采用高效液相色谱-串联质谱法检测鲫鱼组织3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留量

将待测鱼肉和鱼皮匀浆样品经碱水解、液-液萃取后,采用HPLC-TMS方法对其中的3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)残留量进行了检测。结果,此方法的最低检测限为1.16μg/kg,市售鲫鱼样品中MQCA的含量低于检测限。结果表明,HPLC-TMC灵敏,易操作,能满足鱼组织内MQCA残留量检测的要求。

免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱检测鱼虾中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸

将特异性强的免疫亲和柱应用到3-甲基-喹噁啉-2-羧酸（methyl-3-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA）的净化中,建立鱼虾中MQCA的免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱的快速分析方法。匀质好的样品经2 mol/L盐酸溶液酸解后,将提取液pH值调节至7～8,经过免疫亲和柱富集和净化后,采用超高效液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱分离,电喷雾正离子多反应监测模式监测。结果显示,水产品中MQCA在1.0～50.0 ng/mL范围内呈良好线性,线性相关系数大于0.995,定量限为1.0μg/kg。MQCA在1.0、5.0μg/kg和20.0μg/kg3种添加水平条件下的加标回收率为74.2%～86.5%,相对标准偏差小于10%。结果表明本方法重复性好、灵敏度高,适合水产品中MQCA的实际测定。

3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的合成

以喹乙醇为原料，经酸性还原，碱性水解、中和后得到3-甲基-喹噁啉-2-羧酸，探讨了反应条件对产率的影响。结果表明，喹乙醇在铁粉的酸性水溶液中活化后，85-90℃还原1h，有机溶剂萃取得到N-羟乙基-3-甲基-2-喹噁啉酰胺，而后在12％氢氧化钠溶液中80-90℃水解6h，盐酸酸化，得到纯度大于98％的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸，总收率为60.6％。

液相色谱-串联质谱法测定猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸

目的建立液相色谱-串联质谱法测定猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)含量的分析方法。方法猪肝匀浆中的喹乙醇标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸经乙腈提取,MAX固相萃取柱净化,2%的甲酸乙酸乙酯溶液洗脱收集,浓缩定容。分析样品采用C18色谱柱分离,以乙腈、0.1%甲酸溶液为流动相,多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式测定,内标法定量。结果喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸在0.5~100μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r大于0.99;该方法的检出限和定量限均为0.5μg/kg;喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸在0.5、5.0、20μg/kg添加水平的回收率为97.7%~101.4%,相对标准偏差小于3.54%。结论该方法简单快速、准确、灵敏,适用于猪肝中喹乙醇残留标示物3-甲基喹噁啉-2-羧酸的快速检测。

基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法同时检测猪肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸

该研究建立一种基于免疫磁珠分离、净化和富集的快速、灵敏的胶体金免疫层析同时检测猪肉中的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methylquinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)残留的方法。利用免疫磁珠快速提取猪肉中的MQCA和QCA,磁场快速分离,加热洗脱并富集,然后用胶体金免疫层析法检测,可在5 min内完成,MQCA定性和定量检测限均为0. 1μg/kg(QCA定性和定量检测限均为0. 25μg/kg)。结果表明,经过优化后试纸条最佳工艺为抗体标记浓度2. 5 mg/mL,抗原(T线)划膜浓度1. 2mg/mL,羊抗鼠二抗(C线)划膜浓度1. 0 mg/mL,制备免疫磁珠时亲和素磁珠与抗体最佳偶联量为40μg/mg,MQCA和QCA样本添加浓度分别为0. 1、0. 5、2和0. 25、1. 25、5μg/kg,回收率为89. 9%～115. 2%,变异系数为6. 8%～11. 5%。用基于免疫磁珠的胶体金免疫层析法和液相色谱-质谱/质谱技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时对20个市售猪肉样本检测,一致性较好,证明胶体金免疫检测方法可以用于实际猪肉样本中MQCA和QCA的快速定性和定量检测。

