鸡传染性支气管炎病毒组织和细胞嗜性分子机制研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起鸡的传染性支气管炎(IB)可导致鸡呼吸系统、泌尿系统、生殖系统、消化系统的组织病变,不同IBV毒株的组织嗜性及相应细胞嗜性存在差异。病毒基因组上关键基因或位点通过影响病毒复制周期完整性决定组织嗜性或宿主嗜性,位于IBV S1和S2亚基上的单个或多个位点均能决定其组织嗜性和细胞嗜性,但需要进一步探究这些关键位点改变病毒与宿主互作过程的机制;其他基因对IBV组织和细胞嗜性的影响亟待研究。论文就近年来影响IBV组织和细胞嗜性差异的相关分子机制研究进展进行综述,旨在为IBV致病机制、重组疫苗、抗病毒药物等的进一步研究提供参考。

IRES核心区12-bp非连续插入突变对猪塞内卡病毒复制和细胞嗜性的影响

【背景】塞内卡病毒(senecavirus A,SVA)是新近暴发的一种引起猪特发性水疱病及仔猪死亡的小核糖核酸病毒。该病毒基因组5′非编码区(untranslated region,UTR)中的内部核糖体进入位点(IRES)元件在病毒复制过程中发挥重要作用。2017年我国出现IRES核心区Domain II 12个碱基非连续插入的自然突变SVA毒株,在病毒复制和致病性方面存在明显改变。【目的】探讨IRES Domain II区域发生的突变对SVA的复制及细胞嗜性的影响,为进一步了解SVA致病机制奠定基础。【方法】以实验室前期构建的含HeN-1/2018株全基因组感染性克隆pHeN-1/2018为基础,通过定点突变的方式,逐步将其IRES Domain II核心区域308—317 nt的9个碱基(ACTCAAGCG)替换为GD04/2017株基因组308—328 nt的21个碱基(CACGCCTGCCGATAGACGATT),构建重组载体pHeN-1/2018-i12并进行了病毒拯救。随后,利用病毒基因组克隆测序、间接免疫荧光试验和Western blot试验对所拯救病毒进行鉴定,同时验证了IRES核心区12个碱基插入突变对SVA病毒体外复制能力和细胞嗜性的影响。【结果】将构建完成的重组载体pHeN-1/2018-i12转染细胞,盲传至P2代,获得致使感染细胞病变明显、病变时间稳定的IRES突变病毒rHeN-1/2018-i12。病毒连续传代后测序结果表明rHeN-1/2018-i12遗传稳定,P5代病毒基因组序列未发生碱基突变,P10代病毒IRES区域没有出现突变现象。用低代次的突变病毒rHeN-1/2018-i12体外感染本体动物猪源细胞系PK-15和IBRS-2,及仓鼠源细胞系BHK-21,进行细胞感染试验,结果表明rHeN-1/2018-i12与亲本毒株rHeN-1/2018在PK-15、IBRS-2和BHK-21中均能导致明显的细胞病变,表现出相似的生长曲线趋势,表明IRES核心区Domain II 12个碱基突变不能够改变对上述细胞的嗜性;但SVA突变病毒和亲本株在不同细胞中的病变时间及病毒滴度上存在较大的差异,rHeN-1/2018-i12株在细胞中生长能力较其亲本株rHeN-1/2018差,诱使细胞病变的时间较晚,在感染24 hpi,两者病毒滴度相差可达10倍。【结论】本研究基于SVA反向遗传操作系统构建并拯救SVA IRES突变毒株,确定了IRES突变对SVA生物学特性的影响,有助于我们更好地了解SVA致病机制,拓宽我们对病毒IV型IRES功能的认识。

