嗜热脂肪芽胞杆菌压力蒸气灭菌生物指示剂研制

试验了嗜热脂肪芽胞菌（Bacillus stearochemophilus ,tuj tq BS)芽胞甘油悬液在不同温度，压力下的杀灭情况，确定BS为一种可信赖的压力蒸汽灭菌生物指示剂，芽胞甘油悬液制品适合日常使用。

嗜热脂肪芽胞杆菌生产1,6-二磷酸果糖的研究

研究了嗜热脂肪芽胞杆菌发酵生产 1,6 -二磷酸果糖 (FDP)的工艺条件和工艺特点。采用活化培养工艺 ,改变菌体细胞透性和生理状态 ,获得高产率的 FDP发酵液 (产量为 6 0 m g/ ml)。本法生产 FDP具有副产物少 ,转化率高 。

去除嗜热脂肪杆菌芽胞悬液中繁殖体方法的研究

研究表明，用溶菌酶处理法去除嗜热脂肪杆菌芽胞悬液中繁殖体，可使芽胞悬液于４℃或室温下保存１３个月不出现繁殖体，保存６个月芽胞的热抗力无明显下降。用１００℃杀灭者的水悬液或甲醇悬液，于４℃保存１月后均有繁殖体出现，至３个月繁殖体所占比例多达５０％。

嗜热脂肪杆菌芽胞恢复培养基的研究

以新设计的恢复培养基、普通营养琼脂培养基及Ｆｅｅｈｅｒｒｙ报告的培养基对热损伤嗜热脂肪杆菌芽胞复苏作用进行了比较。结果，新设计的恢复培养基上的菌落明显多于另两种培养基。所试５６℃与６０℃两个培养温度，对嗜热脂肪杆菌芽胞的复苏无明显影响。

嗜热脂肪杆菌芽胞培养中各影响因素的观察

以嗜热脂肪杆菌肉汤接种于试验中的１号培养基，培养７２小时芽胞形成率可达８５％．以其制成的菌片分别贮存于４℃与室温１个月，菌数下降率分别为２５．０％与８４．６％．

用嗜热脂肪杆菌芽胞检测灭菌柜的灭菌质量

嗜热脂肪肝萌芽胞是国际通用的供热力灭菌试验的代表菌株,属需氧性原核的低等原生物,1938首次被发现。1985美国药典明确规定。(12±0.5)℃灭菌的生物指示剂必须使用嗜热脂肪杆菌。在此温度下,生物指示剂中的芽胞D值(减少90％所需的时间)应为1.3～1.9min,死亡时间(即全部芽胞死亡所需时间)小于或等于19min、存活时间(即无死亡时间)大于或等于3.9min。

嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69耐热金属蛋白酶基因表达产物的纯化及性质研究

利用ＣＭ纤维素离子交换层析法，从宿主细胞枯草芽孢杆菌ＭＩ１１３中纯化了嗜热脂肪芽孢杆菌ＨＹ６９的耐热金属蛋白酶基因的表达产物，达电泳纯。该酶的最适反应温度为７０℃，有着较好的热稳定性和极高的盐酸胍抗性。７０℃的半寿期为４５ｍｉｎ。在３ｍｏｌ／Ｌ的盐酸胍中变性２０ｍｉｎ，仍残余近４０％的酶活。利用凝胶过滤和ＳＤＳＰＡＧＥ，测定其分子量均为２７０００±１０００。通过ＣＤ光谱得知，该酶含有６６％的α螺旋，２８％的β转角，６％的无规则卷曲，无β折叠。利用ＣＤ光谱和荧光光谱研究了该酶在盐酸胍变性过程中的构象变化，推测其主要是通过增加包装效率，减少无规则卷曲来提高酶的稳定性。

嗜热芽胞杆菌在高温大曲发酵中的作用

嗜热芽胞杆菌是高温大曲培养过程中的常见菌种。本文采用纯菌种和混合菌种制曲，测定了麸曲营养物质含量，对麸曲发生的褐变反应进行了紫外扫描分析，并研究了一株嗜热芽胞杆菌胞外淀粉酶同功酶的耐热性，分析了这一类群微生物在酒曲发酵过程中的作用。

嗜热脂肪芽孢杆菌质粒DNA的高压电穿孔转化研究

采用高压电穿孔法将穿梭质粒导入了嗜热脂肪芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）Ｋ１０４１和Ｔ５２１菌株。以对数生长后期的菌体制备Ｋ１０４１转化细胞，以ＬＢ平板上于５０℃培养的过夜菌制备Ｔ５２１转化细胞，细胞密度为５～７×１０９细胞／ｍＬ。电击条件如下：电容２５μＦ，电场强度１０．０ＫＶ／ｃｍ，脉冲控制器设定２００。 Ｋ１０４１和 Ｔ５２１最高转化效率分别达２．０１×１０和１．１９ ×１０转化子／μｇ ＤＮＡ。此外，研究发现Ｔ５２１和Ｋ１０４１中存在着ＤＮＡ的限制／修饰系统。

