lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响

目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。

柯萨奇病毒B组3型上海分离株的基因特征分析

为探讨上海市不同来源的柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3)菌株的循环动态变化及基因特征,本研究对分离自上海市环境污水、健康儿童和急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中的CVB3菌株进行VP1区基因序列测定,并对照全球CVB3代表株进行序列相似性分析和系统发生学分析。结果显示,1989-2021年上海市不同来源的CVB3分离株共有120株,属于D、E基因亚型。上海CVB3分离株的核苷酸和氨基酸相似性差异较大,分别为78.7%~100%和93.3%~100.0%。2016年首次从上海环境污水中分离到E基因亚型CVB3,2021年再次分离到该基因亚型。2021年上海环境污水中的E基因亚型CVB3分离株与2020年的广东手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)病例CVB3分离株VP1区的核苷酸相似性较高,但上海暂未有该基因亚型感染病例报道。因此,仍须长期对环境污水和不同肠道病毒感染病例进行监测,以提高肠道病毒监测的敏感性,为肠道病毒相关疾病的诊疗提供数据支撑。

Reg Ⅲγ修饰HuMSCs对柯萨奇B3病毒诱导的心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响

目的:观察胰岛再生源蛋白Ⅲγ(RegⅢγ)修饰人脐带间充质干细胞(HuMSCs)对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的小鼠心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响。方法:从新鲜脐带组织中提取HuMSCs,倒置显微镜观察形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达;采用含过表达RegⅢγ的慢病毒感染HuMSCs,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测RegⅢγ mRNA表达水平。将40只小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组,每组10只。模型组、HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组采用腹腔注射CVB3建立心肌炎模型,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组再分别尾静脉注射HuMSCs、RegⅢγ-HuMSCs。14 d后,采用高分辨率小动物超声成像系统记录小鼠心脏超声指标;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10和IL-23含量;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理损伤情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌组织细胞凋亡水平,免疫组织化学染色测定心肌组织T淋巴细胞表面抗原(CD4、CD8)和巨噬细胞特异性抗体(CD68)的表达。结果:分离的细胞呈典型纺锤形,细胞表面抗原CD44、CD73、CD90呈高表达,CD34、CD45、人类白细胞抗原-DR蛋白(HLA-DR)呈低表达,说明成功分离到HuMSCs。经过慢病毒感染的HuMSCs有明显绿色荧光蛋白表达,RegⅢγ mRNA表达水平高于未感染的细胞(P<0.05),说明成功得到RegⅢγ修饰的HuMSCs。与对照组比较,模型组小鼠射血分数(EF)、缩短分数(FS)降低,左室舒张末期容积(LVEDV)和左室收缩末期容积(LVESV)升高,血清IL-2、IL-6和IL-23含量增加,IL-4和IL-10含量减少,心肌组织内炎性细胞浸润明显,TUNEL阳性率增加,CD4、CD8及CD68蛋白表达均呈强阳性(P<0.05);与模型组比较,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组小鼠EF和FS升高,LVEDV和LVESV降低,血清IL-2、IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加,心肌组织炎性细胞浸润减少,TUNEL阳性率减少,CD4、CD8及CD68蛋白表达均下降(P<0.05);相较于HuMSCs组,RegⅢγ-HuMSCs组小鼠EF和FS升高,LVEDV和LVESV降低,血清IL-2、IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加,心肌组织未见明显炎性细胞浸润,TUNEL阳性率减少,CD4、CD8及CD68蛋白表达下降(P<0.05)。结论:RegⅢγ修饰的HuMSCs可减轻CVB3诱导的小鼠心肌炎心肌损伤与炎性细胞浸润,改善心脏功能。

柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化

目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞,实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量;Western blot法检测NLRP3蛋白的变化,免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后,NLRP3和IL-1β表达明显升高;下调NLRP3后,IL-1β分泌明显减少;NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染,组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化,增加炎症因子IL-1β表达和释放。