异嗜性抗体对甲状腺功能指标检测的干扰作用

目的分析异嗜性抗体(HAb)对甲状腺功能指标检测的干扰作用。方法选择2020年7月—2022年7月济南市中西医结合医院收治的280例血浆促甲状腺激素(TSH)水平不当递增的患者作为研究对象,其中20例为疑似HAb增多症。采用放射免疫性鉴定法(RIA)和放射免疫分析模式(IRMA)检测TSH,排除血清类风湿因子等干扰后,检测血清标本的HAb水平;采用固相放免分析检测两组的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)。结果采用RIA和IRMA方法检测疑似HAb增多症患者的TSH水平均明显低于其他TSH不适当递增患者[m U/L:RIA法5.52±0.65比16.08±3.10;IRMA法4.02±0.42比16.03±2.96;均P<0.05]。疑似HAb增多症患者的FT3、FT4水平与其他TSH不当递增患者比较差异均无统计学意义[FT3(ng/L):3.25±0.85比3.21±0.66;FT4(ng/L):1.38±0.22比1.14±0.10;均P>0.05]。结论HAb可能影响甲状腺功能指标检测结果,需根据实际情况进行分析,尽量减少或排除该影响。

异嗜性抗体对孕妇血清甲状腺功能免疫测定值干扰的分析及处理

探讨异嗜性抗体对孕妇血清甲状腺功能免疫测定结果的干扰及处理方法。方法 选择2018年1月至2023年1月间甲状腺功能异常的25例孕妇作为病例组,并以同期25例健康孕妇为对照组。在分析过程中,排除RF、免疫球蛋白等大分子的潜在干扰,同时也考虑了遗传因素、PEG沉淀以及倍比稀释等因素。结果 两组患者血清RF、血清免疫球蛋白等生物大分子值在正常参考值,说明大分子化合物不会影响甲状腺功能的测定。用PEG法测定各组大鼠血清中甲状腺激素含量,并进行PEG沉淀回收率的测定。TSHR、TGAB和TPO的回收率小于40%,说明有其它大分子的干扰。而TT3、TT4等则无显著降低,其回收率均大于60%,说明未受大分子影响。PEG稀释及倍比稀释对FT3和FT4的测定均有不同程度的影响。结论 进行孕妇血清甲状腺功能免疫测定时,需充分注意异嗜性抗体等干扰因素对检测结果的影响,并应采取适当的处理措施以提升检测的准确性。

生物素、异嗜性抗体、甲状腺激素自身抗体干扰甲状腺功能检测1例报道

血清促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)和甲状腺激素是临床评价甲状腺功能的重要指标。当甲状腺功能检测结果与临床症状不符或TSH、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)的变化不符合规律时,除甲状腺激素抵抗(resistance to thyroid hormone,RTH)综合征[1]等罕见疾病外,还要排除检测干扰物。目前,干扰甲状腺功能检测的干扰物主要有以下4种:生物素、异嗜性抗体、甲状腺激素自身抗体(thyroid hormone autoantibody,THAb)和巨TSH[2]。本文报道1例由于生物素、异嗜性抗体、THAb干扰导致FT4、TSH同时升高的病例。

羊边界病致病机制及宿主嗜性变化的研究进展

羊边界病病毒(border disease virus,BDV)属于黄病毒科瘟病毒属,经常在牛、羊等反刍动物群体间广泛流行传播,能以多种动物为宿主且对健康动物具有一定危害。BDV感染反刍动物可引起持续性感染和免疫抑制,给畜牧业造成严重危害,且在多个国家和地区呈现出一定的流行性趋势。目前尚无公认的有效疫苗来预防BDV,所以如何科学饲养以及做好安全防控就成了重中之重。本文对BDV在牛群、羊群内的传播进行研究分析,有助于人们对BDV可能造成的风险进行预估并进行防控。因此,从BDV的分子生物学、流行现状、流行病学、临床症状以及与牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的混合感染来进行研究分析,有助于人们深入了解BDV致病及传播扩散的生物学机制,为该病的诊断、防治和疫苗研发提供新思路和策略。

含有鸡体偏嗜性密码子的H5亚型禽流感病毒HA基因的优化构建及其DNA疫苗体外瞬时表达研究

不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒的密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR及限制酶切法构建了密码子优化的表达A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]HA蛋白的基因optiHA5,并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA5,将含有GD/1/96(H5N1)野生型HA基因的质粒pCIHA5和pCIoptiHA5分别转染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24～48h293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白;Westemblot证实上述2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,结果表明密码子优化的基因optiHA5体外瞬时表达水平显著高于野生型HA基因.这一结果为进一步开展SPF鸡免疫保护效果的比较研究奠定了基础.

