2.0亿CFU/mL嗜硫小红卵菌HNI-1悬浮剂研发与应用

2.0亿CFU/mL嗜硫小红卵菌HNI-1悬浮剂防治对象为番茄根结线虫和番茄花叶病。番茄根结线虫防治选择番茄移栽时进行灌根处理,每季使用2~3次,用量400~600 mL/667 m^2;番茄花叶病防治选择发病前或发病初期,采用喷雾方式,每季使用2~3次,用量180~240 mL/667 m^2。该制剂为纯生物制剂,使用后未见药害发生;对捕食天敌、寄生天敌低毒或无影响。

嗜硫色谱纯化抗体技术的研究进展

嗜硫色谱在高盐环境下对抗体及其他某些蛋白质产生特异性吸附,再在低盐条件下洗脱,可获得高纯度及高回收率的蛋白质产品,是一种新型蛋白质纯化技术。该文对嗜硫色谱及其在抗体纯化中的应用做了综述。

一种用于抗体快速分离的嗜硫纳米粒子的制备及表征

以二乙烯基砜为偶联试剂,将聚乙二醇(PEG)固定于氨基硅烷偶联剂改性的磁性纳米粒子上,制备了一种"磁性微核-砜基-聚乙二醇链"的核-壳纳米粒子,兼具砜基的嗜硫作用和PEG的抗非特异性吸附功能。采用~1H NMR和表面Zeta电位分析对制备过程进行了表征。分别以人免疫球蛋白G(人IgG)和牛血清白蛋白(BSA)为抗体和杂蛋白模型,采用静态吸附实验考察了PEG链长、偶联基团、溶液pH值和盐浓度因素对于材料抗体选择性吸附的影响。结果表明,在pH 7.45和0.15 mol/L NaCl溶液条件下,氨基聚乙二醇2000(m PEG2000-NH_2)修饰的磁性纳米粒子具有最优的抗体分离性能,IgG吸附量和选择性分别为132.8 mg/g和32.5(IgG吸附量/BSA吸附量)。在复杂生物样品抗体分离应用中,使用此纳米粒子一步分离可以分别从胎牛血清和无血清细胞培养基中得到纯度为96%的IgG和纯度为99%的奥马珠单抗。此外,采用生物膜层干涉传感技术(Bio-layer interferometer,BLI)对比了此纳米粒子对人、牛、兔和羊的IgG吸附性能的差异,并与传统Protein A配基进行了定量比较。结果表明,此纳米粒子对抗体的吸附具有物种选择性,且与Protein A的物种选择性不同,具有对比Protein A亲和性较差的物种的IgG的快速分离的潜力。

嗜硫红假单胞菌产氢机理的研究及与荚膜红假单胞菌的比较

研究了嗜硫红假单胞菌(Rhodobacter Sulfidophilus)的氢酶、固氮酶活力与产氢机理,并与荚膜红假单胞菌(Rhodobacter capsulatus)进行了比较。认为氢酶活力不是影响其产氢能力的主要因素,由于不同时期氢酶活力与固氮酶活力的变化,导致了嗜硫红假单胞菌在对数生长期末期才开始产氢。

嗜硫性磁性微球技术特异性分离人免疫球蛋白G

利用微悬浮聚合技术,以二乙烯基苯、醋酸乙烯酯为单体,制备了微米级的顺磁性的聚合物微球,磁含量高于24%,饱和磁强度为16.7emu/g,平均粒径介于0.6~20μm,并在其表面修饰二乙烯基砜和2-巯基苯并噻唑。所制备的磁性聚合物微球,在低盐浓度下,依靠配基对抗体的电子-供电子（EDA）效应,可以实现磁性微球对人血清中的免疫球蛋白G（IgG）的特异性吸附行为。在解吸附过程中,洗提液中的盐种类对分离过程产生重要影响。温度对其吸附行为的影响较小,整个分离过程可以在室温条件下进行。利用这种嗜硫性磁球分离技术,条件温和,效率较高,分离出的抗体纯度较高,且生物活性没有损失。

