嗜乳酸杆菌联合兰索拉唑阿莫西林克拉霉素治疗顽固性幽门螺杆菌感染的临床研究

目的探讨嗜乳酸杆菌制剂(乐托尔)联合兰索拉唑阿莫西林克拉霉素三联疗法对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)顽固性感染的治疗效果。方法将80例Hp顽固性感染患者分为两组,分别采用兰索拉唑三联疗法、乐托尔联合兰索拉唑三联疗法治疗10天。结果两组患者治疗10天后,兰索拉唑三联组和乐托尔联合兰索拉唑三联组Hp清除率分别为94.8%和97.56%,两组间无明显统计学差异;然而,兰索拉唑三联治疗组中,13例患者出现不同程度的不良反应,明显高于乐托尔联合兰索拉唑三联组(4例)(P<0.05)。结论乐托尔联合兰索拉唑三联治疗方案治疗不仅具有良好的Hp清除效果,而且不良反应少,因此,为顽固性Hp感染患者的治疗提供了新的思路。

嗜乳酸杆菌治疗轻微肝性脑病的临床疗效观察

目的探讨嗜乳酸杆菌治疗轻微肝性脑病(MHE)的临床疗效及安全性。方法选取我院就诊的MHE的肝硬化患者50例,随机分为观察组及对照组。观察组25例,给予口服嗜乳酸杆菌片(2片,2次/d)及乳果糖(30 m L,2次/d),对照组25例,给予口服乳果糖(30 m L,2次/d),治疗8周。比较两组患者治疗前后神经心理测试结果、血氨、肠道微生态菌群及脑代谢物情况。结果治疗后,观察组神经心理检测改善18例,对照组改善13例,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);两组ALT、AST比较差异无统计学意义(P>0.05),两组患者血氨均降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者有益菌均增加,致病菌均减少,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者Glx/Cr均降低,m I/Cr及Cho/C均升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论嗜乳酸杆菌有益于轻微肝性脑病的治疗,并且联合乳果糖在控制血氨、调整肠道菌群、改善脑代谢物的疗效优于单独使用乳果糖。

复方嗜乳酸杆菌片联合蒙脱石散治疗小儿腹泻临床治疗效果及安全性分析

与蒙脱石散单一用药相比,探究复方嗜乳酸杆菌片联合蒙脱石散治疗小儿腹泻的治疗效果。方法 选取我院2019年7月至2021年6月收治的92例小儿急性腹泻患者作为研究对象基于不同用药治疗,将患儿分为对照组和观察组各46例。其中对照组实施蒙脱石散用药治疗;观察组实施复方嗜乳酸杆菌片联合蒙脱石散用药治疗,比较分析两组疗效、主要相关症状消失时间及安全性。结果 在疗效方面,观察组有效治疗病例44例,实现有效治疗率95.65%;对照组有效治疗病例39例,实现有效治疗率84.78%(P<0.05)。从症状消失时间来看,观察组大便正常、脱水纠正、腹痛消失、体温正常等主要症状消失的消失时间均明显短于对照组(P<0.05)。在用药安全性方面,观察组出现便秘1例,不良发生率为2.17%;对照组出现便秘、肠道不适各1例,不良反应发生率为4.34%(P>0.05)。结论 在小儿腹泻治疗中,传统单一西药蒙脱石散的治疗效果良好,但“复方嗜乳酸杆菌片+蒙脱石散”的治疗效果更佳,可快速控制腹泻,改善患儿肠道功能,值得临床推广应用。