假眼小绿叶蝉对不同颜色偏嗜性的研究

作者进行了茶树害虫假眼小绿叶蝉对不同颜色偏嗜性的室内和田间试验。结果表明 :假眼小绿叶蝉最偏嗜黄色。室内试验中 ,琥珀黄诱集的虫数最多 ,且与湖水蓝和宝石绿间的虫数差异不显著 ,与翠绿、雪白和橘橙间的虫数差异显著 (p <0 0 5 )。琥珀黄、油菜花黄和麦杆黄三种不同黄色间诱集的虫数无差异 ,它们与翠绿、靛青和海青间的虫数达差异显著性水平 (p <0 0 5 )。茶园试验中 ,琥珀黄诱集的虫数最多 ,与宝石绿间的虫数差异不显著 ,而与湖水蓝间虫数差异达显著水平 (p <0 0 5 )。室内外试验的结果基本一致 ,即假眼小绿叶蝉偏嗜黄绿色。

北京市及周边省份家禽鹦鹉热嗜性衣原体流行状况的调查

对北京市周边6省份怀疑感染鹦鹉热嗜性衣原体的鸡鸭血清样品374份、病料81份,分别使用IHA诊断试剂盒、ELISA试剂盒以及抗酸染色试剂和荧光抗体诊断试剂进行了检查,以评价北京市及其周边地区家禽鹦鹉热嗜性衣原体的流行性。结果,上述4种试剂检测出的阳性率依次为24.9%、77.9%、18.5%和38.2%;北京市10份SPF鸡血清的抗体全部为阳性;患病肉鸡、肉鸭气囊样品,蛋鸡输卵管样品的检出率较高。表明,北京市及其周边地区家禽已经感染了鹦鹉热嗜性衣原体,酶联免疫吸附法和荧光抗体染色法能分别提高抗体和抗原的检出率。

猪口蹄疫病毒对三种动物细胞嗜性的研究

将猪FMDV毒株(O/GD/MSH/86)分别适应牛肾细胞(Bovinekidney,MD-BK)、幼仓鼠肾细胞(Babyhamsterkidney,BHK-21)和猪肾细胞(Porcinekidney,PK-15),研究了FMDV在宿主细胞上的嗜性。结果发现,该毒株在MD-BK细胞上不产生细胞病变(CPE),从细胞液中也未检测到病毒,而在BHK-21和PK-15细胞上能够稳定产生CPE。可见,猪FMDVO/GD/MSH/86毒株不能在MD-BK细胞上增殖,而在BHK-21和PK-15细胞上则增殖较好。

鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2基因突变对细胞嗜性改变的研究

为研究鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)细胞嗜性改变的分子基础,本研究通过定点突变、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术,以vvIBDV HLJ-0504株为骨架构建了两组感染性克隆,并借助已建立的反向遗传操作技术进行病毒拯救。IFA检测、电镜观察及RT-PCR鉴定均显示:Q253H/A284T双点突变的pCAGGHLJ0504A889/980HRT和pCAGGHLJ0504BHRT共转染DF1细胞成功拯救出重组病毒(rHLJ0504HT),而未进行双点突变的pCAGGHLJ0504AHRT和pCAGGHLJ0504BHRT共转染组未获得重组病毒。上述结果表明,双点突变Q253H/A284T能使vvIBDV HLJ-0504适应非允许细胞CEF,但未进行Q253H/A284T双点突变的vvIBDV HLJ-0504不能感染非允许细胞CEF,因此,该研究表明VP2的Q253H/A284T两个氨基酸突变是vvIBDV细胞嗜性改变的分子基础。