嗜硫色谱法提取蕲蛇蛇毒中酶组分

本文介绍了应用嗜硫色谱提取薪蛇蛇毒中蛋白组分的效果,并对该组分进行部分表征,鉴定了谈组分的抗凝血效果和蛋白酶活性。

嗜硫小红卵菌与噻虫嗪组合对番茄病毒病的预防和防控效果

2019—2020年连续两年在内蒙古自治区赤峰市进行了番茄病毒病的预防和防控试验。采用嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂喷雾和噻虫嗪蘸(灌)根的方法,从控制病毒病介体昆虫烟粉虱和增强植物抗病性的角度来提高番茄病毒病的防控效果。两年的预防试验结果表明,使用HNI-1菌剂喷雾和噻虫嗪蘸根后,番茄病毒病的病情指数均控制在1.6以下,番茄上烟粉虱的数量维持在6头·株^(-1)以下;防控试验结果表明,使用HNI-1菌剂喷雾和噻虫嗪灌根,与对照相比,用药15 d后番茄病毒病发病症状明显减轻,病情指数显著降低,为5.94~7.48,番茄上烟粉虱的数量降低为64.3~84.3头·株^(-1),表明该防控技术可有效预防和防控番茄病毒病。

嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防效

为明确嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂对水稻细菌性病害的防治效果,试验以感病品种玉针香为供试水稻品种,通过田间小区试验研究了该菌剂对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防治效果,结果表明:2.0亿CFU/m L嗜硫小红卵菌HNI-1悬浮剂100、200、300 mL/667m~2处理对水稻白叶枯病的防效在末次药后14 d为56.76%~69.48%,其中300 mL/667m~2处理的防效高于对照药剂20%噻菌铜悬浮剂100 mL/667m~2处理,但差异不显著;3种浓度药剂对水稻细菌性条斑病的防效在末次药后14 d为62.49%~72.98%,且300 mL/667m~2处理的防效显著高于对照药剂处理。这表明嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂具有防控水稻细菌性病害的应用潜力。

嗜硫小红卵菌净化模拟海水养殖废水效果研究

本试验旨在探讨嗜硫小红卵菌净化海水养殖废水的效果。试验采用嗜硫小红卵菌处理分别添加了硫化钠、葡萄糖、氯化铵和亚硝酸钠的模拟海水养殖废水,处理10天后取样,检测海水中的S2-、COD、NH3-N和NO2-N的浓度。实验发现高浓度(107 cfu/m L)光照条件下的嗜硫小红卵菌对模拟水体中S2-的去除率可达到94.9%,对照组的去除率为68.6%,高浓度(107cfu/m L)黑暗条件下的嗜硫小红卵菌对COD的去除率可达到39.7%,对照组的去除率为13.1%。但对于NH3-N和NO2-N的浓度,实验组和对照组几乎没什么差别。因此,应根据嗜硫小红卵菌本身的特性有选择的净化废水。

嗜硫原始红藻表面自组装ZIF及其对铀(Ⅵ)的吸附性能研究

采用一锅法在嗜硫原始红藻表面成功实现了ZIF-8和ZIF-67的自组装,并考察了Gs/ZIF-8和Gs/ZIF-67在不同pH、浓度、温度、时间等条件下对铀(Ⅵ)的吸附性能.结果表明,Gs/ZIF-8和Gs/ZIF-67最佳吸附pH值分别为5和5.5.热力学和动力学模型分析表明,吸附过程以单分子层的化学吸附为主导,且为自发的吸热过程.在25℃下,Gs/ZIF-8和Gs/ZIF-67的最大吸附量分别为393.04 mg·g^(-1)和619.07 mg·g^(-1),与纯藻粉相比,吸附量分别提升了24.11%和94.99%.这一研究为金属有机框架化合物提高微藻对铀(Ⅵ)的吸附量提供了新思路,也为解决铀(Ⅵ)污染问题提供了有益参考.

