嗜热酯酶EstTs1的远源三维结构模建及分子对接

利用Phyre网络服务器,构建嗜热酯酶EstTs1的三维结构,并通过分子动力学优化构型,得到了可靠的构型.分子对接研究表明,p-硝基苯基丁酸酯是EstTs1的最适底物,其大小正适合EstTs1的活性口袋.Thr111是底物与酶结合的重要残基,与底物形成了氢键;Ser85是重要的催化残基.

古细菌Aeropyrum pernix K1超嗜热酯酶APE1547的稳定性

研究了纯化的超嗜热酯酶APE1547的稳定性．结果表明，该酶的稳定性非常好，蛋白的质量浓度为0．4mg／mL时，90℃的半衰期为20h，0．2mg／mL时的半衰期为12h；而蛋白的质量浓度为0．04mg／mL时，保温2．5h时残余活力仍在50％以上．同时还研究了热变性时该酶表面疏水氨基酸的变化．该酶的pH稳定性也很好，pH在6．5～9．0范围内作用24h，酶依然很稳定，残余酶活力大于93％；同时该酶还具有很强的耐有机溶剂的特性．

固定化嗜热酯酶催化拆分(R,S)-2-甲基-1-丁醇

利用帆布固定化嗜热酯酶APE1547(3)在非水介质中催化转酯化反应进行酶促拆分(R,S)-2-甲基-1-丁醇制备(S)-2-甲基-1-丁醇(4)。初步探讨了溶剂、酰基供体、温度及底物配比对3的催化活力(EA3)与4对映选择性比率(E4)的影响。在最佳拆分条件下,EA3=0.53μmol.min-1.mg-1,E4=15.4。3套用8次后仍然保持较高的催化活性。