藏灵菇嗜热链球菌胞外多糖对人结肠癌细胞的增殖抑制

探讨从藏灵菇中筛选的嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)所产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对人结肠癌HCT-8细胞增殖的影响。采用CCK-8法测定EPS对HCT-8细胞生长的抑制率;形态学观察EPS对HCT-8细胞的杀伤作用;流式细胞术检测EPS对HCT-8细胞周期的影响。结果显示:EPS对HCT-8细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;倒置显微镜下观察部分细胞脱壁、核碎裂、固缩,细胞悬浮坏死;细胞周期分析显示G1期细胞百分率增大。说明EPS通过直接杀伤人结肠癌HCT-8细胞,使细胞周期阻滞于G1期而抑制细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用。

响应面法优化嗜热链球菌产胞外多糖的发酵条件

本实验采用响应面法(RSM)对影响嗜热链球菌(Q4)产胞外多糖(EPS)的发酵条件进行了优化。以EPS含量为指标,通过单因素实验初步得到Q4产EPS的发酵条件;采用Placket-Burman(PB)设计法从以上单因素中筛选出显著因素,对显著因素进行Box-Behnken(BB)中心组合实验设计优化,建立EPS含量与各影响因素的回归方程,获得Q4产胞外多糖的最佳发酵条件为:初始p H6.8、发酵时间33 h、发酵温度41℃。验证实验结果表明,在此条件下胞外多糖的产量可达268.42 mg/L,比优化前的EPS含量(89.43 mg/L)提高了3倍。

酸奶发酵剂中嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌生长关系的微量量热法研究

应用微量量热计测定了普通酸奶菌种保加利亚乳杆菌 (L bulgaricus)、嗜热链球菌(Str thermophilus)及 2者混合菌在发酵鲜乳制酸奶过程中的热效应变化 ,并获得了细菌生长的热谱图曲线 ,从热谱图中得出的不同温度下细菌的热功率表明 ,嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌有促进生长的关系 ,该结果与酸度判断法的结论相同。

响应面法优化唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基

采用响应面方法对唾液链球菌嗜热亚种增殖培养基进行了优化。以MRS培养基作为基础培养基,采用Plackett-Burman(PB)设计法,对12种乳酸菌生长促进因子以及培养基的初始pH等13个因素对唾液链球菌嗜热亚种STX2生长的影响进行评价。筛选出CaCl2与豆粕水解液为STX2的生长强化因子,且培养基的初始pH值也是影响该菌体生长的关键因子,而其他物质对STX2增菌量的影响不显著。然后用旋转中心组合设计及响应面分析法确定强化因子的最佳浓度以及最佳的培养基初始pH值。在优化培养基中,STX2的菌体浓度达到6·8×108cfu/mL,比优化前的1·5×108cfu/mL提高了4·5倍。

用微量量热法测定保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的热量变化及世代时间

通过测定细菌生长过程的热量变化 ,得到相应的热谱图 ,由热谱图得到了不同温度下菌种在乳中的生长代时 。

响应曲面法优化酸奶中嗜热链球菌H1的生长条件

采用单因素试验和响应曲面法对酸奶中嗜热链球菌H1的最适生长条件进行了研究和优化.根据回归分析得到的最适培养条件为:温度41.02℃,pH5.74,接种量0.31mL·50mL-1,盐浓度0.23%,此时菌株的光密度OD600为1.176.经实验验证,在该条件下菌株光密度OD600为1.162,其相对误差小于2%.

响应面法优化嗜热链球菌WHH003的发酵条件

目的对嗜热链球菌WHH003发酵条件进行优化,以提高其发酵活菌数。方法采用单因素实验确定嗜热链球菌发酵条件的响应值,采用响应面法优化嗜热链球菌的发酵温度、p H以及接种量,确定最佳发酵条件。结果对嗜热链球菌活菌数的影响因素大小依次为:发酵p H值>接种量>发酵温度;最优发酵条件为:p H5.5、发酵温度45℃、接种量4%。在此条件下,嗜热链球菌的活菌数LG值为9.62。结论本研究建立的响应面模型可行,可降低其工业化生产成本。

色差分析法快速检测嗜热链球菌数的研究

以还原法为理论基础,研究了嗜热链球菌数的快速计数方法。借助细菌总数快速检测仪对加入指示剂后的样品颜色(RGB)变化进行检测,建立了色差值B值与嗜热链球菌数目之间的标准方程,相关系数可达到0.9820。对标准曲线进行准确度分析,与国标计数法检测结果差异不显著。结果表明,色差分析法是嗜热链球菌数快速计数的有效方法,该方法具有操作简单,耗时短等优点。