嗜酸乳酸杆菌ATCC4356菌株异源二聚体β-半乳糖苷酶的克隆表达

嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)的异源二聚体β-半乳糖苷酶属于糖苷水解酶2家族,由两个部分重叠、协同翻译的基因编码(lacL和lacM)。【目的】克隆表达该酶并测定其酶学特性。【方法】参照已全基因组测序的嗜酸乳酸杆菌NCFM菌株,以嗜酸乳酸杆菌ATCC4356菌株基因组为模板,将lacL的RBS到lacM的终止子之间的序列(2834bp)克隆到pQE31质粒上,并电转化JM109菌株。以下列步骤纯化表达产物:硫酸铵分级沉淀、阴离子交换、亲和层析和凝胶排阻层析。以凝胶排阻层析测定纯化酶的天然分子量,以邻硝基苯基半乳糖为底物测定其酶学特性。【结果】实现了该酶在JM109菌株中的可溶性表达。其氨基酸序列有一处不同于嗜酸乳酸杆菌NCFM菌株,即其大亚基(LacL)的第512位氨基酸不是组氨酸而是精氨酸。纯化酶比活力为226U/mg蛋白,天然分子量为96.3±4.6kDa,最适pH为7,最适温度为49℃,Km和Vmax值分别是:2.18±0.12mmol/L,273±5U/mg蛋白。

添加乳精和嗜酸性乳酸杆菌对鸡肠炎沙门氏菌感染的防治效果

单独使用乳糖以及联合使用乳糖和嗜酸性乳酸杆菌均能显著地减少雏鸡盲肠中的肠炎沙门氏菌数（P<0．05）。联合使用乳糖和乳酸杆菌的效果比单独使用乳糖的效果好（P<0.05）。单独使用嗜酸性乳酸杆菌并不能显著地减少盲肠中的沙门氏菌数。乳糖和乳酸杆菌单独或同时使用对雏鸡肝、脾中肠炎沙门氏菌的分离率无显著影响。

L-嗜热乳酸杆菌T-1的5L发酵罐的发酵条件研究

对L-嗜热乳酸杆菌T-1在5L发酵罐上进行了分批发酵和补料分批发酵的条件研究。实验结果表明:分批发酵最适条件为以Na2CO3作中和剂,温度50℃;pH6.0,溶氧范围为前0h￣20h通风1L/min,搅拌转速100r/min,20h后停止通风和搅拌,产乳酸95g/L,产酸速率1.32g/(L.h),转化率92.7%。补料分批发酵实验表明,2次补料乳酸产量明显高于1次补料,产酸117.5g/L,转化率90.4%。

添加嗜酸性乳酸杆菌对肉仔鸡免疫功能影响的研究

本文对肉鸡饲喂嗜酸乳酸杆菌时,鸡的体重及免疫器官及功能的影响进行了研究。结果表明:饲喂嗜酸乳酸杆菌可以提高鸡的体重,增加胸腺、法氏囊、脾脏的重量及淋巴细胞的 E-玫瑰花环率。

嗜酸乳酸杆菌对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响

目的:探讨嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus,LA)对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响。方法:以健康雌性BALB/c小鼠为受试动物,分为常规饲养组(NC组)、常规饲养条件灌胃LA组(NC+LA组)、应激组(S组)、应激条件灌胃LA组(S+LA组),小鼠的LA灌胃剂量为10~8CFU/d;应激组小鼠每天被限制自主活动3 h;15 d后取材,采用流式细胞术、酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbem assay,ELISA)等方法,对肠系膜淋巴结(mesenteric lvmph nodes,MLN)中CD4^+T细胞、CD8^+T细胞和CDllc^+树突细胞(CDllc^+dendritic cell,CDllc^+DC)比例,结肠组织白细胞介素-10(intefleukin-10,IL-10)和白细胞介素-17(intefleukin-17,IL-17)水平,以及小肠总分泌型免疫球蛋白A(secreted immunoglobulin A,sIgA)水平进行检测。结果:常规饲养条件下,LA能极显著提高小鼠MLN中CD4^+T细胞比例(P<0.01),显著提高MLN中CDllc^+DC比例、小肠总sIgA水平和结肠组织IL-10水平(P<0.05),显著降低结肠组织IL-17水平(P<0.05),而对MLN中CD8^+T细胞比例无显著影响(P>0.05);应激条件能极显著降低小鼠MLN中CD4^+T细胞比例和CDllc^+DC比例(P<0.01),显著降低CD8^+T细胞比例(P<0.05),极显著降低小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平(P<0.01),极显著提高结肠组织IL-17水平(P<0.01);应激条件下,LA能显著提高小鼠MLN中CD4^+T细胞比例和CDllc^+DC比例(P<0.05),显著提高小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIRA水平(p<0.05),并显著降低结肠组织IL-17水平(p<0.05),而对小鼠MLN中CD8^+T细胞比例无显著影响(P>0.05)。结论:给予自主活动受限型应激小鼠LA干预,可提高小鼠MLN中CD4^+T细胞和CDllc^+DC比例,上调结肠IL-10和小肠总sIgA分泌水平,下调结肠IL-17分泌水平,调节应激小鼠的肠道黏膜免疫状态。