大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B_3作用

目的 研究大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B3 (CoxsackievirusgroupBtype3, CVB3 )作用。方法 观察大蒜多糖A,B,C的细胞毒性、对CVB3 直接灭活作用、抗CVB3 吸附作用及对CVB3 生物合成抑制作用。结果 大蒜多糖A,B,C对Hep 2细胞的半数中毒浓度(TC50 )分别为 1000, 800, 4000μg/mL;均无直接灭活CVB3 及抗CVB3 吸附作用;除A外,B和C均可剂量依赖性抑制CVB3 生物合成.。结论 大蒜多糖B和C在体外通过抑制CVB3 生物合成而发挥抗CVB3 的作用。

槐果碱体外抗柯萨奇病毒B3m的作用

目的 以HeLa细胞为模型，观察从苦参中提取的槐果碱在体外抗柯萨奇病毒B3m（CVB3m）的作用。方法 ①用微量细胞培养法观察槐果碱对HeLa细胞的毒性。②用细胞病变效应（CPE）抑制法观察槐果碱体外抗CVB3m作用。③用MTT法和结晶紫染色法观察槐果碱对CVB3m感染的HeLa细胞的保护作用：在96孔板上种植HeLa细胞并予CVB3m吸附1h，加入不同浓度的槐果碱，并设立病毒、细胞、槐果碱对照，培养15h后以MTT法和结晶紫染色法测定比较各组细胞能量代谢率和细胞存活数。结果 ①槐果碱稀释到〈391μg／mL，对HeLa细胞无毒性；≥783μg／mL引起HeLa细胞CPE。②槐果碱6．25～50μs／mL有直接抗病毒作用，减轻CPE；〉100μg／mL反而会加重、加快CPE。③槐果碱1．56～25μg／mL对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用，用MTT法和结晶紫染色法测得细胞能量合成代谢、细胞存活数较病毒对照组增加（P〈0．05）；槐果碱在50、100μg／mL时反而加重病毒对细胞的抑制，使细胞存活数、细胞代谢率较病毒对照组下降（P〈0．05）。结论 一定浓度的槐果碱在体外有抗CVB3m作用，对感染CVB3m的HeLa细胞有保护作用。

小柴胡汤及其分解剂对柯萨奇B_3m病毒感染乳鼠心肌保护及细胞免疫调节作用的研究

目的 :观察小柴胡汤及其分解剂Ⅰ号和分解剂Ⅱ号对心肌细胞的保护和对机体的免疫调节作用。方法 :以柯萨奇病毒B3亲心肌株 (CVB3m)腹腔注射诱导Balb/c乳鼠心肌炎模型 ,分别予以小柴胡汤、分解剂Ⅰ号及分解剂Ⅱ号 ,经灌胃后 ,于不同时间进行各组的NK细胞活性、T细胞亚群及心肌病理组织学检查。结果 :(1)小柴胡汤和分解剂Ⅱ号在病毒性心肌炎急性期均能明显提高NK细胞活性 ,有调节T细胞亚群功能 ,与病毒对照组比较有显著性差异 (P <0 0 5)。而分解剂Ⅰ号此作用不明显。 (2 ) 3种治疗药物对心肌免疫损伤均有明显保护作用 ,小柴胡汤作用明显优于分解Ⅰ号和分解剂Ⅱ号 (P <0 0 5)。而分解剂Ⅰ号和分解剂Ⅱ号比较未见显著性差异 (P >0 0 5)。结论 :小柴胡汤和分解剂Ⅱ号对病毒性心肌炎NK细胞活性和T细胞亚群具有双向调节作用 ,3种治疗药物对心肌的免疫损伤均有明显保护作用。

紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B_3病毒活性

采用离子交换凝胶QSepharoseFastFlow,以NaCl梯度洗脱,将紫球藻胞外多糖 (ESPS)分离成3个组分ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6,分别占粗多糖总量的44.2%(以质量 计,下同),20.3%和16.4%.ESPS0中未测出蛋白,ESPS1.0和ESPS1.6的蛋白含量分别为 7.8%和7.6%;ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6的硫酸基含量分别为16.3%,11.6%和8.3%.利 用体外模型测试了3个组分的抗CVB3病毒的活性.发现ESPS0,ESPS1.0和ESPS1.6抑制 CVB3病毒的半数抑制质量浓度分别为2.03,0.51和0.53mg/L,治疗指数IT值分别为 61.6,245.1和235.8;在相同条件下,阳性对照药物病毒唑的半数抑制质量浓度和IT值 分别为31.25mg/L和16.0.结果表明,3种组分抗CVB3活性均高于病毒唑.