五株嗜热链球菌抗药性研究

采用药敏纸片法研究了五株高产粘嗜热链球菌(KLDS3.1012、KLDS3.1014、KLDS-SM、KLDS3.0206、KLDS3.0207)对15种抗生素的敏感性,结果发现,KLDS3.1014对两种抗生素有抗性,KLDS3.1012、KLDS-SM、KLDS3.0206对3种抗生素有抗性,KLDS3.0207则表现出多重抗药性。对五株嗜热链球菌耐四环素基因(tet M,tet S,tet L)、耐红霉素基因(erm A,erm B,msr A/B)和耐氯霉素基因(cat)的初步研究表明,四环素耐受基因、红霉素耐受基因以及氯霉素耐受基因不位于基因组DNA上,同时,受试菌株均无质粒,因此可以初步判断受试菌株抗药性不会进行传递。

中国传统发酵乳中嗜热链球菌H2的培养及益生特性评价

为促进国产乳品发酵剂自主研发,从内蒙传统发酵乳中分离鉴定一株嗜热链球菌菌株H2(Streptococcus thermophilus),通过响应面法优化培养基组成,采用体外分析法对菌株H2进行益生特性评价。结果表明,培养基氮源为45.25 g/L酵母提取物、生长因子为169.5 mg/L半胱氨酸、缓冲体系补充物为0.705 g/L碳酸钙且培养条件控制为温度40℃、初始pH值5.5、接种量3.5%时,培养液中活菌数达4.20×10^9 CFU/mL,是优化前的37.8倍。体外益生特性评价实验证明,H2在pH=3时存活率为49.65%,胆盐质量分数为0.3%时存活率可达99.62%。H2的发酵上清液经高效液相色谱(HPLC)法检测,分别检测到L-乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸等多种发酵代谢产物,其中L-乳酸浓度达到最大,为12.64 mmol/L,且未检到D-乳酸。H2的发酵上清液对3种自由基均有清除作用,其中对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率最高,为94.06%。

嗜热链球菌活菌制剂保护剂及其工艺

为提高嗜热链球菌片剂的活菌存活率,延长其有效期,在扩大培养、制剂压片两个工艺流程分别加入保护剂,并利用数学统计方法进行了优化,得到最佳保护剂配方。首先利用Plackett-Burman设计法,对扩大培养时加入的8种材料及制剂压片时的12种材料的保护效果进行评价,筛选出影响嗜热链球菌存活率的两组重要因素。利用均匀设计法进一步得到重要因素的最适质量分数。验证试验表明:在扩大培养时加入0.5%蔗糖和3.5%可溶性淀粉对存活率有显著保护作用;在制剂压片时加入12.0%聚乙烯吡咯烷酮、25.0%可溶性淀粉、4.5%硫代硫酸钠、2.5%麦芽糖对存活率有显著保护作用。

嗜热链球菌为模板制备银微米球及其电化学性能

以生物体作为模板制备微纳米材料是一种融合了生命科学和材料科学而发展起来的制备纳米材料和纳米结构的新方法.大部分生物模板具有廉价易得、环保无毒等优点.使用乳酸菌种属中的嗜热链球菌作为模板,以抗坏血酸作为还原剂,制备了银微球.扫描电镜测试表明银微球直径约为0.88～2.0 μm.改变反应条件可以调控所制备的银微球的大小.循环伏安分析表明使用银微球修饰的玻碳电极对对苯二酚具有电催化作用,有利于对苯二酚的检测,且直径较小的银微球对对苯二酚的检测更加有利.

五倍子分离组分抑制无乳链球菌的热动力学研究

为评价五倍子各分离组分对无乳链球菌的抑制作用,以期在实践中更高效地利用五倍子,利用已优化过的乙酸乙酯—乙醇—水(5∶1∶5,体积比)分离溶剂体系,应用高速逆流色谱法分离五倍子各组分。通过微量量热法检测五倍子粗提物和各分离组分对无乳链球菌TN3L的热动力学作用,计算得出五倍子各分离组分对无乳链球菌的半数抑制质量浓度。试验结果表明,五倍子可分离出5个组分(W1、W2、W3、W4、W5);组分W1对无乳链球菌无抑制作用,五倍子粗提物及其他分离组分的半数抑制质量浓度分别为0.1234、2.2294、0.2570、0.6687、0.1750 mg/mL,抑菌强度依次为W2<W4<W3<W5<粗提物,其中组分W5和W3抑菌效果明显,推测W5和W3为五倍子对无乳链球菌的主要抑制成分。

嗜热链球菌等六种微生物对AFB1降解能力的研究

霉菌毒素是霉菌产生的有毒的次级代谢产物,目前饲料中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)污染呈现分布广、检出率高的趋势,为寻求一种高效、安全、经济和绿色的降解和脱毒方法,研究选择迟缓芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、罗伊氏乳杆菌、乳酸片球菌、嗜热链球菌、米曲霉6种饲料中允许添加的微生物分别与AFB1共培养,采用高效液相色谱-质谱联用法检测AFB1残留量和降解产物。利用筛选出的高效菌株,选择接种量、时间、温度和水分作为试验因素,在单因素试验的基础上,运用二次回归正交旋转组合设计方法进行优化,建立回归模型方程并筛选最佳发酵条件。结果显示,嗜热链球菌对AFB1的降解效果最好,降解率为80.00%,降解率显著(P<0.05)高于其他几种菌;降解产物中含有AFM1,没有发现黄曲霉毒醇;最佳发酵条件为:发酵时间120 h、发酵水分65%、发酵温度44℃、接种量7×10^8CFU/g。说明嗜热链球菌可以用于降解饲料中的AFB1,为减少霉变饲料中AFB1的危害提供了理论依据和数据支撑。