一株仔猪源嗜酸乳酸杆菌生物学特性的研究

试验研究了一株仔猪源嗜酸乳酸杆菌的重要生物学特性。在体外研究了该乳酸杆菌的生长曲线、耐热存活率、耐酸存活率、贮藏存活率等,采用均匀设计法优化嗜酸乳酸杆菌的发酵培养基。结果表明,嗜酸乳酸杆菌的活菌浓度在开始时缓慢上升,经过3h之后从1 0 5个数量级迅速上升,到第1 8h超过1 0 1 1 个数量级,到第32h,细菌的数量级开始缓慢下降到1 0 1 1 数量级以下,嗜酸乳酸杆菌的耐热存活率为62 .5 %,耐贮藏存活率为59%,耐酸存活率为70 %。优化的发酵参数为:时间2 0h,葡萄糖1 1 0g/L ,蔗糖1 0g/L,胰蛋白胨5g/L,酵母浸粉30g/L,柠檬酸盐1 2g/L。研究结果证明,该嗜酸乳酸杆菌是一株抗逆性强的菌株,适合用于仔猪断奶过度日粮中。

表达EPEC紧密素蛋白重组嗜酸乳酸杆菌的免疫效果检测

【目的】制备抗肠致病性大肠杆菌(EPEC)的重组嗜酸乳酸杆菌,并初步探索其免疫效果。【方法】采用DNAStar软件选取EPEC E2348/69的eae全基因中抗原性较高的984bp片段(编码328个氨基酸残基,命名为eae Int328)为目标序列,以EPEC E2348/69基因组为模板,PCR扩增eae Int328基因,构建重组表达载体pSIP409-eae Int328,电转化法获得相应的重组嗜酸乳酸杆菌,采用SppIP诱导重组菌表达,并通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组蛋白。以BALB/c雌性小鼠为受试动物,灌胃重组嗜酸乳酸杆菌15d后,再灌胃EPEC,第21天,取结肠PP结和肠内容物,15和21d称体质量,同时设PBS(对照)、EPEC和pSIP409空载体转化嗜酸乳酸杆菌处理。采用流式细胞术检测结肠PP结中的CD11c+DC、CD4+T、CD19+B细胞比例,采用ELISA检测肠内容物中的特异性sIgA水平。【结果】克隆得到了984bp的eae Int328基因,构建了重组质粒pSIP409-eae Int328,制备了相应的重组嗜酸乳酸杆菌,用SppIP诱导表达后,重组嗜酸乳酸杆菌表达了分子质量约为36ku的重组蛋白,该重组蛋白与eae单克隆抗体可发生特异性结合。与EPEC和pSIP409空载体转化嗜酸乳酸杆菌组相比,21d时,pSIP409重组嗜酸乳酸杆菌组小鼠体质量显著增加,且与PBS组小鼠无显著差异。该重组嗜酸乳酸杆菌可显著提高BALB/c小鼠结肠PP结中的CD19+B细胞比例,极显著提高结肠PP结中的CD11c+DC和CD4+T细胞比例,使肠道黏膜产生针对EPEC的特异性sIgA。【结论】pSIP409-eae Int328重组嗜酸乳酸杆菌通过CD11c+DC的介导,促进CD4+T细胞数量增加,进而诱导B细胞活化产生针对EPEC的特异性sIgA,进而对小鼠EPEC的急性感染发挥作用。