猪流产嗜性衣原体omp-1基因噬菌体疫苗免疫效果评价

本试验对猪流产嗜性衣原体omp-1基因噬菌体DNA疫苗进行了免疫效果评价。将猪流产嗜性衣原体omp-1基因插入λNM1149噬菌体载体构建成DNA疫苗,筛选获得阳性噬斑;使用重组的噬菌体疫苗按250 ng/只分别在第2、16和30天三次免疫Balb/c小鼠,以1B弱毒活疫苗(10μg/只)、噬菌体空载体(250 ng/只)为对照组。免疫后分别以ELISA法测定小鼠抗体以及MTT法检测淋巴细胞刺激指数。结果表明重组λ-MOMP噬菌体疫苗虽然未能在短期内(免疫第29天)激发高水平的抗体(1B组免疫第29天抗体D450=0.347,重组噬菌体组免疫第29天抗体D450=0.19;1B组免疫第43天抗体D450=1.12,重组噬菌体组免疫第43天抗体D450=0.38),但能诱导抗体水平逐渐升高(重组噬菌体组免疫前D450=0.086,免疫第29天抗体D450=0.19,免疫第43天抗体D450=0.38),而且显著性诱导T淋巴细胞的增殖(1B组免疫第29天SI=11.67,重组噬菌体组免疫第29天SI=15.8)。相反弱毒疫苗1B株能激发高水平的抗体,但细胞增殖指数显著低于噬菌体疫苗(1B组免疫第29天细胞增殖指数SI=11.67,重组噬菌体组免疫第29天细胞增殖指数SI=15.8)。试验显示λNM1149噬菌体载体具有潜在增强猪流产嗜性衣原体omp-1基因的免疫效果。

大肠杆菌改变果蝇产卵偏嗜性

【目的】用大肠杆菌Escherichia coli和黑腹果蝇Drosophila melanogaster分别作为微生物和宿主模型,研究微生物对宿主产卵行为的影响,并探讨大肠杆菌对果蝇存活率的影响。【方法】本研究首先利用野生型果蝇在双选择食物装置分别检测果蝇对大肠杆菌发酵食物的产卵偏嗜性和位置效应;利用大肠杆菌细胞和上清液解析诱导这种行为的原因;利用视觉、味觉和嗅觉突变体果蝇检测作用的感觉系统;通过蛹和成虫存活率检验果蝇对大肠杆菌发酵食物的产卵选择后果。【结果】黑腹果蝇产卵对大肠杆菌发酵的食物具有极显著趋避行为,产卵指数为-0.89。黑腹果蝇产卵对大肠杆菌代谢产物的产卵指数为-0.52,对大肠杆菌菌体的产卵指数为0.02。Orco2突变体果蝇产卵对大肠杆菌发酵的食物趋避行为严重受损,对应的产卵指数为-0.25。大肠杆菌在食物上生长,黑腹果蝇后代的存活率不足5%,而划破食物表面可以显著地降低大肠杆菌引起的黑腹果蝇死亡,将其存活率恢复到正常水平。【结论】大肠杆菌会改变黑腹果蝇产卵行为,使黑腹果蝇避开在其发酵食物上产卵;大肠杆菌代谢产物引起黑腹果蝇产卵的趋避性,果蝇主要通过嗅觉并联合其他感觉系统感知大肠杆菌代谢产物;黑腹果蝇对大肠杆菌产卵趋避行为可提高后代存活率,因为大肠杆菌形成一层菌膜,会引起果蝇缺氧死亡。