嗜热链球菌对乳中残留抗生素检测影响因素的分析

【目的】采用嗜热链球菌抑制法,检测牛乳中抗生素残留时指示菌嗜热链球菌,研究菌活力、添加菌量、菌传代数、培养温度、培养时间等因素,对其在多种条件下的生长状况及最低灵敏度的影响进行分析比较。【方法】采用GB/T 4789.27-2008嗜热链球菌抑制法(TTC法)所用嗜热链球菌的菌种纯化、活性、稀释比例、剂量、培养温度、培养时间进行筛选,对阳性,阴性对照结果进行比较,找出最低灵敏度。【结果】新复活的嗜热链球菌其活力逐渐提高,该菌适宜培养温度为37℃,1∶1稀释菌液适宜加入量为1 mL,培养时间2 h,牛奶中抗生素残留最低检出限为0.004 IU/mL。【结论】TTC法具有简便、价廉、易于开展的优点,不需昂贵的仪器和设备,不受所检测的抗生素种类所限,各种影响细菌生长的抗生素均可检出,适用于各奶站及牛乳检测机构的抗生素残留检测。

乳酸链球菌素对速溶茶中耐热菌抑制作用研究

乳酸链球菌(Nisin)是一种由34个氨基酸组成的天然抗菌素,对革兰氏阳性菌具有广谱抑菌作用。文章就Nisin对于速溶茶中耐热芽孢和TAB的抑制作用及其与超高温瞬时灭菌(UHT)的协同作用进行了研究,结果表明:随着Nisin浓度的增加,耐热芽孢和TAB的数量急剧下降,添加量达到100 mg/L时,抑菌率达到100%;添加Nisin后,耐热芽孢和TAB抗热性降低,达到完全灭菌的温度由131℃降低至121℃,UHT和Nisin之间存在显著的协同抑菌作用,添加Nisin能有效降低UHT的温度水平。

乳制品中嗜热链球菌的快速检测

按传统的食品卫生检测方法对乳品中细菌进行检测比较繁琐，血清学检测法是一种快速、简便的检测方法，该法对食品中一些细菌可以起到快速检测作用。利用ELISA法对乳品中污染细菌进行检测，一般都需要首先增菌，因为ELISA法对菌体的检测量一般在10^6～10^8／ml。但是嗜热链球菌作为发酵乳制品中的一种重要添加菌，其数量要超过这个数量级。本文利用血清学方法检测乳制品中嗜热链球菌。首先，通过动物免疫方法制备了小鼠及家兔抗嗜热链球菌的免疫血清。然后。

微生物抑制法检测饲料中盐霉素含量的研究

从几种标准工作菌株中筛选出对盐霉素敏感的菌株,以敏感菌株为工作菌株测定饲料中盐霉素的含量。结果显示:枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌对盐霉素不敏感,地衣芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌对盐霉素敏感。以嗜热脂肪芽孢杆菌敏感菌株为工作菌株测定饲料中盐霉素含量,最低检出浓度为0.25μg/ml,饲料中最低检出限为1.0mg/kg,标准曲线相关系数为0.99,回收率在60%～80%,均高于标准中规定的参数。试验结果表明:微生物抑制法检测饲料中盐霉素含量,灵敏度高,快速,简便。

培养温度对嗜热链球菌抑制法检测结果的影响

为了了解培养温度对嗜热链球菌抑制法检测结果的影响,试验取装有浓度为1 mg/L的嗜热链球菌液体管,在6个不同温度下分别进行培养基划线培养与菌落计数,并进行加样牛奶的抗生素检测。结果表明:在49℃下嗜热链球菌抑制法检测效果最好,菌落生长情况最好。说明在49℃下进行试验有利于结果的判定,提高了嗜热链球菌抑制法检测的准确性。

动物源性食品中β-内酰胺类药物残留检测微生物抑制法的建立

为建立动物源性食品中β-内酰胺类药物残留检测的微生物抑制方法,对敏感菌嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC10149选择性和特异性、样品提取方法、平板制备条件、方法检出限等技术参数进行研究;对肉、鱼、虾和牛乳等动物源性食品作添加试验进行方法验证。室内验证结果的重复性标准差在3.094%～11.14%,再现性标准差在3.141%～13.30%;室间验证结果无显著性差异。建立的方法可用于动物源性食品中苄青霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素、苯唑青霉素和头孢噻呋7种β-内酰胺类药物残留检测,且能满足各国限量要求。