浓缩苹果汁中嗜酸耐热菌的分离鉴定及菌群特性研究

为了解和控制浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,从胀袋浓缩苹果汁中筛选、分离、纯化得到了1株嗜酸耐热菌,并进行菌种鉴定及特性研究。通过菌落形态、显微形态和16S rDNA基因测序以及建立系统发育树分析,初步确定该分离菌与Aiyclobacillus acidoterrestris ATCC 49025标准菌同源度>99.51%,确定该分离菌为酸土脂环酸芽孢杆菌(A.acidoterrestris)。通过热和酸碱处理考察该菌株的热稳定性和酸碱稳定性,在单因素试验的基础上进行正交试验。结果表明,在最优灭菌参数为pH 6.0,105℃热处理20 min的条件下,平板生长菌落数为0,说明该提取条件具有较好的合理性和可靠性,为浓缩苹果汁中嗜酸耐热菌的控制提供了理论依据。

陕西省果库中嗜酸耐热菌的分离鉴定

为探明陕西省果库中嗜酸耐热菌的分布情况,采用酸化的AAM培养基对陕西果库中的空气和苹果中的嗜酸耐热菌进行分离纯化,与参比菌株A.acidoterrestris DSM3922T进行细胞形态、菌落形态和生长条件、生理生化特征的比较分析,并以16S rDNA序列分析构建系统发育树,明确了8株分离菌的遗传学位置。分离株LC-4与标准菌的形态和生理生化特性有很大的相似性,16S rDNA序列分析表明LC-4与标准菌的同源性达99%,可判定为酸土脂环酸芽孢杆菌,其他7株属于芽孢杆菌。结果表明嗜酸耐热菌在果库中确有分布,可能对果汁质量造成威胁,需要加强控制。

浓缩苹果汁中嗜酸耐热菌的分离及检测条件探讨

目的 对浓缩苹果汁中嗜酸耐热菌进行分离培养,研究其生理特性和最佳检测方法。方法 采用L16 (45)正交试验,对培养基种类、pH值、热休克方式、果汁稀释度四个影响浓缩苹果汁中嗜酸耐热菌检测的因素进行了研究,以菌落数多少进行综合评分,优选最佳检测方法。结果 分离出的嗜酸耐热菌不是单一的一种菌,而表现为多形态。检测该菌的最佳方法:70°Brix浓缩苹果汁样品经10 倍稀释,80 ℃热处理10 min,室温水自然冷却至50 ℃,接种于pH值为3.5的k琼脂培养基,置45℃培养3 d。结论 该方法可较大程度地提高苹果汁中嗜酸耐热菌检测的灵敏度。

苹果浓缩汁中嗜酸耐热菌的分离与鉴定

为了解和控制浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,采用酸化的凯氏培养基对苹果浓缩汁中的耐热菌进行分离、培养和鉴定,并与标准菌株Aliyclobacillus acidoterrestris DSM3922进行了比较分析。结果表明,分离到的2株污染菌均可以在21°C～55°C温度范围及2.4～6.2的pH值范围内生长,符合脂环酸芽胞杆菌属嗜酸耐热的特点。经与标准菌株的细胞、菌落形态观察、生长条件和生理生化反应等方面的比较表明,2株分离菌与标准菌株Aliyclobacillus acidoterrestris DSM3922有明显的相似特征。

浓缩苹果汁生产环境中嗜酸耐热菌的分离与初步鉴定

为了解和控制我国浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,对浓缩苹果汁生产过程主要工段和生产车间的空气及用水,进行了采样和分离鉴定,并与标准菌株A.acidoterrestris和已知分离菌珠进行了比较分析。结果表明,共分离得到了3株污染浓缩苹果汁的嗜酸耐热菌;在耐热、耐酸性检验中,这3株菌均可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点。与标准菌株和已知分离菌株细胞、菌落形态观察、生长条件和生理生化反应等方面的比较表明,这3株菌与标准菌株有较大的相似性,与标准菌应为同属不同种。

苹果浓缩汁中嗜酸耐热菌多克隆抗体的制备及纯化

从苹果浓缩汁中分离得到嗜酸耐热菌,首次以耐热菌繁殖体及芽胞体分别作为免疫抗原,采用耳静脉注射及肌肉注射2种途径,对8只日本大耳白兔进行免疫,分别获得多克隆抗体。使用试管凝集法分别检测得到的抗体效价及其特异性,并采用饱和硫酸铵沉淀法及DEAE离子交换法纯化多克隆抗体,最终经SDS-PAGE电泳进行鉴定。以耳静脉注射和肌肉注射为免疫途径,制备得到的抗体效价分别达到1∶2560和1∶640。耳静脉注射得到的抗体效价高且免疫周期短,因此,耳静脉注射途径为最佳免疫途径;抗体特异性及纯化效果好。首次建立了苹果浓缩汁中耐热菌的家兔免疫程序,获得了多克隆抗体。

