喙尾琵琶甲防御液季节性变化及抗菌活性比较

喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire是云南彝族长期广泛使用的昆虫药物,其虫体和防御液均具有很高的药用价值。为明确药用昆虫喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性的季节性变化,本研究通过常规饲养喙尾琵琶甲成虫,每月初对该昆虫尾部采用直接刺激法收集防御液,观察其状态特征,应用GC-MS分析其组成及组分含量变化,并选择具有季节特征月份的防御液测定其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,防御液月采集率为0.06%~0.40%,年均采集率0.22%,月间分泌量差异较大。不同月份采集的防御液的状态及抑菌效果亦有所差异,在气温较低月份采集的防御液不分层,颜色为红棕色,采集的量相对偏低,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色假丝酵母菌的MIC等于或大于512μg/mL;气温较高的月份所得防御液,分层情况良好,液体呈现黄棕色,采集的量相对偏高,对金黄色葡萄球菌的MIC为64μg/mL,大肠埃希菌的MIC为256μg/mL,白色假丝酵母菌的MIC为512μg/mL。通过GC-MS分析鉴定出喙尾琵琶甲防御液中的6个主要组分:对苯醌,2-甲基-1,4-苯醌,2-乙基-1,4-苯醌,1-十三烯、2-甲基-1,4-苯二酚和4-乙基-1,3-苯二酚,比较发现1-12月间采集防御液的主要成分及各组分相对含量差异较大。综上所述,喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性会呈现出季节性的差异,其抗菌活性的差异与醌类、酚类组分相对含量的变化有关。

喙尾琵琶甲肠道来源真菌的分离及其次级代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性筛选

目的研究药用昆虫喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera成虫肠道的活性真菌,为抗菌、抗肿瘤活性天然产物的开发提供新的真菌资源。方法结合稀释涂布法和选择培养法对喙尾琵琶甲成虫肠道的真菌进行分离纯化;以9株病原菌为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法检测肠道真菌次级代谢产物的抗菌活性;结合形态学,通过分子生物学方法进行ITS序列比对,鉴定抗菌活性显著的真菌并构建系统发育树;采用5株肿瘤细胞,对已鉴定的菌株进行抗肿瘤活性测试。结果从喙尾琵琶甲肠道中分离获得108株真菌,其中17株真菌具有不同程度的抗菌活性;选择7株抑菌活性显著(抑菌圈直径≥14 mm)的真菌进行鉴定;研究还显示3株真菌的次级代谢产物具有广谱的抗肿瘤活性。结论喙尾琵琶甲肠道来源真菌的次级代谢产物具有一定的抗菌及抗肿瘤活性。

云南药用昆虫喙尾琵琶甲蛹的体外抗氧化活性研究

为明确喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire的蛹不同溶剂提取物的体外抗氧化活,为喙尾琵琶甲全虫态利用价值的开发提供数据支持。采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水4种不同极性的溶剂提取喙尾琵琶甲蛹,以DPPH法,ABTS法和FRAP法探究不同溶剂提取物体外抗氧化活性强弱。研究结果表明,喙尾琵琶甲蛹的甲醇和水提取物对DPPH自由基和ABTS自由基均有较强清除能力。在提取物浓度为0.5 mg/mL时,水提物和甲醇提取物对两种自由基清除率均达到90%以上,乙酸乙酯提取物和正己烷提取物对两种自由基的清除率较低,清除率均在5%以下,甲醇和水提取物对DPPH自由基清除率的LC50分别为0.144 mg/mL和0.029 mg/mL,对ABTS自由基清除率的LC50分别为和0.0044 mg/mL和0.0082 mg/mL。水粗提物的总抗氧化能力强于甲醇粗提物,浓度为0.5 mg/mL时,甲醇粗提物的总抗氧化能力的FRAP值为0.26,水粗提物的总抗氧化能力的FRAP值0.86。综上所述,研究喙尾琵琶甲蛹水提物的体外抗氧化活性最高,本研究为喙尾琵琶甲蛹体外抗氧化活性评价的首次报道,对喙尾琵琶甲蛹利用价值的研究具有重要意义。

喙尾琵琶甲乙酸乙酯提取物对卵巢癌治疗的研究进展

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,传统治疗方式主要是手术加化疗,但复发及耐药性的问题亟须解决。中医药在肿瘤治疗方面的应用日趋广泛,多种中药的乙酸乙酯部位有抗肿瘤作用。喙尾琵琶甲作为一种药用昆虫,具有抑菌、抗氧化等作用,民间有很多验方用于肿瘤治疗。喙尾琵琶甲乙酸乙酯提取物作为含酚类最丰富的部位,可通过清除DPPH自由基,调控STAT3/VEGF信号通路,显著抑制卵巢癌细胞的生长;同时通过下调β-catenin、CyclinD1蛋白的表达,阻断Wnt信号通路,影响细胞周期,从而抑制癌细胞的增殖,发挥抗肿瘤特性。该综述基于现有的研究成果,对喙尾琵琶甲乙酸乙酯提取物对卵巢癌的作用展开综述,以期开发新的药用昆虫资源,为卵巢癌的治疗提供新思路。