鹦鹉热嗜性衣原体特异性TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用

目的建立一种特异、灵敏、重复性好的鹦鹉热嗜性衣原体的TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法。方法利用鹦鹉热嗜性衣原体MOMP基因的特异保守序列设计引物和MGB探针,通过优化,获得最佳反应体系与反应条件,同时进行特异性、重复性、灵敏性评价与Spike-test实验进行临床应用性评价,利用该检测方法对禽鸟类粪便样品进行检测,并与常规PCR检测方法进行比较。结果该方法在0.01pg^100pg范围内线性相关系数为0.999,扩增效率为97.7%;对鹦鹉热嗜性衣原体菌株检测结果均呈现阳性,而非鹦鹉热嗜性衣原体菌株及其它衣原体菌株为阴性;重复性试验中,变异系数为0.317%~0.563%;检测灵敏性为0.01pg;Spike-test试验中最低检出量为25个EB;该方法对禽鸟类粪便样品的检出率为14.3%(40/282),高于常规PCR检测法的7.4%(21/282)。结论本文所建立的Taqman-MGB荧光定量PCR检测法是一种灵敏、高效、稳定,可在嗜性衣原体属中准确检测鹦鹉热嗜性衣原体的方法,该方法的建立更有意于今后对禽鸟类实施鹦鹉热的临床诊断与分子流行病学研究。

不同参数对美洲斑潜蝇寄主选择偏嗜性分析的影响

使用单位面积累积虫道数、单位叶片累积虫道数和为害率三种参数比较分析了美洲斑潜蝇LiriomyzasativaeBlanchard对菜豆、豆角、番茄、茄子、南瓜、白菜以及8个不同品种(系)菜豆的选择差异性。以单位面积累积虫道数为参数,选择性顺序高低依次为菜豆、豆角、番茄、茄子、南瓜、白菜;以单位叶片累积虫道数为参数,选择差异性高低顺序依次为菜豆、番茄、豆角、白菜、茄子、南瓜;以为害率为参数,选择性高低顺序依次为豆角、菜豆、番茄、茄子、白菜、南瓜。前两个参数的分析结果都表明菜豆是最嗜寄主,但根据为害率的分析却表明豆角受害最重,菜豆次之。利用不同选择性参数对8个不同菜豆品种的嗜好性分析中,前两个参数的分析结果相似,但为害率的分析结果与前两个的差异较大。因此,不同参数对分析美洲斑潜蝇的寄主选择偏嗜性有一定的影响。作者认为单位面积累积虫道数比其它两个为好。

猪流产嗜性衣原体omp-1基因的重组质粒与重组蛋白免疫组合效果

为增强猪流产嗜性衣原体omp-1基因的免疫措施进而筛选出高效新型分子疫苗,本实验将猪流产嗜性衣原体omp-1基因克隆入pcDNA3.1(+)载体构建DNA疫苗,初次和二次免疫分别以核酸/重组蛋白(DNA/r-MOMP)、重组蛋白/核酸(r-MOMP/DNA)、重组蛋白+核酸/重组蛋白+核酸(r-MOMP+DNA/r-MOMP+DNA)、核酸+核酸(DNA/DNA)和重组蛋白+重组蛋白(r-MOMP/r-MOMP)5种组合接种BALB/c小鼠,同时以载体和弱毒为对照。二次免疫后14 d以ELISA和T淋巴细胞增殖实验检测特异性体液免疫和细胞免疫应答水平。结果显示核酸与重组蛋白同时免疫可以诱导产生较高的体液免疫和细胞免疫水平,而DNA/r-MOMP组合的细胞免疫和体液免疫水平高于r-MOMP/DNA组合,单独免疫DNA组或r-MOMP都不能获得好的细胞和体液免疫。

基于重组外膜蛋白的猪流产嗜性衣原体病抗体ELISA检测方法的建立

为建立检测流产嗜性衣原体(C.abortus)抗体的快速检测方法,本研究以纯化的重组表达C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)为包被抗原,采用方阵法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,对反应条件进行优化,建立了C.abortus抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒阳性血清均无交叉反应;该方法检测稀释800倍的C.abortus阳性血清仍呈阳性;批内和批间变异系数均小于10%。采用所建立的ELISA方法与间接血凝(IHA)方法分别对62份临床血清样品进行检测,阳性率分别为83.87%(52/62)和70.97%(44/62),符合率为87.09%(54/62)。由此表明,本实验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,适于C.abortus流行病学调查。