鸡卵黄免疫球蛋白的嗜硫性色谱一步分离纯化

采用重力沉降法对卵黄液进行脱脂预处理 ,利用嗜硫性色谱 ,实现鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)的一步分离纯化 ,蛋白质的回收率高达 91% .鸡卵黄免疫球蛋白IgY经SDS -PAGE检测为电泳纯 ,活性回收率达 70

嗜硫性色谱分离鸭蛋抗体

采用嗜硫性色谱从鸭蛋蛋黄中提取抗体 .将澄清的蛋黄水溶性部分脱脂后 ,利用嗜硫色谱 (T -gel)分离鸭蛋蛋黄中的抗体 (IgY) ,得到的两种鸭蛋抗体 ,经SDS -PAGE检测 ,分子量分别为 2 0 0kD和 12 0kD .整个分离过程的IgY回收率极高 .

新型嗜硫膜亲和纯化鸡传染性法式囊卵黄抗体研究

以普通定性滤纸为基质 ,经碱处理 ,二乙烯砜活化和巯基乙醇偶联后 ,制备成嗜硫膜 (thiophilic -mem brane ,TM) ,考察了其对鸡传染性法式囊 (IBD)卵黄抗体 (IgY)的特异性亲和吸附作用 .卵黄经醋酸钠 -醋酸缓冲液 10倍稀释于 4℃自然沉降脱脂后 ,所得上清液 (WSF)经嗜硫膜亲和吸附分离 ,可一步纯化得到SDS-PAGE电泳纯的卵黄抗体 .IgY在嗜硫膜上的吸附速度随着流速的增加而增大 ,吸附量则随着流速的增加而减少 .

嗜硫类磁性聚合物微球高效分离抗体

用微悬浮聚合技术制备微米级顺磁性的聚合物微球,并通过水解反应在其表面生成丰富的羟基,进而通过二乙烯基砜活化,在其表面修饰2-巯基嘧啶,实现磁性微球对人体免疫球蛋白G(IgG)的特异性识别.进一步探讨了不同解吸附环境,如pH值、温度、离子种类、离子强度等条件,对这种特异性吸附行为的影响.采用此磁性分离技术后,分离抗体的纯度超过92%,抗体活性高于99%.通过连续分离工艺,IgG的分离效率达到86.8%.

利用嗜酸性硫杆菌去除制革污泥中铬的研究

本研究采用嗜酸性硫杆菌 (Thiobacillusferrooxidans和Thiobacillusthiooxidans)并添加S粉为能源物的生物淋滤技术应用于制革污泥中铬的去除 (溶出 ) .序批式试验结果表明 ,淋滤处理 8d ,Cr的溶出率可高达 10 0 % (污泥中铬的原始浓度为14 5 19mg/kg) .在能源物各种投加比例中 ,以 4 g/L的投加比例较好 .研究表明 ,生物淋滤法去除制革污泥中铬主要是通过嗜酸性硫杆菌的新陈代谢使介质酸化而实现的 .生物淋滤作用导致介质 pH下降到 2 0 ,是使制革污泥中铬大量溶出的一个临界点 ,在 pH低于这个临界点时 ,污泥中铬去除率才可迅速达到 80 %～ 10 0 % .这为重金属含量高的废弃物处理展示了一条全新的途径 .

嗜酸硫氧化菌株的分离及其在污泥生物脱毒中的应用

以元素硫为底物,采用选择性液体培养基加富培养继以稀释平板法直接从污泥中分离出一株嗜酸硫氧化菌株SS-3。该菌株能将硫粉或硫代硫酸盐氧化成硫酸或硫酸盐,但不能氧化二价铁。序批式生物淋滤试验结果表明,接种该菌株并添加硫作为底物可有效加速污水污泥中重金属的溶出。经过15d的生物淋滤,Cr,Cu,Zn的去除率可分别达到66 8%,95 4%,100%。

