嗜酸性粒细胞来源神经毒素与儿童呼吸道感染喘息症状相关性研究

目的探讨外周血嗜酸性粒细胞来源神经毒素(EDN)水平与呼吸道感染儿童喘息症状的相关性,为临床诊断提供新的依据。方法回顾性纳入2016年1月至2019年6月之间就诊于我院的120例呼吸道感染的儿童。获取其一般临床信息,并采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血血浆中END,比较喘息患者与非喘息患者外周血EDN等指标。结果120例呼吸系统感染患者,其中喘息组40名、非喘息组80名。喘息组患者平均年龄显著高于非喘息组患者(P<0.001),并且喘息组患者过敏性皮炎病史比例显著高于非喘息组患者(P=0.019)。喘息组患者外周血EDN水平显著高于非喘息组患者(48.8±71.4 ng/mL vs.13.3±5.1 ng/mL,P<0.001)。喘息组患者外周血EDN水平显著高于肺炎(P<0.001)、普通上呼吸道感染(P<0.001)和扁桃体炎(P<0.001)患者,但这三组之间则无显著统计学差异。1岁以内、1~3岁和3~7岁的患者外周血EDN水平均无显著统计学差异。结论喘息型呼吸系统感染儿童血浆EDN水平显著升高,EDN可能是评估呼吸道感染儿童喘息症状的可靠生物标志物。

血清嗜酸粒细胞来源神经毒素与阳离子蛋白对儿童早期喘息性疾病再发喘息的预测价值

目的探究血清嗜酸粒细胞来源神经毒素(EDN)和血清嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)对婴幼儿早期喘息再发喘息的预测价值。方法收集2016年7月至2017年3月上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心呼吸内科住院的60例喘息患儿,分别测定血清EDN、ECP、免疫球蛋白E(Ig E)、嗜酸粒细胞(EOS)计数,随访观察1年,根据出院1年后患儿是否再发喘息分为复发喘息组(32例)和非复发喘息组(28例)。比较两组血清EDN、ECP、Ig E、EOS计数及预测再发喘息的曲线下面积。结果复发喘息组血清EDN、ECP、Ig E水平高于非复发喘息组[(30. 93±14. 94)μg/L比(23. 44±11. 51)μg/L,18. 43(13. 73,34. 52)μg/L比14. 1(8. 00,20. 92)μg/L,37. 25(20. 00,124. 20) k U/L比8. 71(4. 63,26. 35) k U/L](P <0. 05),两组血清EOS计数比较差异无统计学意义(P>0. 05)。EDN预测喘息患儿是否再发喘息的ROC曲线下面积为0. 643,EDN最佳诊断界值为28. 32μg/L,灵敏度为56. 2%,特异度为71. 4%。ECP预测喘息患儿是否再发喘息的ROC曲线下面积为0. 656,ECP最佳诊断值为23. 41,灵敏度为43. 7%,特异度为89. 3%。Ig E预测喘息患儿是否再发喘息的ROC曲线下面积为0. 767,Ig E最佳诊断值为19 k U/L,灵敏度为78. 1%,特异度为71. 4%。EDN、ECP、Ig E两两之间ROC曲线下面积比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论早期喘息患儿血清EDN、ECP和Ig E水平对再发喘息有一定预测价值,监测喘息患儿血清EDN、ECP和Ig E水平可为有哮喘倾向的患儿提供早期诊断及早期干预的依据。