云南省喙尾琵琶甲分布及生态环境调查

对云南省15个地区26个县(市、区)的调查表明,喙尾琵琶甲在云南民间广泛利用,是一种具有重大利用价值的民族药用昆虫;喙尾琵琶甲在云南省均有分布,其中滇中、滇东高原分布较为集中,适生区年均气温为13～19℃,年均降水量为750～1 100 mm,海拔为1 500～2 100 mm。垂直分布的海拔范围在760～2 450 m之间。喙尾琵琶甲成虫生境多局限于居民房屋、牲畜圈舍,幼虫栖息于疏松土壤,以谷糠、玉米面、面粉等为食,未发现野外分布。根据其适生的温度、降水量和食性推测其潜在分布区,表明西南地区为其分布的核心区域。目前通称的云南琵琶甲应为喙尾琵琶甲。

喙尾琵琶甲提取物体外抗菌作用初步研究

目的研究喙尾琵琶甲甲醇和水提取物的抗菌活性。方法采用试管稀释法测定喙尾琵琶甲甲醇和水提取物对11种临床常见的病原菌的MIC及MBC,初步判定其抑菌效果。结果甲醇和水提取物在体外对10种细菌有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌作用最强,对痢疾杆菌无明显作用;甲醇提取物抗菌作用强于水提取物。结论喙尾琵琶甲甲醇和水提取物均对所测试菌种具有良好的体外抗菌作用。

彝药喙尾琵琶甲的研究进展

喙尾琵琶甲是云南彝族地区长期使用的一种药用昆虫,药材资源丰富,民间应用广泛,对一些疑难杂症有显著的疗效。文章对喙尾琵琶甲的药材性状、自然分布、化学成分、药理作用和民间应用进行综述,指出有必要对喙尾琵琶甲的化学成分、药理作用及临床应用进行进一步的研究和开发利用,使这一民族药物中的瑰宝更好地为人类服务。

药用昆虫喙尾琵琶甲化学成分研究

目的:研究喙尾琵琶甲的化学成分,为开发利用该资源提供实验依据。方法:采用反复硅胶柱色谱和凝胶柱色谱进行分离纯化,通过现代波谱技术鉴定化合物结构。结果:从喙尾琵琶甲的乙酸乙酯萃取浸膏中分离鉴定了5个化合物,其中1个长链脂肪醇甘油醚,1个甾醇,3个苯酚类化合物。分别鉴定为2-乙基-3,6-二羟基苯甲酸甲酯(1),3-十八烷氧基-1,2-丙二醇(2),2-甲基对苯二酚(3),2-乙基对苯二酚(4),胆甾醇(5)。结论:化合物1和2为首次从该昆虫中分离得到。

喙尾琵琶甲不同极性段提取物的体外抗氧化活性研究

目的研究喙尾琵琶甲不同极性溶剂萃取物的体外抗氧化活性。方法将喙尾琵琶甲的醇提物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,通过DPPH法和ABTS法测定各组分的清除自由基的能力,并计算各组分的IC50。结果喙尾琵琶甲的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物清除DPPH自由基的IC50分别为672.98,23.35,85.81,620.28,616.29 mg/L,清除ABTS自由基的IC50分别为143.68,2.98,8.24,29.77,72.37 mg/L。其中氯仿部位清除ABTS自由基的能力强于Vit E。结论氯仿和乙酸乙酯部位具有较好的抗氧化活性,前者活性高于后者,这为进一步开发利用喙尾琵琶甲中的抗氧化活性物质提供了实验依据。

药用昆虫喙尾琵琶甲油脂化合物的气相色谱-质谱分析

目的分析喙尾琵琶甲油脂的化学成分,为开发利用该资源提供实验依据。方法采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪,分析琵琶甲油脂的化学成分。结果从中鉴定出43个组分,占峰面积的92.61%,主要成分是不饱和脂肪酸及其酯。结论预示喙尾琵琶甲油脂具有一定防治心血管疾病和抗肿瘤作用。

喙尾琵琶甲对大鼠酒精性肝损伤保护作用的观察

目的观察喙尾琵琶甲对大鼠酒精性肝损伤保护作用的影响。方法采用白酒连续灌胃8周的方法建立酒精性肝损伤大鼠模型。从第9周开始,以护肝片为对照,各组以相应药物连续灌胃4周。末次给药后12 h,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)量;观察肝组织病理变化。结果低、中剂量喙尾琵琶甲可降低肝损伤大鼠血清中ALT、AST活性和肝组织中MDA量,并能提高T-SOD活性;肝组织病理学检查显示低、中剂量喙尾琵琶甲可减轻肝细胞病变。结论低、中剂量喙尾琵琶甲对酒精性肝损伤有一定的保护作用。