儿童急性暂时性髋关节滑膜炎与柯萨奇B组3型病毒感染的相关性研究

目的 :探讨儿童急性暂时性髋关节炎与柯萨奇B组 3型病毒的相关性。方法 :采用ELISA法检测 10 0例急性暂时性髋关节滑膜炎患儿血清及髋关节液中柯萨奇B组病毒 (CoXB)、腺病毒 (AdV )、巨细胞病毒 (CMV)、呼吸道合胞病毒 (RSV)抗体 ,其中 79例作病毒血清免疫学检测 ,2 1例作髋关节病毒学检测 ,怀疑柯萨奇病毒感染者 ,随机抽样 9例作髋关节液中的病毒分离。结果 :急性暂时性髋关节滑膜炎患儿 79例血清免疫学检测查出Coxb lgM阳性 11例 ,AdV lgM阳性 14例 ,CMV lgM阳性 8例 ,RSV lgM阳性 8例 ,3 8例阴性。 2 1例髋关节液中查出CoXB阳性 7例 ,AdV阳性 5例 ,CMV阳性 2例 ,7例阴性。同时在血液和髋关节液中查出CoXB阳性 1例 ,AdV阳性 2例。随机抽样 9例作病毒分离培养 ,1例分离出柯萨奇病毒 ,采用中和试验证实为柯萨奇B组 3型病毒 ,并经电子显微镜检查确认。结论 :柯萨奇B组 3型病毒具有感染儿童导致急性暂时性髋关节滑膜炎的可能性。

空心莲子草微乳体外抗柯萨奇病毒B3的实验研究

目的:观察空心莲子草微乳在体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用,为将纳米技术应用于该药的研发提供理论依据。方法:提取空心莲子草抗病毒活性成分并制备成微乳制剂,以高效液相法测定微乳中空心莲子草浓度,测定微乳的粒径及其分布,考察微乳的稳定性,通过细胞实验评价药物的抗病毒作用。结果:微乳的平均粒径为32 nm,具有很好的稳定性,有明显抑制CVB3的作用,治疗指数27.31。结论:空心莲子草微乳有显著的抗CVB3的作用,微乳化的空心莲子草安全性比未经微乳化的高。

黄芩茎叶提取物与生脉饮抗柯萨奇病毒B3的体外研究

目的:探讨黄芩茎叶提取物及生脉饮体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用。方法:应用细胞感染模型按照药物对Hela细胞及CVB3不同作用方式设直接抗病毒作用组、增强细胞抗病毒作用组、对感染细胞保护作用组及正交设计组。采用光镜观察并结合MTT测定的方法进行综合判断。结果:与病毒对照组比较黄芩茎叶提取物、生脉饮对细胞病变有抑制作用(P<0.05)。结论:黄芩茎叶提取物、生脉饮均有直接抗病毒作用以及对未感染或已感染Hela细胞的保护作用。生脉饮与黄芩茎叶提取物之间有交互作用。

柯萨奇B3病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达

本文通过融合柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３））ＶＰ１基因与人凝血酌基因，仗ＣＶＢ３的ＶＰ１在大肠杆菌中得到稳定的表达。经蛋白扫描仪等测定，表达的融合蛋白占菌体可溶性蛋白的１１％左右。表达的ＶＰ１产物勺抗ＣＶＢ３ＶＰ１单克隆抗体和小鼠抗ＣＶＢ３血清产生较强的免疫反应，与天然的ＣＶＢ３蛋白抗原性相同。应用无关单抗和载体质粒对照均呈现阴性反应。应用表达的ＶＰ１作为抗原，我们对临床部分急性病毒性心肌炎患者血清进行了特异性ＩｇＭ免疫印迹法检测，其结果与组织培养的ＣＶＢ３制备的蛋白抗原对患者血清的特异性ＩｇＭ反应基本一致。采用基因上程方法制备ＣＶＢ３抗原产最高，易纯化，免疫原性没有改变。故可以试用表达的ＶＰ１抗原代替目的有实验室感染危险的病毒培养及抗原制备方法，快速、特异地诊断ＣＶＢ３感染。