血清嗜酸性粒细胞神经毒素的表达及与变应性鼻炎舌下免疫治疗疗效的相关性研究

目的:探索嗜酸性粒细胞神经毒素(Eosinophil-derived neurotoxin,END)在变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)外周血中的表达及其在舌下免疫治疗(Sublingual immunotherapy,SLIT)疗效预测中的应用价值。方法:招募40例健康志愿者(对照组)和79例接受SLIT的AR患者(AR组)作为研究对象,通过ELISA检测其外周血中END水平,并探讨其与临床指标的相关性。所有入组患者均接受为期3年的SLIT,并根据疗效变化将研究对象分为有效组和无效组,比较两组治疗前外周血END水平,利用二元Logistic回归分析和受试者工作曲线(Receiver operator characteristic curve,ROC)评估外周血EDN对SLIT疗效的预测价值。结果:对照组外周血EDN浓度为(61.3±5.5)ng·mL^(-1)低于AR组(100.6±6.2)ng·mL^(-1),差异有统计学意义(P<0.0001)。AR患者血清EDN浓度与外周血嗜酸性粒细胞计数(r=0.288,P=0.002)及比例(r=0.284,P=0.002)、血清总IgE浓度(r=0.460,P<0.0001)以及SMS评分(r=0.253,P=0.024)均呈正相关。SLIT有效组中血清EDN浓度为(63.0±9.7)ng·mL^(-1),低于无效组(93.41±6.74)ng·mL^(-1),差异有统计学意义(P=0.012)。二元Logistic回归分析和ROC结果外周血EDN浓度与SLIT疗效相关并能较好预测其疗效(OR=1.037,P=0.007;AUC=0.812,P=0.000)。结论:AR患者外周血中EDN水平显著升高,并与患者症状评分以及外周血嗜酸性粒细胞计数和比例等临床指标相关。治疗前检测血清EDN水平可能有助于预测SLIT疗效。

肉毒杆菌毒素中毒

肉毒杆菌是一种只能在无氧条件下生长的细菌，存在于土壤、鱼、家畜的肠内及粪便中，亦可附着在水果、蔬菜、罐头、火腿、膜肠肉里而大量繁殖外毒素。它的芽孢耐热力强，在沸水中可存活5～22小时，湿热至120度，须经5分钟才能死亡。肉毒杆菌中毒并不是致病菌直接引起的，而是由肉毒杆菌产生的外毒素-嗜神经毒素所致，它专门侵害人类的神经系统，成人致死量为0．01mg。

抗肝癌hdsFv融合hEDN重组免疫毒素对体外培养的人肝癌细胞的杀伤作用

目的:探讨重组免疫毒素hdsFv-hEDN在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化,观察其体外杀伤作用。方法:利用IPTG诱导hdsFv-hEDN免疫毒素在大肠杆菌中的表达。诱导转化菌经超声碎菌、离心、N i-NTA Agarose亲合层析等步骤纯化,并通过SDS-PAGE和W estern-b lot进行分析及检测。采用MTT比色法观察其对人肝癌细胞的杀伤作用。结果:IPTG诱导后,hdsFv-hEDN在大肠杆菌中获得了可溶性表达,表达量为8%。表达产物纯化后,纯度达到基本均一。MTT结果表明,其对人肝癌细胞具有一定的杀伤作用。结论:本研究实现了hdsFv-hEDN重组免疫毒素在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化,获得了具有一定杀伤作用的抗肝癌重组免疫毒素。

血清嗜酸性粒细胞来源神经毒素与儿童哮喘的研究进展

支气管哮喘是儿童最常见的一种慢性呼吸道疾病,临床表现为反复发作的咳嗽、喘息和呼吸困难.近年来儿童哮喘发病率和病死率呈明显上升趋势.哮喘的发病机制目前仍不明确,对于哮喘的诊断仍缺乏特异性的实验室指标,尤其对于小于5岁不能配合肺功能的年幼儿.血清嗜酸性粒细胞来源神经毒素(eosinophil-derived neurotoxin,EDN)作为哮喘发病机制中重要参与者——嗜酸性粒细胞的脱颗粒产物,在协助哮喘诊断、分型、预后方面越来越多的引起研究者们的注意,该文就血清嗜酸性粒细胞来源神经毒素与儿童哮喘的关系进行综述.