嗜酸硫氧化细菌作用下元素硫化学形态的研究进展

嗜酸硫氧化细菌是生物冶金过程中研究最为广泛的细菌,广泛分布在含硫和硫化物丰富的环境中。嗜酸硫氧化细菌作用下,单质硫及其它还原型硫化物(包括金属硫化矿)经过一系列形态转换使得硫在其细胞体内、体外和环境沉积物中存在着不同形态分布。单质硫经细菌细胞活化后在细胞体内以硫球形式积累;还原型硫化物可被细菌氧化至硫酸盐,其氧化中间态多为单质硫或连多硫酸盐等。有关嗜酸硫氧化细菌作用下硫的形态研究十分缺乏,进一步开展嗜酸硫氧化细菌作用下元素硫化学形态的研究可以为这类细菌的硫氧化机制及对硫化矿的浸出机理的阐明提供理论依据。

嗜热硫氧化硫化杆菌一新菌株的分离与鉴定

从云南腾冲酸性热泉富集物中分离到一株适度嗜热喜酸菌YN22．该菌革兰氏染色阳性，直杆状或微弯，长约1．6～2．8μm，直径0．4～0．7μm．该菌能在25～60℃下生长，最适生长温度为53℃；生长pH为1．0～5．0，最适pH为1．5；化能自养型，0．025％（w／V）的酵母提取物对其生长有明显的促进作用，在酵母提取物存在的情况下能快速氧化Fe^2＋，但对S0和还原型硫化物的氧化能力较低．16s rDNA系统发育分析表明，该菌与嗜热硫氧化硫化杆菌（Sulfobacillus thermosulfidooxidans）的16sr DNA序列相似性达99％．YN22基因组DNA的G＋C含量为47．3m01％，与嗜热硫氧化硫化杆菌模式菌株VKMB-1 269非常接近，后者基因组DNA的G＋C含量为47.5mol％．基于形态特征、生理生化特性、系统发育学和G＋C含量的分析结果，YN22应归于硫化杆菌属（Sulfobacillus），为嗜热硫氧化硫化杆菌（Sb．thermosulfidooxidans）的一新菌株．这是国内首次分离，并经多种方法鉴定、确认的嗜热硫氧化硫化杆菌，从而为我国浸矿微生物的基础和应用研究提供了最典型的适度嗜热菌种．

一株中度嗜热嗜酸硫氧化杆菌的分离和系统发育分析

从云南腾冲温泉酸性水样分离得到一株中度嗜热嗜酸硫氧化杆菌MTH 0 4 ,对分离菌株进行了形态、生理生化特性研究及 1 6SrDNA序列分析。该菌株为革兰氏阴性细菌 ,短杆状 ,菌体大小 (0 6～ 0 8) μm× (1～ 2 ) μm ,化能自养 ,可利用硫磺、四硫酸盐、硫代硫酸盐为能源生长 ,不能利用蛋白胨、葡萄糖、酵母粉 ,也不能进行混合型生长。最适生长温度在 4 0℃～ 4 5℃之间 ,最适生长pH 2 0～ 3 0 ,代时 8h。以 1 6SrDNA序列同源性为基础构建了包括 1 3株相关种属在内的系统发育树 ,结果表明 ,MTH 0 4与喜温硫杆菌 (Thiobacilluscaldus)处于同一进化树分支中 ,相似性达 99 5

喜温嗜酸硫杆菌YN12菌株的鉴定及其镉抗性能

自云南酸性热泉水样中分离出一株中度嗜热硫氧化菌YN12。对其形态特征和生理生化特性以及16S rDNA序列分析结果证明,该菌株归属于喜温嗜酸硫杆菌(Acidithiobacillus caldus)。重金属抗性实验表明,YN12菌株对3CdSO4.8H2O具有超强抗性,其最高初始Cd2+耐受浓度达4.8 g/L。在此基础上,不断提升3CdSO4.8H2O浓度,其最终Cd2+耐受浓度可达31.5 g/L(相当于3CdSO4.8H2O 210 g/L)。在该最终Cd2+耐受浓度下,经过连续3代的适应性生长,YN12菌株的生长速度和硫氧化活性均能得到较好的恢复。