栀子等中药抑制柯萨奇B3病毒的体外实验研究

目的探讨栀子、黄连、黄芩、大青叶及复方制剂在体外抗柯萨奇B3病毒(CVB3)的作用。方法用细胞培养技术比较栀子、黄连、黄芩、大青叶及复方制剂等药物对CVB3引起的细胞病变的抑制作用。结果黄芩抗病毒作用最强,治疗指数(TI)为35.09;黄连抑制病毒增殖的作用最强,TI为83;栀子抑制病毒吸附和增殖作用最强,TI为238.09。结论栀子、黄连、黄芩、大青叶及复方制剂等药物对CVB3增殖的不同环节均有抑制作用。

低硒与柯萨奇病毒B_(3/0)毒性突变

目的 : 体外观察低硒培养柯萨奇病毒非致病株 B3 / 0 ( CVB3 / 0 )的毒性突变。方法 : 筛选低硒胎牛血清 ,制备低硒细胞培养基 ,利用 CVB3 致病株和非致病株感染人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)后结局不同 ,先于体外连续传代观察的毒性突变情况 ,然后于敏感动物体内鉴定突变株的致病性。结果 : CVB3 / 0 在低硒细胞培养液中培养的脐静脉内皮细胞 2 0次传代后 ,可出现细胞病变效应 ,该突变株接种 Balb/C小鼠后可使其心肌组织出现损伤。结论 : CVB3 / 0 非致病株不仅在低硒小鼠内可突变为致病株 ,在体外相对低硒 + H2 O2 培养基中培养的人脐静脉内皮细胞中也可发生。

鸡血藤提取物抗柯萨奇B3病毒活性组分研究

目的研究鸡血藤提取物不同组分的抗柯萨奇B3病毒活性和性质。方法通过不同溶剂提取鸡血藤活性成分,细胞病变效应法和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定不同提取组分的体外抗柯萨奇B3病毒活性。结果通过初步分离纯化得到有效成分具有抗柯萨奇B3病毒活性。用MTT法研究了鸡血藤水提物和有效成分的细胞毒性和抗柯萨奇B3病毒活性,CC50分别为725.88,179.17μg/ml,IC50分别为87.17,9.14μg/ml,TI分别为8.32,19.60。阳性对照为利巴韦林(Ribavirin)的CC50为4 900μg/ml,IC50为156.2μg/ml,其TI为31.4。结论鸡血藤有效成分在体外能明显抑制柯萨奇B3病毒的致细胞病变作用。

雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达的调控作用

目的:研究雷帕霉素对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的心肌细胞哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)表达的调控,探讨mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)的作用。方法:CVB3感染原代培养的SD大鼠心肌细胞建立病毒性心肌炎的细胞模型。根据细胞毒力实验筛选10 nmol/L的雷帕霉素干预CVB3感染的心肌细胞,采用RT-PCR和Western免疫印迹方法检测mTOR和eIF-4E mRNA表达及蛋白质水平。结果:CVB3诱导心肌细胞变性,雷帕霉素可减轻其变性;CVB3使大鼠心肌细胞的mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达上调,与对照组比较,有统计学差异(P<0.05),雷帕霉素可使CVB3感染的心肌细胞mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达明显下调,与CVB3组比较,有统计学差异(P<0.05)。结论:雷帕霉素能明显抑制CVB3感染的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达,提示mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎中可能起重要作用。