喜热噬油芽胞杆菌代谢产生表面活性剂的研究

采用丙酮抽提、高压液相分离纯化等技术从嗜热菌Geobacillus therm oleovorans以正十六烷为碳源培养的发酵液中分离获得性能突出的表面活性物质。利用甲脂化、乙酰化衍生技术结合GC-MS,MS(ESI)等鉴定该表面活性剂为单脂肪酸甘油脂。实验条件下,该表面活性剂使水的表面张力降低到32.7 mN/m,测定其临界胶束浓度为41 mg/L。

三种高压蒸气灭菌指示剂效果比较

为摸索一种有效简便的高压蒸气灭菌效果监测手段,我院消毒供应室对目前常用的3M指示胶带ZX-Ⅱ型压力蒸气灭菌指示管和生物指示剂(嗜热脂肪杆菌芽孢)进行比较实验,结果如下:

嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢在4种溶液中的D值比较研究

将嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus,ATCC7953)的芽孢悬浮于不同的溶液中,采用残存曲线法测定121℃下的耐受性(D值)并进行比较。结果表明,嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢在纯化水、胰酪大豆胨(TSB)液体培养基、5%葡萄糖注射液和碳酸氢钠注射液中的D值分别为3.26、3.61、0.97和2.94 min。芽孢在不同介质中所表现出的耐受性不同,因此在灭菌工艺验证过程中进行生物学确认时,选择芽孢和生物指示剂应考虑芽孢在不同溶液中耐受性的差异,应根据所测定的不同D值计算初始的芽孢接种量,以得到准确的生物杀灭力,使灭菌工艺的热力学杀灭效果保持足够的冗余,从而提供足够的无菌保证水平。

干、湿热对凡士林消毒效果观察

目的：了解干、湿热对凡士林灭菌的效果。方法：将嗜热脂肪杆菌芽胞片和枯草杆菌芽胞片放置于凡士林纱布的中间（约10～20层）分别放入干热灭菌器内上、中、下三个人于160℃、170℃、180℃消毒1小时。或将含有嗜热脂肪杆菌芽胞片的几士林纱布放入高压锅内，上前、上后、中、下前、下后五个点于121℃、126℃、132℃、140℃灭菌6～30分钟。结果：当干热温度达到180℃小时能杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞和枯草杆菌芽胞从而证实干热对凡士林灭菌效果较好，而压力蒸汽灭菌温度达140℃6分钟时也不能完全杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞，说明压力蒸汽灭菌器不适宜凡士林纱布灭菌。结论：干热消毒凡士林比湿热消毒凡士林效果好。

两种材料包装医疗物品压力蒸汽灭菌的效果

目的寻求一种更为实用的包装材料替代棉布方法采用140支纱的棉布及重量为35g/m2的国产一次性无纺布作为包装材料,分A、B两组包装再生医疗器械进行压力蒸汽灭菌,并按消毒技术规范的要求采用了物理监测、化学监测及生物监测进行灭菌效果监测。结果A、B两组的实验包灭菌效果监测合格率均达100%。结论一次性无纺布作为灭菌医疗器械的包装材料和棉布一样对灭菌效果无影响,灭菌有效期可相对延长,降低了消毒灭菌的成本。同时,彻底避免了棉布包布在回收、清洗、再利用的进程中给人们带来的不利因素。是替代棉布为再生医疗器械进行压力蒸汽灭菌的较为理想的包装材料。

甘油激酶的纯化与性质的研究

由嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus SIPI1.687)的粗提取液,经液-液双相抽提、DEAE-Toyopearl 650 M 离子交换柱层析及 SIPI-Ⅱ蓝色(?)料配基层析等分离提纯,可得甘油激酶(81U/mg),PAGE 鉴定为单带。用 Sephacryl 400凝胶过滤测得分子量为209,000道尔顿,SDS-PAGE 测定结果表明该酶由四个分子量均为50,000道尔顿的相似亚基组成。酶作用最佳 pH 9.4,pH 5.8~11.2时稳定;最佳温度为50℃,有较好的热稳定性。以甘油为底物时米氏常数为6.25×10M。

医院消毒供应室规范化管理的点滴体会

医院消毒供应室规范化管理的点滴体会北京武警总医院供应室张秀銮，师秀枝（北京１０００３９）医院消毒供应室是向全院供应各种灭菌器材、敷料和用品的重要科室。供应室的工作质量直接影响医疗技术的临床护理效果，甚至影响病人的安危，在控制医院感染中处于举足轻重的位...

B-D试验的有效性分析

目的:分析自制试验包B-D试验的有效性。方法:将B-D测试图、1292嗜热脂肪杆菌芽胞和132℃包内化学指示卡同时夹放于自制B-D测试包中央,经灭菌器B-D程序正常运行后观测结果,共试验226锅次。结果:43锅次的B-D试验图为阳性,而生物监测和化学监测的阳性结果分别为5锅次和9锅次,并经证实,43锅次的B-D试验图阳性中有38锅次为假阳性。结论:自制B-D测试包的布巾重复使用次数过多是导致B-D试验结果失真的主要因素,需对布巾的使用质量进行严重控制。

XGIQ型压力蒸汽灭菌器灭菌效果的测定

ＸＧＩＱ型压力蒸汽灭菌器为脉动真空式与下排气式两用压力蒸汽灭菌器。分别对两种使用方法杀灭嗜热脂肪杆菌（ＳＳＩＫ３１）芽胞效果进行了测定。