胸腺肽降低环磷酰胺诱导的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的初步研究

目的 探讨胸腺肽对遗传损伤的作用。方法 以每天 2 5 0mg kg(高剂量组 )、12 5mg kg(低剂量组 )的胸腺肽连续 10d小鼠腹腔注射给药 ,实验另设以生理盐水 10ml kg代替胸腺肽的阴性对照组 ;于第 9、10两天以 40mg kg剂量腹腔注射染色体断裂剂环磷酰胺 ,环磷酰胺末次注射后 6h处死小鼠 ,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。结果 胸腺肽能显著降低环磷酰胺诱导的微核率 ,与阴性对照组相比P均小于 0 0 1,高低两个胸腺肽剂量组及阴性对照组的微核率分别为 (12 5 0± 3 88)‰、(14 75± 3 42 )‰ ,(2 2 5 8± 4 98)‰。结论 胸腺肽具有拮抗或修复环磷酰胺诱导的遗传损伤作用。

臭氧对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率影响的研究

为了研究臭氧对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率(PCEs-MN)的影响,试验采用臭氧发生器产生臭氧,每天分别处理30 min、60 min、120 min,分别在处理后30天和60天处死10只小鼠,检测PCEs-MN。结果表明:处理30天和60天,不同臭氧处理组小鼠PCEs-MN与对照组相比差异不显著(P>0.05),提示臭氧对小鼠体细胞没有致突变性。

铬对鲤嗜多染红细胞微核的诱变效应

在实验室条件下以不同浓度Cr6+( 0 1 2 2、 0 670、 1 2 1 9、 3 65 7、 1 0 971和32 91 3mg/L)水体染毒鲤鱼种 40d ,微核试验结果表明 :处理组铬浓度的提高 ,其嗜多染红细胞微核率相应提高。鲤暴露于Cr6 +3 66～ 32 91mg/L时 ,铬处理鱼微核细胞率较对照组鱼有明显差异。鱼肌肉、鳃、肝和肾组织内的Cr6+残留量同其微核率呈正相关关系。

辐射诱导细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因表达变化的实验研究

采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺和脾脏基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础。研究中选用细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因Cdkn1a、Ccnd1、Ccnb1、Gadd45a、Atm和Fdxr,以Gapdh为参考基因,观察0.5、1、2、4、6 Gy X射线全身照射后4和24小时上述基因在胸腺和脾脏的相对表达量的变化。同时计数骨髓细胞涂片嗜多染红细胞(PCE)的微核率进行对比。结果显示,上述6种基因对电离辐射全身作用都出现变化,但以Cdkn1a、Ccnd1和Ccnb1三者对全身照射的剂量效应关系较为明显,其中Cdkn1a和Ccnd1基因的表达随辐射剂量增加而升高,Ccnb1基因的表达随辐射剂量增加而下降。剂量效应曲线可拟合为线性-平方方程,其相关系数r为0.851～0.998,p<0.05～0.01。但与嗜多染红细胞微核率进行对比,Ccnd1和Ccnb1的表达只有部分结果与之具有显著的相关关系。Cdkn1a的表达量则不仅随辐射剂量增加而升高,而且与嗜多染红细胞微核率的剂量-效应曲线明显相关,在两器官和两时间点其相关系数为0.950～0.975,p<0.01。另一方面Cd-kn1a表达量变化的幅度较大,照射后4小时和24小时胸腺的最高表达量分别为11.2和11.3倍,脾脏的最高表达量分别为20.6和9.3倍。鉴于实时定量PCR技术适用于快速、高通量检测,通过进一步在人体观察验证,Cdkn1a基因表达变化有可能成为研制新的辐射生物剂量计的候选者。

^(60)Co诱发孕鼠骨髓及胎鼠肝血微核和姐妹染色单体交换的影响

本实验对怀孕13d小鼠（约相当于人胚8周）经1．0Gy^60Co射线照射后孕鼠骨髓及胎鼠肝血的嗜多染红细胞微核率（PCEMN）、姐妹染色单体交换（SCE）的变化进行研究，发现经^60Co射线照射后的实验组PCEMN、SCE均明显增高，表明^60Coγ射线是一种很强的诱变剂。

蜱的致病机理研究

以豚鼠和兔子为供血动物，探讨了实验室条件下拉合尔钝缘蜱和小亚璃眼蜱人工繁衍的技术，观察了它们的生活史、生理、生态特点。实验表明：在２６℃、ＲＨ６０％条件下，以豚鼠为供血动物时，拉合尔钝缘蜱自幼蜱吸血至第Ⅲ期若蜱饱血离体共需２４～４２天，平均３３天，每只雌蜱平均产卵３２０个左右，卵期２８～４０天。在２０℃、ＲＨ８０％条件下，以兔为供血动物时，小亚璃喂蜱饥饿成虫平均８天饱血离体，１８天开始产卵，从卵内孵出幼虫需６５天，幼虫和若虫叮咬吸血至离体需２０天，平均３５天蜕变为饥饿成虫，以豚鼠为供血动物时，该幼虫１５天饱血离体，１０天蜕变为饱血若虫，而饥饿成虫饱血远较在兔体缓慢，叮咬吸血１０天未见到饱血成蜱。其次，对１个和２个拉合尔钝缘蜱饥饿成虫叮咬ＫＭ小鼠后，于饱血后第４天，７天。１４天进行免疫、遗传毒理、病理形态学检查的结果表明：①该蜱叮咬可导致小鼠Ｔ淋巴细胞ＡＮＡＥ阳性率、骨髓和脾脏淋巴细胞转化率降好、降低程度与叮咬蜱的数量有关，说明该蜱叮咬可导致小鼠免疫功能高度抑制，这有利于蜱的寄生和蜱媒疾病的扩散，②该蜱的叮咬可导致小鼠染色体畸变细胞率、微该细胞率（ＭＮＦＣＥ）增高，染色体畸变类型有ｃｔｇ、ｃｔｂ、ｄｅｌ、ｐｖ?

