2株分离的嗜人T细胞白血病病毒I型的PCR检测

[目的 ]用 PCR法检测嗜人 T细胞白血病病毒 I型 (HTL V- I)的分离情况。 [方法 ]采集 2例日本鹿儿岛县成人 T淋巴细胞白血病 (AL T)病人的肝素抗凝血 ,分离外周血单核细胞 (PBMCs) ,加入植物血凝素和白介素 - 2 ,与健康人 PBMCs共培养进行 HTL V- I的分离 ,然后抽提 DNA,用 HTL V- I的 gag1和 tax1两引物进行 PCR扩增 ,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳确定病原分离结果。 [结果 ]2株都扩增出了 HTL V- I前病毒 DNA的 gag1和 tax1片断 ,证明了嗜人 T细胞白血病病毒 I型的分离成功。 [结论 ]PCR法是快速、准确检测嗜人 T细胞白血病病毒感染的有效方法之一。

2016~2023年温州地区献血人群人类嗜T淋巴细胞病毒感染情况分析

人类嗜T淋巴细胞病毒(human T-lymphotropic virus,HTLV)是第一个被报道的具有高度侵袭性的逆转录RNA病毒,以HTLV-Ⅰ型和HTLV-Ⅱ型最为常见,主要经输血、静脉输注、性接触、母婴垂直等途径传播[1]。目前预防HTLV感染的最有效方式是阻断传播途径。

广东省湛江市人类嗜T淋巴细胞病毒感染情况分析

目的 了解人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)在湛江市献血人群中的感染情况。方法 采用酶联免疫双抗原夹心法(ELISA)检测取消互助献血前2016年3月—2018年2月献血人群的标本113304份和取消互助献血后2018年3—12月献血人群的标本36473份。ELISA阳性的标本送到广州市血液中心进行化学发光法检测和PCR确证试验,PCR确证阳性的视为HTLV感染。结果 113304份标本中酶免阳性77份,其中化学发光阳性17份,PCR确证阳性7份;36473份标本中酶免阳性16份,其中化学发光阳性3份,PCR确证阳性1份;感染率分别为0.062‰和0.027‰,总感染率为0.053‰。8位感染者均来自广东湛江市。结论 湛江市献血人群HTLV有低流行分布。

献血者人类嗜T淋巴细胞病毒的初筛检测结果研究

对我市无偿献血的人员血液中是否含有人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)的状况进行统计,通过其相对适合的初筛检测方式,为我市的血液安全的相关工作提供相对科学的数据支持。方法:采用万泰的双抗原夹心酶联免疫吸附试验对我市的23496名无偿血献人群的血清标本中的HTLV抗体进行检测,对其反应性的标本采用免疫印迹法进行二次检测确认。结果:单孔测试发现有反应的标本为25例,采用双孔复试的方法对其反应性的标本进行复验,发现了1例反应性,初筛反应性率为1/23496,采用免疫印迹法进行二次检测确认,最终确证为阴性。结论:我市的无偿献血人群中未发现HTLV阳性,因此,在我市开展大规模的HTLV筛查活动意义不大。

广州地区336731名无偿献血者抗人类嗜T淋巴细胞白血病病毒-Ⅰ/Ⅱ抗体调查

目的了解人类嗜T淋巴细胞白血病病毒(human T-cell leukemia virus,HTLV)在广州地区无偿献血人群中的流行状况,为制定血液安全筛查策略提供参考。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2016年6月1日至2017年5月31日广州血液中心及其3个分站(花都、增城和从化)共336 731份无偿献血标本进行抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查。结果 336 731份无偿献血标本中共筛查出60份抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体阳性标本,筛查阳性率为0.018%(60/336 731)。60份抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ阳性标本中S/CO值在1~2之间的占48.3%(29/60);S/CO值在2~4之间的占35.0%(21/60);S/CO值在4~6之间的占13.3%(8/60);S/CO值在8~12之间的占3.3%(2/60)。抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体阳性者中男性占62%(37/60),女性占38%(22/60),与抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ阴性献血者的性别构成比较差异无统计学意义。抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体阳性者年龄范围19~54岁,平均年龄(29.35±11.35)岁。广州、花都、增城和从化地区无偿献血者中抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体阳性率差异无统计学意义(P> 0.05)。结论广州地区献血人群中抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ阳性率为0.018%,广州、花都、增城和从化地区无偿献血者中抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ阳性率差异无统计学意义。