核糖核酸酶A家族典型成员在肿瘤发生中的作用

人体中核糖核酸酶A(ribonuclease A,RNaseA)家族包含8个典型成员(RNase 1至RNase 8)。已有研究显示,除RNase 8外,该家族其它典型成员影响了胰腺癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌和皮肤癌等多种肿瘤的发生发展。在肿瘤发生过程中,特定RNase表达量及糖基化修饰会发生显著改变,是肿瘤诊断的潜在标志物;它们能以多种机制参与肿瘤发生、生长和转移等过程,有望成为肿瘤治疗的靶点;而部分成员则具有杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤发展的功能,存在临床开发成肿瘤治疗药物的可能。具体而言,RNase 1通过核糖核酸酶活性依赖的细胞毒性和细胞外RNA降解功能,发挥直接杀伤肿瘤细胞或降低局部炎症而抑制肿瘤生长的作用;RNase 1还能结合并激活促红细胞生成素,产生肝细胞癌受体相互作用蛋白A4 (erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma receptor-interacting protein A4, EphA4)信号通路,促进乳腺癌的发生。RNase 2和RNase 3是嗜酸性粒细胞颗粒蛋白质的重要成分,依赖于阳离子性及核糖核酸酶活性在抗肿瘤免疫防御中发挥重要作用。RNase 4和RNase 5则通过诱导血管生成、加快肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡等方式,促进肿瘤发生发展。其中RNase 5发挥作用的分子机制包括促进47 S前体rRNA转录和激活促肿瘤生长的信号通路,以及产生tRNA衍生的应激诱导的RNA(tRNA-derived stress-induced RNA,tiRNA)等。虽然RNase 6和RNase 7与肿瘤的发生存在相关性,但其具体作用及机制的研究仍较少。本文总结了RNase A家族典型成员与肿瘤的相关性和作用机制,并对其临床应用前景进行了展望,以期为肿瘤治疗药物的开发提供新思路。

粪便钙卫蛋白和嗜酸性粒细胞源性神经毒素在非IgE介导的食物过敏中的意义

非IgE介导的食物过敏多在接触致敏食物后数小时到数天出现腹泻、黏液便、血便、反流、呕吐等消化道症状。其发病机制可能与食物过敏原激活肠道T细胞分泌TNF-α、IL-4等促炎细胞因子,导致中性粒细胞和嗜酸性粒细胞向肠腔迁移,引起肠道炎症反应、造成肠道通透性增加有关。目前尚无快速特异的诊断方法,主要根据临床表现结合食物回避及口服食物激发试验诊断。近年来粪便生物标志物作为判断肠道炎症的特异性指标广泛应用于肠道感染、炎症性肠病等疾病的辅助诊断和病情评估,但在胃肠道过敏性疾病中的应用报道甚少。该文将重点阐述粪便钙卫蛋白、粪便嗜酸性粒细胞源性神经毒素在非IgE介导的食物过敏中的意义。

儿科危重急症急救讲座 第三讲 食物中毒(下)

肉毒杆菌食物中毒 肉毒杆菌为革兰阳性厌氧肉毒梭状芽孢杆菌，存在于土壤、鱼及家畜的肠内和其粪便中，在缺氧的环境下可大量繁殖，产生外毒素（为嗜神经毒素）。肉毒杆菌依其血清型不同而分为A、B、D、E、F、G等8型，引起人类中毒的主要血清型是A、B、E三型。

血清IL-33、EDN表达水平与呼吸道过敏性疾病的关联性

目的:探讨血清IL-33、血清嗜酸性粒细胞衍生神经毒素(EDN)在呼吸道过敏性疾病中表达水平及其与疾病的关联性。方法:收集某院114例诊断为过敏性哮喘、过敏性鼻炎等呼吸系统疾病患儿为病例组,另选取57例门诊体检健康的受检者为对照组。比较2组研究对象血清IL-33、EDN表达水平。病例组根据患儿血清总IgE(TIgE水平)分为高表达组、低表达组,检测2组患儿血清IL-33、EDN水平、炎性指标及肺功能水平,分析血清炎性指标和肺功能与血清IL-33、EDN的相关性。结果:病例组患儿血清IL-33、EDN水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);高表达组患者血清IL-33、EDN水平和血清炎性指标TNF-ɑ、IL-6、CRP水平均高于低表达组,潮气量(TV)、呼气峰值流速预计值(PEF)则低于低表达组,差异具有统计学意义(P<0.05)。血清IL-33、EDN水平与血清炎性因子TNF-ɑ、IL-6、CRP成正相关,与TV、PEF无明显相关联性(P>0.05)。结论:呼吸道过敏性患者中血清IL-33、EDN表达水平升高,可诱发机体气道炎症,可能影响肺功能,临床进行疾病诊断时可充分评估血清IL-33、EDN水平判断疾病严重程度。