液相色谱-串联质谱测定鸡肉中喹乙醇残留标示物3-甲基喹恶啉-2-羧酸

建立了简便、灵敏、科学和可靠的液相色谱-串联质谱测定鸡肉中喹乙醇残留标示物3-甲基喹恶啉-2-羧酸(MQCA)的分析方法。采用给鸡灌服喹乙醇的方式,获得含MQCA的鸡肉试样,比较了酶解、酸解和碱解等方法水解鸡肉中MQCA的效率,实验表明,碱水解鸡肉组织得到最高含量的MQCA。样品经1.0 mol/L氢氧化钠溶液水解,正己烷除脂,MAX混合型阴离子交换固相萃取柱直接净化,采用C_(18)反相色谱柱分离,质谱选择反应监测模式检测。结果表明:MQCA在1.0~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r^2)大于0.99;方法检出限为0.4μg/kg。在1.0、5.0和50.0μg/kg 3个添加水平下,采用外标法定量,MQCA的平均回收率为71.7%~82.4%,采用内标法定量,其回收率为96.3%~103.7%,相对标准偏差均小于6.0%。该方法适用于动物性食品中3-甲基喹恶啉-2-羧酸残留的日常监测。

喹乙醇代谢残留标识物3-甲基喹恶啉-2-羧酸检测方法的优化

建立鸡肉中喹乙醇代谢标识物3-甲基喹恶啉-2-羧酸(MQCA)的高效液相色谱-串联四级杆质谱(UPLC-MS/MS)残留分析方法。样本在一定温度下酶解、盐酸酸化后,用酸乙酯提取,吹干浓缩后再用0.1%甲酸水溶液+乙腈(V∶V=1∶9)溶解,加入正已烷除杂;以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,经C18柱分离,采用多反应监测(MRM)正离子模式进行检测。实验结果表明,MQCA提取效果好,检出限为0.05μg/kg,在0.5μg/kg^5.0μg/kg添加水平的平均回收率在73.72%~95.22%之间,相对标准偏差为1.27%~2.79%。本方法适用于鸡肉组织中喹乙醇代谢物残留检测。

南美白对虾中喹乙醇及其代谢物3-甲基-喹恶啉-2-羧酸残留的高效液相色谱-串联质谱检测

以南美白对虾为试验材料,建立了喹乙醇(OLA)及3-甲基-喹恶啉-2-羧酸(MQCA)多残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)确证检测法.组织样品经2 mol/L盐酸提取,Oasis HLB固相萃取柱净化,采用HPLC-MS/MS仪进行测定.质谱检测采用正离子选择反应监测模式,外标法定量.样品中OLA和MQCA质量分数分别为2～200和4～200 μg/kg时,线性关系良好;当质量分数分别为2～50和4～50 μg/kg时,平均回收率为93.9％～103.2％,变异系数为6.3％～11.5％.OLA及MQCA的检测限分别为0.5和1.0 μg/kg,定量限分别为2.0和4.0 g/kg.该方法灵敏、准确、简便、快速,适于南美白对虾中OLA及MQCA残留的同时定量分析和确证检测.

3-甲基喹噁啉-2-羧酸的制备及其细胞毒性

通过贝鲁特反应和还原、脱羧反应在体外合成制备3-甲基喹噁啉-2-羧酸,并进行理化鉴定和抗菌活性测试;通过MTT方法研究3-甲基喹噁啉-2-羧酸对多种细胞的生长抑制作用,利用单细胞电泳研究其对细胞DNA的损伤作用,利用流式细胞术研究其对细胞周期的改变。结果显示,体外成功合成制备出3-甲基喹噁啉-2-羧酸,而3-甲基喹噁啉-2-羧酸几乎没有抗菌效果,对多种细胞的生长抑制作用较弱,在剂量检测范围内细胞抑制率不到30%,但在一定剂量下能导致细胞DNA损伤,主要表现为尾长和尾部DNA含量显著升高;并且3-甲基喹噁啉-2-羧酸也能改变Chang细胞的细胞周期,表现为S期阻滞。结果表明,3-甲基喹噁啉-2-羧酸具有一定的细胞毒性。

喹乙醇残留标示物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的合成方法

采用5种方法合成3-甲基-喹噁啉-2-羧酸,包括文献的4种合成方法以及结合这4种方法设计的新方法。通过高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法、核磁共振法对合成产物进行鉴定,并对5种合成方法进行比较,结果表明:结合HPLC保留时间、HPLC-MS鉴定以及核磁共振鉴定的结果,确定5种方法所合成物质均为3-甲基-喹噁啉-2-羧酸;5种方法中,新的3-甲基-喹噁啉-2-羧酸合成方法的得率最高,为51%,纯度大于99%。此方法操作最为简便,且安全性高。