人T细胞白血病病毒1型/人嗜T细胞病毒1型(HTLV-1)及其与相关疾病关系的研究进展

人T细胞白血病病毒1型/人嗜T细胞病毒1型(HTLV-1),是一种和人类T淋巴细胞白血病及HTLV-1相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)等疾病密切相关的逆转录病毒。以往对于该病毒的认识仅仅局限于其导致这两种常见疾病,近来发现越来越多的自身免疫性疾病与该病毒的感染有着密切的联系。同时,该病毒通常经过漫长的潜伏期后发病,一旦发病治疗往往收效甚微,明确病毒如何侵入机体、其致病机制、如何和机体的免疫系统相互作用在细胞内长期潜伏,以便采取有效的早期干预措施将是后续研究的重点方向。我们总结了该病毒导致的相关免疫性疾病、该病毒和免疫系统相互作用的致病机制及治疗方式。

台州地区无偿献血者人类嗜T淋巴细胞白血病病毒感染情况调查

目的了解台州地区无偿献血者中人类嗜T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)感染情况。方法采用双抗原夹心酶联免疫法筛检,筛查阳性反应者双孔复检,仍阳性反应者用核酸试验(PCR)及免疫印迹法(WB)进行确证。结果台州本地户籍献血者6 576名发现抗-HTLV-I阳性2例,PCR及WB确证试验仍为阳性(阳性率0.03%),其为无症状定期献血者,均在本市有4次合格献血经历。2例HTLV-I阳性者均分布于台州东南沿海地区。非台州户籍献血者2193名,抗-HTLV结果均为阴性。台州地区无偿献血者抗-HTLV-I阳性率为0.023%。结论目前台州地区无偿献血者人群抗-HTLV感染率尚处于1个较低水平。

两种ELISA试剂检测献血者抗人类嗜T淋巴细胞白血病病毒-Ⅰ/Ⅱ抗体结果分析

目的分析两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测抗人类嗜T淋巴细胞白血病病毒(human T-cell leukemia virus,HTLV)-Ⅰ/Ⅱ抗体检测结果的差异,并分析产生差异的原因,为临床实验室试剂的选择提供依据。方法分别采用试剂A对35144份献血者标本和试剂B对69538份献血者标本进行抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体检测,对筛查出的反应性标本采用对应的试剂进行符合性的检测;采用蛋白印迹试验(WesternBlot)对ELISA初筛为反应性抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体血浆标本进行确证试验。结果试剂A检测抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体初筛反应性率1.707‰,确证阳性率28.33%,假阳性率为71.67%;试剂B检测抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体的初筛反应性率0.676‰,确证阳性率63.83%,假阳性率为26.17%;两种试剂阳性符合率为50.47%。两种ELISA试剂的初筛反应性率、确证阳性率有统计学差异(P<0.05)。两种ELISA试剂的敏感度均为100%,试剂A、试剂B的特异度为分别为99.88%、 99.98%,敏感度、特异度均无统计学差异(P>0.05)。结论试剂A和试剂B均存在不同程度的假阳性,试剂A的假阳性率高于试剂B。

人嗜T淋巴细胞白血病病毒I型(HTLV-Ⅰ)核心蛋白(p24)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ⅰ）核心蛋白（ｐ２４）基因的克隆及在大肠杆菌中的表达段震峰，滕志平，纪志武，陈国敏，张永利，曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ），聚合酶链反...

献血者人类嗜T淋巴细胞病毒电化学发光测定值与免疫印迹确证结果的相关性研究

目的研究电化学发光免疫测定技术在献血者人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)检测中的应用效果,评估发光检测COI值与免疫印迹确证结果的相关性,为血站选择最佳筛查策略并优化确证实验流程提供科学依据。方法将2016~2022年本省参加无偿献血且初筛不合格(HTLV酶免反应性)的1070份献血者血液标本纳入本次研究。所有标本分别使用电化学发光方法和蛋白质印迹方法(金标准)进行检测,对结果进行记录和分析并绘制受检者操作特征曲线(ROC)。利用ROC曲线寻找电化学发光免疫测定的最佳诊断临界值。结果1070份初筛不合格标本经电化学发光检测有285份阳性,阳性率26.64%(285/1070),经蛋白质印迹检测有70份阳性,确证阳性率6.54%(70/1070),该70份标本为发光和印迹双阳性。285份电化学发光阳性标本的平均COI值为81.92,中位数为4.98。按照印迹检测结果分为2组后,印迹阴性组中位数为2.76,印迹阳性组中位数为312.45(Z=-12.53,P<0.01)。根据ROC曲线,最佳诊断临界值为72.10(AUC=1,P<0.01),此时发光检测结果与印迹确证结果的符合率为99.35%。结论电化学发光免疫测定技术是一种灵敏度高、特异性强且适用于大规模检测的技术,合理设置诊断临界值后其检测结果与免疫印迹确证结果有很好的一致性,在献血者HTLV检测方面具有良好的应用前景。