呼吸道过敏性疾病患儿血清EDN与总IgE水平的相关性分析

目的:探讨嗜酸性粒细胞衍生神经毒素(EDN)对儿童呼吸道过敏性疾病的诊断价值及其与血清总IgE(tIgE)水平的相关性。方法:诊断为过敏性哮喘或(和)过敏性鼻炎的65例患儿作为病例组,健康儿童22例为对照组,根据病例组患儿的血清tIgE水平将其分为A组(42例,血清tIgE水平>200 kU/L)和B组(23例,血清tIgE水平为100~200 kU/L)。对各组患者的血tIgE、EDN、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平进行检测和比较。结果:病例A组、病例B组、对照组三组间比较,血清ECP水平的差异无统计学意义(P>0.05),血清EDN和HMGB1水平的差异有统计学意义(P<0.05)。A、B组间患儿血清EDN和HMGB1水平的差异无统计学意义(P>0.05),但均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果显示,血清EDN水平诊断儿童呼吸道过敏性疾病的ROC曲线下面积(AUC)具有统计学意义(P<0.05),AUC值为0.894,而血清ECP、HMGB1水平诊断儿童呼吸道过敏性疾病的AUC无统计学意义(P>0.05)。直线相关分析和多元线性回归分析结果显示,患儿的血清EDN水平与tIgE水平具有相关性(P<0.05)。结论:相对于ECP和HMGB1,血清EDN对儿童呼吸道尘螨过敏性疾病具有更高的实验诊断价值,其表达水平与IgE水平具有显著相关性,有望作为儿童呼吸道过敏性疾病的辅助诊断和病情评价的新型生物学指标。

抗肝癌hdsFv-hEDN重组免疫毒素对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的:研究抗肝癌hdsFv-hEDN重组免疫毒素对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,评价其作用为导向治疗药物的临床应用价值。方法:将体外培养的人肝癌细胞系SMMC-7721细胞接种于裸鼠皮下,建立荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,随机分为hdsFv-hEDN治疗组和对照组,分别给予尾静脉注射hdsFv-hEDN和生理盐水,1次/日,共2周。比较各组裸鼠皮下移植瘤生长速度、肿瘤体积和重量,并计算肿瘤的抑制率。取各组裸鼠肿瘤组织,心,肺,肝,肾组织HE染色,光学显微镜下观察。结果:抗肝癌hdsFv-hEDN治疗组裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用显著,肿瘤生长速度减慢,肿瘤体积从42.62±0.57mm3增加到74.28±2.59mm3、瘤重为155.82±14.43mg,而对照组肿瘤体积从41.94±0.91mm3增加到127.42±4.81mm3、瘤重为283.28±15.21mg,两组比较差异非常显著。肿瘤体积抑瘤率和瘤重抑瘤率分别达到41.59±0.02%和45.51±0.09%。组织学观察抗肝癌hdsFv-hEDN组肿瘤组织出现大片坏死,凋亡明显增加,心、肝、肺、肾等重要器官未见明显异常。结论:抗肝癌hdsFv-hEDN重组免疫毒素对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长具有良好的抑制作用。

特应性皮炎患儿临床特征及血清Apo A1、25(OH)D、EDN水平变化

目的探讨特应性皮炎(AD)患儿临床特征及血清载脂蛋白A1(Apo A1)、25羟基维生素D[25(OH)D]、嗜酸性粒细胞衍生神经毒素(EDN)水平变化。方法回顾性选取2016年1月至2019年12月株洲市中心医院就诊的200例AD患儿为AD组,100例健康体检儿童为对照组。分析AD患儿临床特征,对比两组血清Apo A1、25(OH)D、EDN水平差异,探讨血清Apo A1、25(OH)D、EDN水平与AD病情严重程度的关系。结果200例AD患儿男女构成比为1.41∶1,发病年龄<3个月占比最高[64.50%(129/200)],检测出吸入性过敏原118例(59.00%),食入性过敏原82例(41.00%)。AD组患儿血清Apo A1、EDN水平均高于对照组(均P<0.05),而血清25(OH)D水平则明显低于对照组(P<0.05)。随着病情的加重,AD患儿血清Apo A1、EDN水平逐渐升高,而血清25(OH)D则呈明显降低趋势(均P<0.05)。AD患儿AD严重程度评分与血清Apo A1、EDN水平呈正相关(均P<0.05),与血清25(OH)D水平呈负相关(P<0.05)。结论Apo A1、25(OH)D、EDN参与小儿AD的发病过程,其血清表达水平与AD病情严重程度密切相关。