磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞的作用研究进展

近年来,呼吸道过敏性疾病已成为全球性疾病,尤其是变应性鼻炎和哮喘。嗜酸性粒细胞及其释放的炎症介质的作用是呼吸道过敏性疾病的主要发病机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞的存活、增殖、生长和代谢有多效性作用,也影响着炎症反应的进程。针对PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞作用的研究,有助于明确呼吸道过敏性疾病的发病机制。本文就PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中嗜酸性粒细胞的作用研究进展进行综述,以期对临床治疗呼吸道过敏性疾病提供理论参考。

普仑斯特对人支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3的影响

目的研究白三烯D4(LTD4)是否参与调节人支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3(Eot-3),探讨白三烯受体拮抗剂普仑斯特对此调节效应的影响。方法用LTD4预处理人支气管上皮细胞1h,用IL-4刺激细胞24h,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中Eot-3蛋白水平;用不同水平普仑斯特预处理细胞,重复上述步骤。结果未经处理的人支气管上皮细胞仅表达微量Eot-3;用IL-4刺激细胞并培养24h后,Eot-3表达明显增强;LTD4预处理细胞1h,可使IL-4的诱导作用加强;普仑斯特可完全逆转LTD4的上调作用。结论上调IL-4诱导Eot-3在上皮细胞的表达可能是白三烯参与支气管哮喘嗜酸性粒细胞炎症的机制之一;普仑斯特对LTD4上调效应的逆转,可能是白三烯受体拮抗剂治疗哮喘的作用机制之一。

老年脓毒血症患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子-3、降钙素原和白细胞介素-33的表达及意义

目的观察脓毒血症老年患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子(EOTAXIN)-3、降钙素原(PCT)及白细胞介素(IL)-33的表达特征。方法 99例确诊为脓毒血症的老年患者作为观察组,60例同期体验健康的老年人作为对照组,检测两组血清中EOTAXIN-3、PCT和IL-33的表达,分析三者在不同临床特征中的表达差别。结果两组血清中EOTAXIN-3、PCT和IL-33的表达差别有统计学意义。观察组血清中EOTAXIN-3、PCT和IL-33的表达与病变类型及预后密切相关。相关分析显示观察组中PCT和IL-33表达具有正相关性。结论脓毒血症老年患者血清中EOTAXIN-3、PCT和IL-33高表达,PCT和IL-33具有一定的协同作用,不仅对病变进展有明显促进作用,还对判断预后有一定价值。

白细胞介素-4对支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3的影响

目的:研究嗜酸性粒细胞趋化因子-3(eotaxin-3)在支气管上皮细胞的表达以及Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)对其表达的调节,探讨支气管上皮细胞和IL-4在气道变态反应性炎症中的作用。方法:以BEAS-2B细胞和NHBE细胞为研究对象,用IL-4刺激细胞24 h,RT-PCR法检测eotaxin-3在mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中eotaxin-3蛋白的表达。结果:未经处理的支气管上皮细胞不表达eotaxin-3,用IL-4刺激细胞24 h后,可见mRNA和蛋白水平的eotaxin-3的明显表达,IL-4的这种诱导作用呈浓度依赖性增强。结论:支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,在炎症介质IL-4的刺激下能表达eotaxin-3,可能是其参与支气管哮喘嗜酸性粒细胞炎症的机制之一。

急性呼吸窘迫综合征患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子-3、白细胞介素-13和-35的表达及意义

目的观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清中嗜酸性粒细胞趋化因子(EOTAXIN)-3、白细胞介素(IL)-13及-35表达,分析其临床价值。方法 78例ARDS患者作为观察组,70例正常成人血清样本作为对照组,检测两组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达,分析三者在不同临床特征中的表达差别。结果两组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达差异有统计学意义。观察组血清中EOTAXIN-3、IL-13和IL-35的表达与病变严重程度及预后密切相关。相关分析显示观察组中EOTAXIN-3和IL-13具有正相关性,IL-13和IL-35具有负相关性。结论 ARDS患者血清中EOTAXIN-3和IL-13高表达、IL-35低表达不仅可以促进病变进展,还能在一定程度上判断病情严重程度和预后。EOTAXIN-3、IL-13和IL-35可能具有一定的协同作用。