昆明山海棠胶囊遗传毒性及生殖毒性的研究

目的 探讨昆明山海棠胶囊的遗传毒性及生殖系统毒性。方法 根据《中药新药研究指南》,进行该制剂的特殊毒理实验研究。结果 昆明山海棠胶囊无移码突变和碱基置换效应;剂量低于2 5 0g·kg-1时,小鼠骨髓细胞姊妹染色单体交换频率(SCE)正常,高于此剂量,则可增加SCE频率,且使嗜多染红细胞微核率增加,并呈剂量依赖性;显性致死试验阳性;雌鼠均不能受孕;精子畸形率显著增高,随剂量增加而精子畸形率增高;对孕鼠重量、活胎重量及平均胎仔数等各项指标均无影响。结论 昆明山海棠胶囊具有低、中度的遗传毒性和一般生殖毒性,而无胚胎毒性。

补肾安胎方对^(60)Co诱发孕鼠骨髓及胎鼠肝血微核抗诱变防畸作用的研究

本实验对怀孕13d小鼠（约相当于人胚8周）经1.0Gy60Coγ射线照射后孕鼠骨髓及胎鼠肝血的嗜多染红细胞微核率（PCEMN）作了探讨,发现经60Coγ射线照射后的实验组的PCEMN明显增高,表明60Coγ射线是一种很强的诱变剂,并对中药补肾安胎方作了研究,发现补肾安胎方可以防畸。

β-胡萝卜素和VitC抗环磷酰胺诱变效应

本文研究β-胡萝卜素和VitC对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响,观察到预先摄入足量β-胡萝卜素和/或Vit C15d能减低环磷酰胺诱发的嗜多染红细胞微核率;环磷酰胺腹腔注射后摄入足量β-胡萝卜素能促进嗜多染红细胞做核率的恢复,但Vit C对嗜多染红细胞微核率的恢复元帮助。本实验中未见β-胡萝卜素与Vit C有协同作用。

没食子酸对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用

目的探讨没食子酸(gallic acid, GA)对小鼠骨髓细胞的辐射防护作用。方法将健康雄性ICR小鼠随机分为生理盐水对照组、GA对照组、4个X线照射组和4个GA保护组,每组10只。X线照射组和生理盐水对照组给予0.01 mL/g生理盐水灌胃,GA对照组和GA保护组给予200 mg/kg的GA(20 mg/mL)灌胃14 d,第15 d给予4个X线照射组和4个GA保护组小鼠全身一次性X线照射,吸收剂量分别为1.0、2.0、3.0和4.0 Gy,生理盐水对照组和GA对照组不给予照射。照射后检测全血过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和骨髓嗜多染红细胞微核(micronucleus frequency of polychromatic erythrocyte, MN-PCE)率,并用流式细胞仪检测骨髓细胞周期、早期凋亡率和晚期凋亡率。结果 1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠血清中CAT活性分别为2.13、1.74、1.49和1.15 U/mL,与相应X线照射组比较均明显增加(P<0.01);SOD活性分别为184.69、156.92、139.17和107.15 U/mL,与相应X线照射组比较均明显增加(P<0.01);MDA含量分别为3.92、4.20、6.32和9.31 nmol/mL,与相应X线照射组比较均明显降低(P<0.05,P<0.01);1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠骨髓MN-PCE率分别为4.35‰、8.00‰、12.90‰和3.80‰,与相应X线照射组比较均明显降低(P<0.01);1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠骨髓细胞G;/G;期细胞所占比例分别为81.00%、86.28%、92.04%和93.15%,与相应X线照射组比较均明显减少(P<0.01);G;/M期细胞所占比例分别为4.51%、3.05%、2.35%和1.81%,与相应X线照射组比较均明显增加(P<0.05,P<0.01);S期细胞所占比例分别为15.32%、11.36%、5.96%和4.92%,与相应X线照射组比较均明显增加(P<0.01)。1.0、2.0、3.0和4.0 Gy GA保护组小鼠骨髓细胞早期凋亡率分别为3.32%、8.96%、12.11%和2.26%,与相应X线照射组比较均明显减少(P<0.01);骨髓细胞晚期凋亡率分别为7.21%、11.73%、17.11%和19.36%,与相应X线照射组比较均明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论 GA能减轻辐射损伤小鼠骨髓细胞的氧化损伤、DNA损伤及骨髓细胞周期阻滞,抑制骨髓细胞的凋亡,对小鼠骨髓细胞具有辐射防护作用。