factors for survival of LSCC patients. CONCLUSION Ki67 and VEGF expression is related to the prognosis of LSCC. Overexpression of the 2 markers indicated poor prognosis of the disease, a finding which might be helpful for the treatment of laryngocar-cinoma. 展开更多
关键词 laryngeal neoplasms CARCINOMA squamous cell KI67 endothelial growth factors prognosis.
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中国耳鼻咽喉头颈外科
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《中国医学文摘(耳鼻咽喉科学)》 2006年第6期369-370,共2页
内皮抑素体外抑制喉鳞状细胞癌细胞的效果观察,鼻腔结构异常的修正性鼻内镜手术,单侧慢性筛上颌窦炎症的CT特征分析,脉搏传导时间在儿童睡眠呼吸阻塞诊断中的应用,
关键词 耳鼻咽头颈外科 细胞癌细胞 修正性鼻内镜手术 中国 脉搏传导时间 上颌窦炎症 体外抑制 内皮抑素
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