柯萨奇病毒B3的VP1 DNA疫苗与蛋白或重组腺病毒疫苗不同组合免疫方式的免疫效果观察

目的观察柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)衣壳蛋白VP1DNA疫苗初免后VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强的prime-boost策略的免疫效果。方法用CVB3VP1的真核表达质粒pcDNA3/VP1初次免疫小鼠后,分别用VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强免疫2次。检测免疫小鼠血清特异性IgG抗体、中和抗体滴度以及脾脏细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocytes,CTLs)杀伤活性;致死量CVB3攻击后,检测小鼠血中病毒滴度并观察动物的存活情况。结果 pcDNA3/VP1+VP1蛋白组小鼠血清IgG抗体、中和抗体滴度以及动物生存率明显高于pcDNA3/VP1+rAd/VP1组和pcDNA3/VP1质粒组(P<0.05);pcDNA3/VP1+rAd/VP1组和pcDNA3/VP1+VP1蛋白组小鼠脾脏CTLs杀伤活性明显高于pcDNA3/VP1质粒组(P<0.05)。结论质粒pcDNA3/VP1初次免疫后,VP1蛋白或重组腺病毒rAd/VP1加强的prime-boost策略有较好的免疫效果,两者比较pcDNA3/VP1+VP1蛋白prime-boost免疫策略的效果更为明显。

黄芪对柯萨奇B_3病毒核糖核酸作用的研究及其机理探讨

以体外转录合成、同位素３５Ｓ标记的肠道病毒特异负股ＲＮＡ为探针，对急性柯萨奇Ｂ３病毒（ＣＶＢ３）心肌炎小鼠心肌中的ＣＶＢ３－ＲＮＡ进行ＲＮＡ－ＲＮＡ原位杂交检测，利用图像分析仪对阳性杂交信号进行图像处理与定量分析；观察黄芪对ＣＶＢ３－ＲＮＡ含量的影响；同时对黄芪的抗病毒机理及其与β－干扰素的关系进行了初步探讨。结果发现在病毒感染的心肌组织中，黄芪组心肌坏死面积明显小于生理盐水对照组。黄芪对ＣＶＢ３－ＲＮＡ的复制有良好的抑制作用，其机制与β－干扰素（β－ＩＦＮ）无关。

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染乳鼠心肌细胞内质网应激及Calumenin蛋白和缝隙连接蛋白CX43的作用

目的:研究黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞内质网应激、网腔钙结合蛋白(calumenin)及缝隙连接蛋白43(CX43)作用。方法:原代培养的乳鼠心肌细胞分3组:对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞)、黄芪总黄酮组(正常细胞+黄芪总黄酮)。柯萨奇病毒感染组感染,黄芪总黄酮组感染同时给予黄芪总黄酮20 mg/L。采用免疫组化方法检测培养乳鼠心肌细胞α-SMA蛋白,Western blot技术检测各组心肌细胞Calumenin蛋白及内质网应激伴侣蛋白GRP78,CX43表达。结果:1与对照组相比,柯萨奇病毒感染组心肌细胞GRP78表达增多(P<0.01),calumenin蛋白及CX43表达减少(P<0.01);与柯萨奇病毒感染组比较,黄芪总黄酮组心肌细胞GRP78表达减少(P<0.01),Calumenin蛋白及CX43表达增多(P<0.01)。结论:CVB3可引发心肌细胞内质网伴侣蛋白GRP78表达增加进而发生内质网应激,并使Calumenin蛋白及CX43表达减少;黄芪总黄酮抑制CVB3感染心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78表达从而减轻内质网应激,同时使Calumenin蛋白及CX43表达增多,该实验结果可能与其抗病毒性心肌炎并发心律失常作用密切相关。

27种南药有效部位体外抗柯萨奇病毒B3活性测定

目的:探讨27种南药有效部位体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用。方法:采用观察细胞病变效应法(CPE法)检测10种南药(岗梅根、溪黄草、南板蓝根、叶下珠、叶下珠(广西)、两面针、广藿香、土牛膝、沙姜和青天葵)的27个有效部位在HeLa细胞中的抗CVB3活性,从中筛选出有抗CVB3活性的有效部位。结果:从27种有效部位中筛选出土牛膝的醋酸乙酯提取物和青天葵的甲醇提取物2种有抗CVB3活性的有效部位,其半数抑制浓度(IC50)分别为12.06 mg/L和77.67 mg/L。结论:27种南药有效部位中有2种具有抗CVB3活性。