3-甲基-喹噁啉-2-羧酸半抗原的定向合成与鉴定

为实现定向合成3-甲基-喹噁啉-2-羧酸半抗原,针对3-甲基-喹噁啉-2-羧酸与4-氨基丁酸反应合成3-甲基-喹噁啉-2-羧酸半抗原进行全面研究。通过单因素试验和正交试验对试验条件进行优化,结果表明:氯甲酸异丁酯和4-氨基丁酸的添加量对半抗原的定向合成至关重要,当两者的添加量不当时就会生成副产物,甚至导致目标半抗原得率为0%;此外,确定了半抗原最佳合成条件:氯甲酸异丁酯120μL、3-甲基-喹噁啉-2-羧酸与4-氨基丁酸的物质的量比1∶2.5、活化时间1 h、反应时间1 h,在此条件下,得率高达76.92%。经纯化半抗原纯度>99%(高效液相色谱检测)。本研究实现了3-甲基-喹噁啉-2-羧酸半抗原的定向合成,为抗体制备和相关快速检测产品开发提供了坚实的基础。

喹啉-2-羧酸标准物质的制备研究

建立了一种喹啉-2-羧酸(QCA)合成工艺路线,选择适当的方法对产品进行纯化,制备标准品候选物,并利用IR、UV、1HNMR和MS技术对其进行定性鉴定。卡尔费休法和热重分析法分别用于水分和无机杂质的分析;建立优化了QCA主成分定值的高效液相色谱(HPLC)法,对含量进行测定;对喹啉-2-羧酸进行了均匀性、稳定性研究。结果表明,研制的喹啉-2-羧酸标准物质均匀性良好,稳定时间12个月,可以用于残留检测的定性和定量分析。

UPLC-MS/MS法测定火锅底料中三种喹噁啉类药物

采用超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱同时检测火锅底料中3种喹噁啉药物,样品经过乙腈-乙酸乙酯提取后,以乙腈-0.2%甲酸作为流动相,采用多反应检测正离子模式进行定性及定量分析。结果表明,3种喹噁啉类药物的线性关系良好,相关系数均在0.999以上,不同浓度的平均加标回收率在66.5%~84.4%,平均相对标准偏差为6.8%~9.2%,该方法适用于火锅底料中3种喹噁啉类药物残留的检测。

^(60)Co-γ辐照对食品中4种苏丹红染料和2种兽药残留的降解研究

采用60Co-γ辐照分别对含有3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)、氯霉素和苏丹红Ⅰ~Ⅳ的动物源食品进行处理,设置辐照剂量为0~10 k Gy,考察了其在不同辐照剂量下的降解情况。结果表明,当辐照剂量为9 k Gy时,鸡肉中MQCA和蛋液中苏丹红Ⅰ~Ⅳ的降解效果非常显著,降解率分别为99.0%和83.5%~95.7%;而蛋粉中的苏丹红Ⅰ~Ⅳ的降解效果相对较差,降解率仅为9.3%~22.3%;鳗鱼冻干粉中氯霉素的降解效果比较显著,降解率为75.3%。随着辐照剂量的增大,其降解率逐渐增大。研究表明辐照处理可对食品中某些化合物产生有效降解。

超高效液相色谱串联质谱法测定猪尿液中3-甲基喹(口奎)啉-2羧酸(MQCA)的残留量

本试验建立了一种用超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC—MS/MS)测定猪尿液中喹乙醇代谢物3-甲基喹(?)啉-2羧酸(MQCA)的残留量的检测方法。猪尿液经氢氧化钠溶液碱性条件下水解,在酸性条件下经混合型阴离子固相萃取柱净化,过0.22μm滤膜后,超高效液相色谱串联质谱仪进行定量测定。试验结果表明,MQCA浓度在5 ng/mL^100 ng/mL范围内呈良好的线性关系。当猪尿液中MQCA含量在1 ng/mL^100 ng/mL时,平均添加回收率为70%~100%之间,最低检测限为1 ng/nL。本方法操作简便、快速,结果稳定、可靠,可满足猪尿液中MQCA的含量检测。

高效液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中的喹烯酮标示残留物

采用液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定鸡组织(肌肉、肝、肾)中喹烯酮标示残留物3-甲基喹啉-2-羧酸的含量。组织匀浆样品经碱水解、液液萃取,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM),以喹啉-2-羧酸为内标进行定量。检出限为5μg/kg。