曲安奈德鼻喷雾剂对鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞及其趋化因子-2表达的影响

目的观察局部应用曲安奈德鼻喷雾剂对鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况及EOS趋化因子-2(Eotaxin-2)表达的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应方法检测24例鼻息肉患者接受曲安奈德鼻喷雾剂治疗6～8周和未经治疗的鼻息肉组织中Eotaxin-2 mRNA的表达水平(各12例),并观察比较鼻息肉组织苏木精伊红染色(HE)片中EOS的浸润情况。结果①治疗组比未治疗组的鼻息肉组织中Eotaxin-2 mRNA的表达水平显著下降(P<0.01);②治疗组鼻息肉组织HE片中嗜酸性粒细胞浸润情况较未治疗组显著下降(P<0.05)。结论曲安奈德鼻喷雾剂具有减少Eotaxin-2 mRNA的表达,抑制EOS炎性反应的作用。

嗜酸性粒细胞趋化因子-1、类风湿因子和抗环瓜氨酸肽抗体与类风湿关节炎活动度的相关性分析

目的研究嗜酸性粒细胞趋化因子-1(Eotaxin-1)、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体与类风湿关节炎活动度的相关性。方法将淄博矿业集团中心医院2014年12月至2015年12月就诊的早期类风湿关节炎患者58名,同时期非类风湿关节炎患者46名,健康人对照者53名纳入本研究。收集其肿胀关节计数、压痛关节计数和DAS28评分评价RA的活动度。免疫透射比浊法检测其血清RF水平,ELISA检测Eotaxin-1和抗CCP抗体的水平,不同组间因子水平的比较采用方差分析,其水平与临床评分的相关性采用Spearman相关分析。结果 RA组Eotaxin-1、RF和抗CCP抗体的水平分别为(96.02±21.07)pg/m L、(183.42±87.45)U/m L、(119.09±62.30)RU/m L,较非RA组和健康人对照组均高,差异有统计学意义(P<0.01)。RA患者血清Eotaxin-1水平与其肿胀关节计数、压痛关节计数和DAS28评分有显著相关性(P<0.01);抗CCP抗体的水平与其压痛关节计数和DAS28评分有相关性;RF仅与DAS28评分有相关性。结论 RA患者血清Eotaxin-1和抗CCP抗体的水平与患者的疾病活动度相关,有望发展成为监测RA疾病活动度的新的血清学指标。

Eotaxin-3在嗜酸性粒细胞胃肠炎中的表达及糖皮质激素对其表达的影响

目的:探讨嗜酸性粒细胞趋化因子-3(eosinophil chemotactic factor-3,Eotaxin-3)在嗜酸性粒细胞胃肠炎(eosinophilic gastroenteritis,EG)患者中的表达及糖皮质激素对其表达的影响.方法:选取首次确诊的EG患者48例,随机平均分为未治疗组与强的松(Prednisone)治疗组,以同期的24例健康者为对照组,使用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay)分别测定研究对象其血清及组织中Eotaxin-3的表达.结果:EG各组治疗前同对照组相比,血清及组织中Eotaxin-3的表达水平明显增高(P<0.05);未治疗组服用安慰剂前后的血清及组织中Eotaxin-3的表达水平差异无统计学意义,比较治疗组的治疗前后,血清及组织中Eotaxin-3的表达水平均有明显下降(P<0.05);EG各组组织中及血清中Eotaxin-3的表达水平与组织中嗜酸性粒细胞(eosinophil)计数均呈正相关关系(r=0.96、r=0.94,均P<0.01).结论:Eotaxin-3可能参与了EG的病理生理过程,激素治疗EG可能通过抑制Eotaxin-3的表达水平实现的,这对EG的临床诊治有一定的指导意义.血清中Eotaxin-3作为非侵入性指标评价EG的治疗效果有一定的参考价值.