嗜酸乳酸杆菌对念珠菌药敏性的影响

目的:评价嗜酸乳酸杆菌对抗念珠菌药敏性的影响。方法:采用NCCLS-M27-A方案检测1508株念珠菌单独及与嗜酸乳酸杆菌混合培养后对氟康唑、伊曲康唑的敏感性。结果:念珠菌单独培养以及与嗜酸乳酸杆菌混合培养后,氟康唑的MIC值分别为(7.76±8.16)μg/mL和(3.51±2.48)μg/mL,两组有显著差异(P<0.001);伊曲康唑的MIC值分别为(0.42±0.29)μg/mL、(0.212±0.126)μg/mL,两组亦有显著差异(P<0.001)。结论:嗜酸乳酸杆菌可显著提高念珠菌对氟康唑及伊曲康唑的敏感性。

嗜酸性乳酸杆菌抗肿瘤作用的实验研究

接种肉瘤180,艾氏腹水癌和路易氏肺癌的小鼠,喂饲嗜酸性乳酸杆菌(Shahani 株)发酵乳后,小鼠肉瘤180和艾氏腹水癌生长受抑制。与对照组比较.差异明显(P<0.05).但它对路易氏肺癌自发性肺转移无影响。此外,发现 C_(57)BL/6小鼠喂饲该细菌发酵乳后,脾细胞和胸腺细胞对 ConA 刺激的增殖反应,腹腔巨噬细胞 C_(3b)受体活性以及脾细胞和腹腔渗出细胞所介导的对 L_979纤维母细胞瘤细胞的毒性作用都比对照组明显增强。

嗜酸乳酸杆菌生物学特性研究及其发酵参数优化

采用均匀设计法优化嗜酸乳酸杆菌的发酵培养基, 研究一株可作为益生素使用的嗜酸乳酸杆菌CGMCC0842的生物学特性, 包括菌体生长曲线、耐热存活率、耐酸存活率、贮藏存活率等. 结果表明, 嗜酸乳酸杆菌的活菌浓度在开始时缓慢上升, 3h后从105 CFU/mL迅速上升, 第18h超过1011 CFU/mL, 到第32h, 细菌数量则缓慢下降, 菌体的适宜收获期宜在发酵后18~23h. 嗜酸乳酸杆菌的75℃处理15min耐热存活率为62.5%, 贮藏1个月的存活率为59 %, pH2.0处理6h的存活率69.5%. 优化的发酵参数为: 时间, 20h; 葡萄糖, 110g/L; 蔗糖, 10g/L; 胰蛋白胨, 5g/L; 酵母浸粉, 30g/L; 柠檬酸盐, 12g/L. 研究表明该乳酸杆菌CGMCC0842是一株优良的饲用益生素菌种.

一株猪源嗜酸乳酸杆菌生物学特性的研究

1材料与方法 1．1生长曲线 MRS肉汤培养基：蛋白胨10g,牛肉浸膏10g,酵母浸粉5g，磷酸氢二钾2g，枸椽酸二铵2g，葡萄糖20g，七水硫酸镁0．58g，四水硫酸锰0．25g，乙酸钠5g，蒸馏水1000mL，在500mL的锥形瓶里装300mL的MRS肉汤。在前24h每小时取样，之后于28、32、36、40、44和48h取样，取1mL培养液进行梯度稀释后．在合适的梯度取0．3mL稀释液注入装有MRS琼脂（pH6．5）的滚管中，

复方嗜乳酸杆菌片联合奥美拉唑肠溶片治疗急性胃肠炎疗效分析

急性胃肠炎是临床消化内科的常见病,是胃肠黏膜的急性炎症反应性疾病。急性胃肠炎的病因包括不良理化因素刺激、病原体感染等。临床上迅速明确病因、选择适当药物、施行有效治疗方法对于改善急性胃肠炎的预后具有重要意义。我院应用复方嗜乳酸杆菌片联合奥美拉唑肠溶片治疗急性胃肠炎取得满意效果,现报告如下。

嗜酸乳酸杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸工艺条件的研究

对嗜酸乳酸杆菌转化亚油酸为共轭亚油酸的工艺条件进行了优化,其优化的工艺条件为:亚油酸与发酵液的比例为0.1%(体积比)、反应温度36℃、培养时间36 h、pH值6.0,此时共轭亚油酸的产率达37.85%。同时对共轭亚油酸异构体的组成进行了气相色谱分析。