喙尾琵琶甲提取物的体外抗肿瘤活性研究

[目的]观察喙尾琵琶甲提取物对体外培养人肿瘤细胞株的生长抑制作用。[方法]喙尾琵琶甲粗提物,通过硅胶柱层析分离得不同极性部分,运用MTT法观察不同部分对人白血病细胞株K562和HL-60、人肺癌细胞株A549的生长抑制情况。[结果]粗提物、石油醚和氯仿部分三者最高浓度(300μg/ml)对K562、HL-60、A549的生长抑制率均>69%,半数抑制浓度(IC50)均<100μg/ml。[结论]喙尾琵琶甲粗提物、石油醚和氯仿部分对K562、HL-60、A549的生长具有很好的抑制作用。

彝族药喙尾琵琶甲中重金属的含量测定

目的测定及对比不同地区喙尾琵琶甲中重金属含量。方法采用原子荧光光度法测定云南省6个地区的喙尾琵琶甲中重金属元素砷、铅、汞和铬的含量。结果发现重金属As的含量除临沧地区外都超出标准限定;重金属Cd的含量除曲靖市区外都超出标准限定;重金属Hg的含量只有临沧地区超出标准限定;重金Pb的含量都在限定范围内。结论云南省不同地区的喙尾琵琶甲中的重金属含量存在显著差异。

喙尾琵琶甲提取物体外抗菌作用研究

目的:研究喙尾琵琶甲不同极性组分的抗菌活性,筛选出抗菌活性部位。方法:通过硅胶柱层析得到不同极性的组分,采用试管稀释法测定不同组分对6种临床常见的病原菌的MIC及MBC。结果:乙酸乙酯、丙酮洗脱组分有较好的体外抗菌作用,乙酸乙酯组分活性强于丙酮组分;石油醚、氯仿、甲醇组分对所测菌株没有体外抗菌作用。结论:喙尾琵琶甲提取物具有良好的体外抗菌作用,乙酸乙酯组分为体外抗菌活性部位。

HPLC法测定喙尾琵琶甲药材中氨基酸的含量

[目的]建立HPLC法测定喙尾琵琶甲中氨基酸含量的方法。[方法]用盐酸水解、邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生,0.55%磷酸二氢钠缓冲液(pH7.80)-甲醇-乙腈为流动相,柱温35℃,检测波长338 nm,梯度洗脱后测定喙尾琵琵甲药材中氨基酸的含量。[结果]各氨基酸衍生物在40 m in内均能得到良好地分离,r为0.997 0～1.000 0(n=6),平均回收率为90.16%～104.1%,RSD为1.89%～5.92%。[结论]该方法简便、准确、重现性好,可作为喙尾琵琶甲中氨基酸含量的测定方法。

喙尾琵琶甲流浸膏的镇痛及抗炎作用研究

目的:观察喙尾琵琶甲流浸膏对小鼠的镇痛及抗炎作用。方法:用热板法和醋酸扭体法测定小鼠的痛阈值,二甲苯耳肿胀法测定抗炎作用。结果:喙尾琵琶甲流浸膏高、低剂量组均能提高扭体小鼠痛阈值,高剂量组能显著提高热板实验小鼠痛阈值;喙尾琵琶甲抗炎作用不明显。结论:喙尾琵琶甲流浸膏具有明显的镇痛作用,抗炎作用不明显。

喙尾琵琶甲抗菌活性的研究

目的：观察喙尾琵琶甲乙醇提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外抑菌活性。方法：采用试管稀释法测定喙尾琵琶甲乙醇提取物对5株临床分离的MRSA菌株的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,初步判断其抑菌效果。结果：喙尾琵琶甲乙醇提取物对5株MRSA的MIC值为0.98~1.95 mg/mL,MBC值为3.9~7.8 mg/mL。结论：喙尾琵琶甲乙醇提取物具有良好的体外抑菌活性。

喙尾琵琶甲乙醇提取物急性毒性实验研究

以喙尾琵琶甲乙醇提取物对小白鼠灌胃,观察小白鼠死亡情况及相关指标的变化情况,评价其安全性。实验结果证明小白鼠灌胃喙尾琵琶甲乙醇提取物的最大耐受量为500 g(生药)/kg体重,即喙尾琵琶甲乙醇提取物无明显毒性,在常规剂量下服用是安全可行的。

喙尾琵琶甲的研究进展

喙尾琵琶甲(Blaps rynchopetera Fairmaire)属鞘翅目(Coleoptera)拟步甲科(Tenebrionidae)琵琶甲属(Blaps),在云南民间用于一些疑难病症和常见病的治疗,近些年来对它的研究报道逐渐增多.文章综述了喙尾琵琶甲的分布、生态、化学成分分析和资源开发方面的研究进展,为喙尾琵琶甲的进一步研究和开发提供参考.

彝药喙尾琵琶甲的药材质量标准研究

目的:制定彝药喙尾琵琶甲药材质量标准,为药用动物资源的开发利用提供科学依据。方法:采用生药学和薄层色谱法对其进行研究,并测定其水分、灰分和浸出物的含量。结果:对喙尾琵琶甲的性状、显微特征进行了描述;对三个不同产地的喙尾琵琶甲进行了薄层色谱鉴别,测定了水分、总灰分、酸不溶性灰分、重金属和浸出物的含量。结论:较全面的考察了喙尾琵琶甲的各项质量指标,为制定喙尾琵琶甲的质量标准提供了依据。