嗜酸性粒细胞趋化因子eotaxin及其受体CCR3与呼吸道变应性炎症

变应性鼻炎（allergic rhinotis-AR）是耳鼻咽喉-头颈外科的常见病之一,虽非重症疾病,却改变了患者的社会生活,严重影响了其生活质量,加重了经济负担,其发病率高,且流行性不断增长,同时也是影响另一种主要呼吸道变应性疾病支气管管哮喘（BA）的重要因素,已成为21世纪严重的全球性健康问题.AR发病机制的研究日益得到重视,随着对呼吸道变应性炎症认识的加深,明确了其主要的病理改变是慢性炎症反应,嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）及肥大细胞等炎性细胞浸润,特别是EOS的浸润程度与病情呈正相关.呼吸道内EOS聚集机制相当复杂,主要包括骨髓中EOS从祖细胞分化成熟,继而向外周循环释放迁移,通过滚动、粘附、渗出及与内皮细胞相互作用,选择性在气道局部组织中大量聚集并被激活,发挥生物学效应.在此过程中有许多细胞因子参与了对EOS的调控,其中趋化因子选择性趋化嗜酸性粒细胞是主要的环节,也是近几年的研究热点.本文对嗜酸性粒细胞趋化因子eotaxin及其受体CCR3（CC chemokine receptor 3）的基本概况及其在呼吸道变应性炎症研究中的意义综述如下.

变应性鼻炎严重度与胸腺调节趋化因子及嗜酸粒细胞趋化因子-2的关系

目的研究变应性鼻炎严重度与胸腺调节趋化因子(TARC)及嗜酸粒细胞趋化因子-2(Eotaxin-2)的关系,总结这两个趋化因子在变应性鼻炎发病机制中所起到的诱因性作用及临床意义。方法采用酶联免疫吸附实验法对33例无变应性鼻炎患者(对照组)及104例变应性鼻炎患者(临床组,其中轻度鼻炎患者52例为临床甲组,中重度鼻炎患者52例为临床乙组)进行TARC及Eotaxin-2的光密度值检测,并进行综合对比。结果临床组血清TARC、Eotaxin-2水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),两组数据数据呈正相关(r=0.970,P<0.01)。临床甲组与临床乙组TARC及Eotaxin-2的水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th2型细胞主导的炎性反应最终引发变应性鼻炎,但变应性鼻炎患者其体内炎性因子水平与变应性鼻炎的严重程度无显著关联。

哮喘患儿血清Clara细胞分泌蛋白、白细胞介素-18、嗜酸粒细胞趋化蛋白检测的意义

目的:探讨哮喘儿童血清Clara细胞分泌蛋白(CCSP)、白细胞介素-18(IL-18)、嗜酸粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)水平与哮喘的关系及其检测意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测39例支气管哮喘患儿急性发作期血清CCSP、IL-18、Eotaxin的水平,选取同期健康儿童37例作为对照组。结果:哮喘组患儿血清CCSP浓度为(4.5±0.6)ng/m L,低于对照组的(12.4±2.6)ng/m L;哮喘组患儿血清IL-18浓度为(786.6±69.4)pg/m L,高于对照组的(96.3±11.9)pg/m L;哮喘组患儿血清Eotaxin浓度为(147.0±43.0)ng/m L,高于对照组的(84.0±32.0)ng/m L,两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:CCSP在哮喘患儿呼吸道炎症损伤、修复、呼吸道重塑过程中可能起保护作用;IL-18、Eotaxin因子参与了气道黏膜损伤的病理过程且与哮喘发作密切相关。

嗜酸粒细胞趋化蛋白-2血清含量对结直肠癌的诊断价值

目的:探讨嗜酸粒细胞趋化蛋白-2(eosinophil chemotactic protein 2,eotaxin-2)的血清含量对结直肠癌的诊断价值。方法:选取2020年1月至2021年2月在江苏大学附属医院胃肠外科就诊的结直肠癌患者50例作为研究对象,另选取同期健康体检者40例作为对照组。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测结直肠癌患者及对照组血清中eotaxin-2的含量。分析血清eotaxin-2含量与结直肠癌患者临床病理参数的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线并分析血清eotaxin-2对结直肠癌的筛查效能。结果:结直肠癌患者血清中eotaxin-2的含量明显高于健康对照组(Z=-3.93,P<0.01);血清eotaxin-2含量与结直肠癌患者淋巴转移、远处转移及TNM分期相关(P均<0.01),而与患者的性别、年龄、肿瘤类型、瘤体大小无明显关系(P均>0.05);血清eotaxin-2诊断结直肠癌的ROC曲线下面积为0.742(95%CI为0.639~0.845,P<0.01),诊断敏感性为68.0%,特异性为77.5%。结论:结直肠癌患者血清eotaxin-2含量显著升高,有望成为结直肠癌诊断的生物学标志物。