嗜热乳酸杆菌l-乳酸发酵条件的初步研究

对产L-乳酸的嗜热乳酸杆菌进行了发酵条件的初步研究:摇瓶发酵和静置发酵的对比实验以及培养基的优化实验。结果表明,摇瓶发酵优于静置发酵;麸皮和黄豆粉的最适添加量分别为2%和3%;木薯为最佳碳源;黄豆粉可代替部分酵母膏;木薯糖化液中加入适量黄豆粉和维生素B可代替酵母膏。

不同条件下嗜酸乳酸杆菌平板菌落计数结果影响的探讨

通过设置不同的培养条件和不同的分离方法寻找较适宜嗜酸乳酸杆菌生长条件与更便捷的分离方法的研究,发现嗜酸乳酸杆菌用混合平板法分离培养比平板涂布分离培养效果好,无氧条件下培养比有氧条件下培养效果好,37℃条件下培养与42℃条件下培养效果相差不多,同时发现嗜酸乳杆菌在改良MC培养基中不生长。

嗜酸乳酸杆菌对实验性溃疡性结肠炎治疗的最佳浓度探索及免疫学机制初探

目的:比较不同浓度嗜酸乳酸杆菌治疗实验性溃疡性结肠炎(ulerative colitis,UC)的疗效,分析其对结肠近、远端菌群的影响,寻找治疗UC适宜的嗜酸乳酸杆菌浓度,并探索其免疫学机制。方法:雌性Balb/c小鼠56只,随机分为7组(n=8),葡聚糖硫酸钠(DSS)造UC模型鼠,分别予以不同浓度嗜酸乳酸杆菌、激素、生理盐水干预UC模型鼠,观察小鼠一般情况,计算疾病活动指数(DAI)评分、组织损伤评分,留取小鼠肠道组织进行肠道固生菌群分析,并进行PCR及Western-Blotting检测UC相关的IL-23、IL-17、TNF-α。结果:106CFU/m L浓度级嗜酸乳酸杆菌干预组小鼠UC症状缓解最明显,且远端结肠益生菌(乳酸杆菌和双歧杆菌)数量最多,致病菌(金黄色葡萄球菌)最低;UC相关的IL-23、IL-17、TNF-α无论mRNA水平还是蛋白质水平,均为嗜酸乳酸杆菌干预组最低,尤其以106U/10 g嗜酸乳酸杆菌灌胃组最低。结论:嗜酸乳酸杆菌治疗UC与其在结肠远端有较高浓度乳酸杆菌有关,然而疗效并非与细菌浓度完全正相关,炎性因子IL-23、IL-17、TNF-α与UC疾病严重程度呈正相关,与嗜酸乳酸杆菌对UC的治疗作用相关。

复方嗜乳酸杆菌片联合标准三联疗法治疗消化性溃疡的疗效分析

目的：评价复方嗜乳酸杆菌片联合标准三联疗法治疗Hp阳性的消化性溃疡的疗效.方法：选择经胃镜检查、快速尿素酶试验证实为Hp阳性的消化性溃疡患者60例（胃溃疡24例,十二指肠球溃疡36例）,随机分为标准三联组和加用复方嗜乳酸杆菌片组（标准三联组采用兰索拉唑＋阿莫西林胶囊＋克拉霉素治疗）两组疗程7 天.结果：标准三联组与加用复方嗜乳酸杆菌片组溃疡愈合率分别86.7%和90%,两组间差异无统计学意义（p＞0.05）;幽门螺杆菌根除率分别为70%和90%,两组比较有显著性差异（p＜0.05）,不良反应发生率,标准三联组为26.7%;加用复方嗜乳酸杆菌片组为6.7%.两组比较有显著性差异（p＜0.05）.结论：复方嗜乳酸杆菌片能提高标准三联疗法Hp根除率,可作为Hp感染的消化性溃疡的首选疗法,并减少胃肠道不良反应.