嗜乳脂蛋白基因外显子7多态性及其与奶牛产乳性状的相关性研究

采用PCR-RFLP对奶牛嗜乳脂蛋白基因的第7外显子进行了扩增,并用HaeⅢ进行酶切,产生了2个等位基因A(331+170 bp)和B(295+201 bp)。分析不同基因型对个体乳脂率、乳蛋白、乳糖、干物质和305 d产奶成年当量等生产性能的影响。结果表明:AA基因型和A等位基因的频率分布在所试的4个群体中都较高(>60%),AA基因型奶牛的乳脂率、乳蛋白含量显著高于BB基因型(P<0.05),同时乳固形物含量和乳糖的含量也高于BB基因型,但不存在显著性差异;另外,AA基因型奶牛的305 d产奶成年当量则显著低于BB基因型(P<0.05)。对305 d成年当量、乳脂率、乳蛋白质含量、乳干物质含量和乳糖含量A基因的加性效应分别为-345.34 kg/胎次、0.07%、0.09%、0.09%和0.07%,A等位基因的显性效应分别为187.72 kg/胎次、0.07%、0.08%、0.04%和0.04%。

贵州荷斯坦奶牛嗜乳脂蛋白基因多态性及与产奶性状的关联分析

为了解贵州荷斯坦奶牛嗜乳脂蛋白基因的多态性,采用PCR-RFLP法对100头贵州荷斯坦奶牛的嗜乳脂蛋白基因进行了等位基因多态性分析。在此基础上,利用实验奶牛的乳蛋白率、乳脂率及产奶量数据,应用统计学方法对贵州荷斯坦奶牛嗜乳脂蛋白基因多态性与产奶性状的关联进行了分析。结果显示,共获得A、B 2种等位基因,其中A基因频率为0.680 0、B基因频率为0.320 0。共发现3种等位基因型,其中AA基因型频率最高,为0.630 0;其次为BB基因型,频率为0.250 0;AB基因型频率最低,为0.120 0。群体多态信息含量为0.336 3,纯合度为0.572 1,杂合度为0.427 8。BB型个体的305 d产奶量极显著高于AB型和AA型(P<0.01)。结果提示,嗜乳脂蛋白基因的BB基因型可以作为选择高产奶牛的分子标记。

西农萨能羊BTN基因RNA干扰序列的筛选及重组腺病毒载体的构建与鉴定

【目的】构建西农萨能羊BTN基因RNA干扰的重组腺病毒载体,为研究BTN基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】设计并合成3对针对BTN不同位点的shRNA编码序列,克隆到pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体中,并与已构建好的表达BTN的pDsRed1-C1-BTN载体共转染HEK293细胞,筛选有效的干扰序列。通过与腺病毒骨架质粒重组,制备表达干扰BTN基因的shRNA的腺病毒,经PacⅠ线性化后,在HEK293细胞中包装并扩增病毒,用TCID50法进行病毒滴度测定,获得高滴度的病毒上清液。【结果】成功构建了西农萨能羊BTN基因的RNAi腺病毒表达载体,腺病毒经包装和扩增后,病毒滴度可达到5×109PFU/mL。【结论】获得了有功能的pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA病毒重组子。