规范应用布地奈德气雾剂的哮喘患儿血清神经营养素-3和嗜酸粒细胞水平的变化及意义

目的:分析布地奈德对哮喘患儿血清神经营养素-3(NT-3)和嗜酸粒细胞(EOS)水平的影响,以期为哮喘发病机制及临床治疗的深入研究提供新的候选标志物。方法:选择2017年3月至2018年3月于我院门诊就诊的轻中度慢性持续期哮喘患儿(哮喘组)和年龄性别相匹配的健康体检儿童(对照组)各90例。哮喘组患儿规范应用布地奈德气雾剂(200～400μg/d,每天2次)治疗8周。分别检测哮喘组患儿治疗前(入院24 h内)、治疗后(治疗第8周的最后一天)和对照组儿童的血清IgE、NT-3、EOS水平及哮喘控制测试评分(ACT评分)和肺功能[FEV1占预计值的百分比(FEV1%)]。结果:哮喘组患儿治疗后的ACT评分、FEV1%均较治疗前升高,但均低于对照组(P均<0.05);IgE、EOS、NT-3均较治疗前降低,但均高于对照组(P均<0.05)。结论:规范应用布地奈德气雾剂治疗轻中度慢性持续期哮喘患儿效果显著,其作用机制可能是通过调控血中NT-3、EOS水平减轻哮喘时伴发的炎症。

痰嗜酸粒细胞、25（OH）D3、FeNO检测在ACOS疾病诊断中的应用价值

目的分析诱导痰嗜酸粒细胞、25-羟基维生素D3[25(OH)D3]、呼出气一氧化氮(FeNO)在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(ACOS)疾病诊断中的意义。方法选取陕西省榆林市第一医院2016年1月~2018年5月50例确诊为ACOS患者作为观察组,50例慢性阻塞性肺疾病患者作为对照组。分析各组痰嗜酸粒细胞、25(OH)D3、FeNO水平,并绘制ROC曲线分析各指标诊断价值。结果观察组患者嗜酸粒细胞及25(OH)D3水平均低于对照组(P <0.05),且观察组患者FeNO水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组患者嗜酸粒细胞、25(OH)D3及FeNO阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);且FeNO诊断的灵敏度高于25(OH)D3(P <0.05),且其特异度高于嗜酸粒细胞(P <0.05),ROC曲线下面积高于25(OH)D3(P <0.05)。结论采用痰嗜酸粒细胞、25(OH)D3、FeNO对ACOS疾病进行诊断时具有较高的应用价值,但FeNO诊断价值明显高于痰嗜酸粒细胞和25(OH)D3。

嗜酸粒细胞活化趋化因子及其与某些皮肤病的关系

CC型趋化因子嗜酸粒细胞活化趋化因子因最初认为高度选择的趋化嗜酸粒细胞而命名，包括嗜酸粒细胞活化趋化因子-1、2、3，其主要受体为CCR3。嗜酸粒细胞活化趋化因子和受体结合后参与细胞趋化、炎症和组织损伤。研究显示，它们参与多种皮肤病的发病过程，包括自身免疫性大疱病、特应性皮炎、荨麻疹、色素失禁症和新生儿中毒性红斑。