人类嗜T淋巴细胞病毒抗体血清学筛查与确证试验的相关性分析

目的探讨广州献血人群抗-HTLV血清学筛查与免疫印迹确证试验结果的相关性,了解广州地区HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染情况。方法采用抗-HTLVⅠ/ⅡELISA试剂对2016年7月—2022年8月广州血液中心采集的无偿献血者进行筛查,395份ELISA反应性的献血者标本经免疫印迹法(WB)进行确证;使用ROC曲线分析抗-HTLVⅠ/ⅡELISA检测的S/CO值与WB确证试验结果的相关性,分析广州献血人群HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染情况。结果395份ELISA反应性的献血者标本经WB确证有25份为HTLV阳性,不确定16份;ROC曲线分析显示ELISA检测的S/CO值与WB确证试验结果具有相关性:Youden指数最大时的S/CO值3.789为最佳阈值,ELISA检测的S/CO值与预测WB确证结果阳性率有一定相关性(P<0.05),S/CO值越大,阳性预测值越高;广州地区HTLV总体感染率较低。结论广州地区献血人群HTLV流行率低;抗-HTLV-Ⅰ/ⅡELISA血清学筛查假阳性率较高,确证试验尤为重要。

Ⅱ型人类嗜T细胞白血病病毒的基因序列

继80年代初从成人T细胞白血病(ATL)患者中分离出Ⅰ型人类嗜T淋巴细胞白血病/淋巴瘤病毒(HTLV-Ⅰ)后不久,美国卡莱纳拉曼(Kalyanaraman)等于1982年又从毛细胞白血病患者(Mo)

宁波市人类嗜T淋巴细胞白血病病毒感染情况调查

[目的]了解人类嗜T淋巴细胞白血病病毒在宁波地区人群中的感染情况。[方法]采用酶联双抗原夹心法,检测2006年2月～2007年10月期间献血人群5556例、血液病患者329例血清HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体,并进行统计分析。[结果]5885例血标本中有8例显示阳性反应,经再次双孔复测,均为阴性。[结论]宁波地区尚无HTLV流行或低流行,可暂缓对献血员进行常规HTLV筛选。

福建沿海地区人T淋巴细胞白血病病毒1型膜基因的克隆和系统树分析

人T淋巴细胞白血病病毒 1型 (HTLV 1)是最早发现的一种RNA肿瘤病毒。利用HTLV 1基因组长末端重复区 (LTR)或膜基因 (env)序列进行系统树分析 ,可分为C、J、WA、CA和M 5个亚型。为了解我国HTLV 1流行区毒株的主要基因型别 ,从福建莆田地区克隆出 3株HTLV 1的env基因。其序列与已知各亚型代表株进行系统树分析 ,结果表明均为C亚型。首次证实了中国大陆HTLV 1C亚型的存在。该地区地处福建沿海 ,近几个世纪以来对海外人口迁徙频繁。这一地区HTLV 1C亚型的存在是否与目前全球性C亚型的分布有关 ,值得进一步研究。