超高压液相色谱-串联质谱法测定鱼组织中卡巴氧及喹乙醇代谢物

目的建立鱼组织中卡巴氧代谢物喹恶啉-2-羧酸(QCA)及喹乙醇代谢物3-甲基-喹恶啉-2-羧酸(MQCA)的超高压液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)残留分析方法.方法样品在一定温度、Tris/HCL缓冲溶液作用下,经蛋白酶酶解,浓盐酸酸化,乙酸乙酯提取,提取液吹干后加入20%甲醇水溶解,过PAX固相萃取柱净化、富集;以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,经HSS T3色谱柱分离,采用多反应监测(MRM)正离子模式进行检测.结果 QCA和MQCA定量限(LOQ)均为0.5μg/kg ,在0.5~5.0μg/kg添加水平的平均回收率在93.1%~101.2%之间,相对标准偏差为1.4%~5.5%.结论本方法适用于鱼组织中卡巴氧及喹乙醇代谢物残留检测.

UPLC-MS/MS法测定金沙江水域鱼体中卡巴氧及喹乙醇代谢物

采用同位素内标-超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)法测定金沙江攀枝花江段6种常见鱼中卡巴氧代谢物喹恶啉-2-羧酸(QCA)和喹乙醇代谢物3-甲基-喹恶啉-2-羧酸(MQCA)的残留量。样品经过预处理,采用ZORBAX SB-C18色谱柱分离,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱;采用电喷雾-正离子多反应监测模式(MRM)检测,同位素内标法定量。结果表明,QCA和MQCA的质量浓度为2.0~100.0 ng/mL时,线性关系良好(R>0.999),回收率为91.4%~100.4%,精密度试验结果相对标准偏差(RSD)为6.3%~11.5%,定量限为0.2μg/kg,检出限为0.05μg/kg。该方法灵敏度及准确度良好,能满足6种常见鱼的组织中卡巴氧及喹乙醇代谢物残留分析的要求。

2019—2021年常熟市动物源性食品中喹恶啉类兽药残留监测分析

目的:了解常熟市市场上动物源性食品中喹乙醇、喹恶啉-2-羧酸、3-甲基-喹恶啉-2-羧酸残留情况。方法:2019—2021年,在常熟市各大超市、农贸市场采集各类动物源性食品,采用高效液相色谱-串联质谱法进行检测。结果:喹乙醇在猪肉、鱼肉、鸡肉、牛肉、猪肝和猪肾中均未检出;喹恶啉-2-羧酸在猪肉、鱼肉和牛肉中未检出,在鸡肉中的检出浓度为2.5μg·kg^(-1),检出率为3.3%,在猪肝中的检出浓度为4.8~21.3μg·kg^(-1),检出率为10%,在猪肾中的检出浓度为2.7~6.2μg·kg^(-1),检出率为6.7%;3-甲基-喹恶啉-2-羧酸在鱼肉和牛肉中未检出,在猪肉中的检出浓度为1.7~3.2μg·kg^(-1),检出率为4%,在鸡肉中检出浓度为1.1μg·kg^(-1),检出率为3.3%,在猪肝中的检出浓度为5.6~30.8μg·kg^(-1),检出率为16.7%,在猪肾中的检出浓度为2.9~10.7μg·kg^(-1),检出率为6.7%。结论:常熟市市场上销售的动物源性食品中喹恶啉-2-羧酸、3-甲基-喹恶啉-2-羧酸残留具有一定的风险,尤其是内脏中残留较为严重,需要监管部门加大监管力度,引导市民尽量少食内脏,保证食品安全,保障人民身体健康。

超高效液相-串联质谱法测定牛奶中乙酰甲喹及其代谢物

建立了采用PAX固相萃取小柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中乙酰甲喹及其代谢物残留的方法。样品经乙酸乙酯提取,分析了分别经PAX及PEP固相萃取柱净化、富集的结果;以乙腈/甲醇-0.1%甲酸水为流动相,经岛津Inertsil ODS-3柱色谱柱分离,采用多反应检测正离子模式进行定性及定量分析。该方法线性良好,2种组分相关系数r均大于0.999。喹噁啉-2-羧酸的方法检出限为0.10μg/kg,方法定量限为0.40μg/kg;在0.42,1.05,2.10μg/kg 3个加标水平下回收率分别为100%,66.2%,50.5%;乙酰甲喹的方法检出限为0.10μg/kg,方法定量限为0.30μg/kg;在0.33,0.83,1.65μg/kg 3个加标水平下回收率分别为117%,52.8%,52.4%,RSD在6.4%~8.9%之间,方法的准确性和重复性良好。