Galectin-3对哮喘豚鼠模型炎性细胞因子和趋化因子的干预作用

目的 观察哮喘豚鼠模型中白细胞介素- 5 (IL - 5 )、Eotaxin和C- C趋化因子受体3(CCR- 3)在嗜酸粒细胞炎症中的表达和Galectin- 3的干预作用。方法 32只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘组、Galectin- 3干预组和地塞米松(DXM)干预组。卵蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型,Galectin- 3干预组和DXM干预组分别于致敏后第14～16 d激发前1h腹腔注射Galectin- 3(0 .5 m g/ kg)和DXM(1mg/ kg) ,每日1次。观察血、骨髓涂片,肺组织切片细胞总数和嗜酸粒细胞(EOS)比例。肺组织切片用IL - 5、CCR- 3及Eotaxin多克隆抗体染色,光镜下分别计数阳性细胞比例。结果 与正常对照组相比较,哮喘组豚鼠外周血、骨髓、肺组织中EOS计数显著增加(P<0 .0 5 ) ,肺组织中IL- 5、CCR- 3和Eotaxin阳性细胞比例显著升高(P<0 .0 5 ) ,DXM干预后EOS计数、IL- 5、CCR- 3和Eotaxin阳性细胞比例显著降低(P<0 .0 5 ) ,Galectin- 3干预对EOS计数和IL - 5阳性细胞比例的影响与DXM组相当(P>0 .0 5 ) ;Galectin- 3也可下调CCR- 3阳性细胞的表达(P<0 .0 5 ) ,作用弱于DXM(P<0 .0 5 ) ;但Galectin- 3对Eotaxin水平无显著影响(P>0 .0 5 )。结论 哮喘动物模型肺内IL - 5、Eotaxin及其受体CCR- 3表达增强。Galectin- 3可抑制IL -5表达,轻度下调CCR- 3?

2-BP对中性粒细胞趋化性的抑制作用

为研究棕榈酰化对中性粒细胞趋化性的调节作用,利用2-溴棕榈酸(2-bromopalmitate,2-BP)或棕榈酸(palmitate)预处理来源于骨髓的中性粒细胞.采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测中性粒细胞的存活率和中性粒细胞内F-肌动蛋白(F-actin)的生成;通过免疫荧光分析中性粒细胞内F-actin的极化;利用细胞迁移试验检测中性粒细胞的迁移能力;通过免疫印迹的实验方法检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷酸化AKT的表达.结果发现,2-BP预处理显著抑制了中性粒细胞内F-actin极化,且抑制了中性粒细胞向趋化肽N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,f MLP)迁移的能力,而棕榈酸预处理显著促进了中性粒细胞内F-肌动蛋白极化.两者对F-actin生成和AKT的磷酸化均无影响.研究结果表明,2-BP处理可能通过影响F-actin的极化抑制了中性粒细胞向f MLP的趋化活性.

多聚左旋精氨酸对NCI-H292细胞炎症介质的调节

目的研究多聚左旋精氨酸(PLA)对NCI-H292细胞分泌白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-13、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)的影响。方法将NCI-H292细胞分为对照组(培养液)、脂多糖(LPS)组(5μg/ml)、PLA组(Max=40μg/ml)、LPS+PLA组、LPS+PLA+肝素组。采用ELISA法检测各组IL-6、IL-8、IL-13、Eotaxin的水平,并比较各组间的差异。结果 LPS+PLA组IL-6、IL-8、Eotaxin的水平明显高于对照组、LPS组、PLA组(P<0.05),而LPS组、PLA组与对照组比较,IL-6、IL-8、Eotaxin的水平差异无统计学意义(P>0.05);各组IL-13的水平差异无统计学意义(P>0.05);而肝素能够降低LPS+PLA组IL-6、IL-8、Eotaxin的水平(P<0.05)。结论 PLA促进LPS诱导NCI-H292细胞IL-6、IL-8、Eotaxin的表达,但肝素可抑制其表达;而PLA对IL-13的表达没有影响。

白三烯D_4对白细胞介素4诱导嗜酸性粒细胞趋化因子-3在支气管上皮细胞表达的影响

目的研究白三烯D4是否参与调节支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3(eotaxin-3,Eot-3),探讨白三烯和支气管上皮细胞在气道变态反应性炎症中的作用。方法用白三烯D4预处理支气管上皮细胞1h,然后用白细胞介素-4(IL-4)刺激细胞24h,RT-PCR法检测Eot-3在mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中Eot-3蛋白的表达。结果未经处理的支气管上皮细胞仅表达微量的Eot-3,用IL-4刺激细胞并培养24h后,在mRAN和蛋白水平的Eot-3表达明显增强,白三烯D4预处理细胞1h,可以使IL-4的这种诱导作用加强。结论支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,在炎症介质的刺激下能表达Eot-3,参与支气管炎症的产生。白三烯D4通过上调IL-4诱导Eot-3在上皮细胞的表达可能是其参与支气管哮喘嗜酸性粒细胞炎症的机制之一。