重组人类T淋巴细胞白血病病毒抗原及双抗原夹心法ELISA抗体诊断试剂盒的研制

为研制灵敏、特异的抗人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)抗体诊断试剂,将一段HTLV Ⅰ和HTLV Ⅱenv区嵌合基因在大肠杆菌中表达,获得的重组抗原具有良好活性。将该抗原作为酶标记抗原建立双抗原夹心法ELISA(dsELISA),对31份HTLV Ⅰ型血清和19份HTLV Ⅱ型血清均能100%检出,而在5065份各种阴性血清中特异度为99 94%。用dsELISA试剂与进口间接法试剂(GeneLabs试剂)平行检测18份HTLV Ⅰ参比血清、17份HTLV Ⅱ参比血清和1024份献血员血清,结果dsELISA试剂正确率为100%,对HTLV Ⅰ型血清和HTLV Ⅱ型血清的反应性基本相同,平均s/co值显著高于GeneLabs试剂。而GeneLabs试剂对HTLV Ⅱ型血清的反应性显著弱于Ⅰ型,并有2份BBI参比血清中的Ⅱ型血清漏检。另外,GeneLabs试剂在献血员血清中出现9例假阳性,特异性显著低于dsELISA试剂。这些结果表明:所研制的dsELISA试剂可用于HTLV Ⅰ型和Ⅱ型血清的检测,其灵敏度和特异度均优于进口间接法诊断试剂。

皮肤T细胞淋巴瘤患者的人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ型感染

目的 研究皮肤T细胞淋巴瘤 (CTCL)患者中是否存在人类T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ型 (HTLV Ⅰ )的感染。方法 检测CTCL患者血清中的HTLV Ⅰ抗体以及患者外周血细胞和活检标本中的前病毒DNA。结果 PCR法检测CTCL患者外周血样 5 7例 ,其中HTLV Ⅰ前病毒DNA阳性患者 6例 ;ELISA法检测CTCL患者 5 4例 ,其中 1例为可疑阳性 ;Western印迹法检测CTCL患者 18例 ,其中HTLV Ⅰ抗体阳性者 4例 ,此 4例患者前病毒DNAPCR结果也为阳性。结论 皮肤T细胞淋巴瘤患者存在HTLV Ⅰ病毒感染 ,CTCL与HTLV Ⅰ有一定的关系。HTLV Ⅰ病毒感染可能是CTCL发病的诱因之一。

用聚合酶链反应检测T细胞白血病／淋巴瘤中HTLV－I前病毒DNA

用聚合酶链反应检测Ｔ细胞白血病／淋巴瘤中ＨＴＬＶ－Ｉ前病毒ＤＮＡ陈国敏，何士勤，王柠，张永利，曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）关键词聚合酶链反应（ＰＣＲ），人Ｔ淋巴细胞病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ），前病毒，基因整合目前，国内对人Ｔ淋...

人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒TAX蛋白对NF-κB转录因子的作用

人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒(HTLV-I)是成人T细胞白血病(ATL)的致病因子,其编码的TAX蛋白的反式激活在白血病形成中有重要作用。NF-κB是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。正常情况下,NF-κB因子与抑制性蛋白IKB结合,形成复合物存在于胞质中。TAX蛋白可与IKB激酶γ(IKKγ)直接结合,而后启动TAX对IKKα和IKKβ的结合,并使之发生磷酸化。后者使IKB蛋白降解,NF-κB获得释放,从胞质中转位到校内,与相应靶基因上的NF-κB位点结合而被活化,产生一系列生物性反应和效合作用。NF-κB因子具有拮抗细胞凋亡的作用,但其机制还有待深入研究。

儿童急性白血病T淋巴细胞嗜银蛋白与亚群的变化和分析

目的通过对急性白血病(AL)患儿T淋巴细胞(T细胞)表示rDNA和rRNA活性的嗜银蛋白的测定,了解患儿T细胞的功能状态,并分析其与T细胞亚群之间的关系。方法应用图象分析法测定31例初发未化疗AL患儿及30例正常儿童(对照组)外周血T细胞核仁组成区嗜银蛋白(银染区)/细胞核面积(I.S%),用流式细胞仪测定T细胞亚群。结果31例AL患儿I.S%值(5.78%±2.66%)较对照组(7.51%±1.06%)下降(P<0.01)。T细胞亚群测定中,CD4+(27.50%±12.56%)较正常值(35%±2.55%)下降(P<0.05);CD8+(26.11%±12.35%)与正常值(25%±2.04%)比较差异无显著性(P>0.05);CD4+/CD8+(1.149±0.51)较正常值(2±0.26)下降(P<0.001)。结论在初发未化疗的AL患儿中,T细胞嗜银蛋白含量下降,代表患儿T细胞免疫功能的CD4+和CD4+/CD8+值降低,显示患儿T细胞活性的改变与T细胞亚群的变化相符,患儿存在T细胞免疫功能降低。