IBV广西分离株GX-YL5在鸡体内动态分布和排毒规律及组织嗜性研究

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西分离株GX-YL5通过滴鼻点眼人工感染14日龄健康非免疫雏鸡,对接毒后1、3、5、7、10、14、21、28、35和42 d试验鸡的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏等组织及泄殖腔棉拭子进行IBV的反转录巢式PCR检测,同时对接毒后不同时间的气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、法氏囊、脾脏和肝脏进行组织病理学观察。结果表明接毒后的3～21 d,气管、肺脏、肾脏、胸腺、腺胃、盲肠扁桃体和肝脏的病毒检测均为阳性,接毒后42 d肾脏和气管检测结果仍为阳性;接毒后3～42 d泄殖腔棉拭子检测结果为阳性。组织病理学观察见到气管黏液,气管和细支气管纤毛脱落,炎症细胞浸润,肺充血,淋巴细胞浸润,肾脏间质性肾炎以及法氏囊水肿。研究结果表明,GX-YL5株对雏鸡具有广泛的组织嗜性,主要脏器带毒时间21 d或更长,泄殖腔排毒持续至少39 d。

异嗜性抗体干扰甲状腺激素检测结果的临床病例分析

目的分析和处理异嗜性抗体(HA)干扰甲状腺激素检测结果。方法选取体检健康者血清标本作为对照标本,与病例血清标本同做免疫球蛋白G(IgG)亚型、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、C-反应蛋白、类风湿因子、抗链球菌溶血素0、转铁蛋白、总蛋白、清蛋白、球蛋白、白球比的测定;采用聚乙二醇(PEG)沉降法对二者标本处理后,再次测定二者的甲状腺激素水平,并计算回收率。结果排除IgG、链霉亲和素、类风湿因子、血清蛋白质等因素对甲状腺激素检测造成的影响;对照标本三碘甲状原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲状原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH),PEG沉降回收率均>60%,说明没有大分子蛋白的干扰;病例标本T3、T4、FT3、FT4的PEG沉降回收率均<40%,说明存在大分子蛋白的干扰,TSH的PEG沉降回收率为58.7%,可能存在蛋白的干扰。结论该患者甲状腺激素各指标检测受到HA的干扰,当发现患者临床表现和实验室数据不一致时,在排除其他干扰因素的情况下,可采用PEG沉降法以有效解决此类干扰作用。

医院内宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体的分离筛选

目的从未经处理的医院下水道污水中分离筛选宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体,检测其对临床常规检出的铜绿假单胞菌的嗜性覆盖范围,探究其潜在的临床治疗价值。方法用双层琼脂噬菌斑形成法对铜绿假单胞菌噬菌体进行分离鉴定和感染谱的筛选,并用重复片段PCR基因指纹方法 (repetitive element PCR genomic fingerprinting,Rep-PCR)进行感染谱内宿主菌同源性分析,确认噬菌体的感染谱;用双层琼脂噬菌斑形成法检测筛出的宽嗜性铜绿假单胞菌噬菌体对临床常规检出的铜绿假单胞菌的嗜性覆盖范围。结果从16家医院未经处理的下水道污水中分离到14株铜绿假单胞菌噬菌体,确定其中4株感染谱较广,4株宽嗜性噬菌体的交叉组合对临床日常分离30株铜绿假单胞菌吞噬覆盖率为96.7%(29/30);30株铜绿假单胞菌中对亚胺培南耐药菌株12株,对药敏实验全部药物敏感菌株5株,其他耐药菌株13株,4株宽嗜性噬菌体交叉组合对耐亚胺培南菌株吞噬覆盖率为91.7%(11/12),对药敏实验敏感菌株的吞噬覆盖率为100%(5/5),对其他耐药菌株交叉吞噬覆盖率为100%(13/13)。结论从分离鉴定的14株铜绿假单胞菌噬菌体中筛选出4株宽嗜性噬菌体,其交叉组合能够吞噬型解临床日常筛出30株铜绿假单胞菌中的29株,对耐亚胺培南和其他临床常规药物的耐药菌株的交叉吞噬覆盖率在90%以上,交叉组合吞噬覆盖率高,为其进一步在临床抗菌治疗方面的应用提供基础和依据。