脂肪酶和酯酶指纹分析在嗜酸耐热菌快速鉴定中的应用

【目的】采用反相高效液相色谱建立嗜酸耐热菌的脂肪酶和酯酶指纹图谱,为建立基于脂肪酶和酯酶指纹分析的嗜酸耐热菌快速鉴定方法提供参考。【方法】将5个脂肪酶和酯酶底物直接与嗜酸耐热菌反应,通过反相高效液相色谱检测得到了9株嗜酸耐热菌的脂肪酶和酯酶指纹色谱图,并对色谱数据进行系统聚类分析。【结果】所得脂肪酶和酯酶指纹图谱能将脂环酸芽孢杆菌和芽孢杆菌明显分为2个类群,且同一属的2个不同种的细菌也能得到正确归类。【结论】脂肪酶和酯酶指纹分析能够用于嗜酸耐热菌的快速鉴别,且简便快速、重现性好、经济成本低,具有广阔的应用前景。

腐烂苹果中嗜酸耐热菌(Alicyclobacillus acidoterrestris)的分离鉴定及生长特性的初步研究

从金帅腐烂苹果中分离嗜酸耐热菌,进行形态学特征、生理生化特性、16S rDNA区鉴定,研究了温度、pH值对其生长的影响及芽孢耐热性。结果表明:分离得到了2株嗜酸耐热菌A-1与A-2,均为脂环酸芽孢杆菌属的酸土脂环酸芽孢杆菌,适生长温度均为45℃,适生长pH值分别为4.0、3.5;A-1、A-2芽孢的D90℃分别为11.90 min和13.70min,A-2表现出更强的耐热性。

欧姆加热对嗜酸耐热菌的电穿孔效应

探讨了欧姆加热对嗜酸耐热菌的杀灭作用机理。用自行设计的批式欧姆加热装置,对苹果汁中的嗜酸耐热菌进行处理后,利用扫描电镜观察其细胞壁膜结构的变化,利用电导率仪和紫外吸收分光光度计测定菌悬液的成分变化。结果表明:通过环境扫描电镜可观察到嗜酸耐热菌的表面出现凹陷和破损,电导率仪和紫外吸收分光光度计测定细胞内容物的溢出,可以推断出欧姆加热造成了嗜酸耐热菌的"电穿孔"。

1株源于苹果汁的嗜酸耐热菌的生长代谢动力学研究

【目的】建立源于苹果汁的嗜酸耐热菌的生物量、葡萄糖消耗量和产物代谢动力学模型。【方法】以苹果汁中分离得到的1株嗜酸耐热菌和标准嗜酸耐热菌为试验菌株,采用优化的AAM培养基,对两者细胞生长、基质消耗及产物代谢动力学进行研究。【结果】①以Logistic方程建立了嗜酸耐热菌在优化AAM培养基中的生长动力学模型,标准菌和分离菌生物量模型的R2分别为0.969 4和0.991 5;②顶空固相微萃取愈创木酚的条件为:DVB/CAR/PDMS萃取头,添加1.8 g Na2SO4在55℃萃取30 min;③Luedeking-Piret方程可较好地反映嗜酸耐热菌在优化AAM培养基中的基质消耗和产物生成动力学模型,其中标准菌和分离菌葡萄糖消耗量模型的R2分别为0.995 8和0.941 2,愈创木酚生成量模型的R2分别为0.991 4和0.956 5。【结论】建立了源于苹果汁的分离嗜酸耐热菌与标准嗜酸耐热菌株菌体生长、基质消耗和产物形成的数学模型;与标准嗜酸耐热菌相比,分离得到的嗜酸耐热菌的对数期相对较短,产愈创木酚能力相对较弱。

陕西猕猴桃汁嗜酸耐热菌污染能力评测与多样性分析

以分离自陕西成熟猕猴桃的6株嗜酸耐热菌为研究对象,对这6株分离菌以及4株相应的标准菌株进行了猕猴桃汁污染能力评估,并对分离菌与标准菌株的常规生理生化指标进行了测定和对比分析。通过气质联用对不同菌株特征污染代谢产物形成能力检测、绘制热死亡曲线进行的抗热性差异检测,以及通过API鉴定系统进行碳源代谢谱分析和通过基因组DNA杂交实验复性速率测定,对嗜酸耐热菌群菌株的生物多样性进行评测。结果表明,分离菌株产污染物愈创木酚量可达10.56～34.74μg/L,在猕猴桃汁中D90℃值达到27.1～34.2 min,z值达到12.14～13.66℃;API实验结果表明,分离菌株与标准菌有3～19项糖代谢结果差异,与文献报道相应菌种不同菌株中有7～22项糖代谢差异;6株分离菌与标准菌DNA杂交率在74.75%～104.79%之间。实验结果表明：分离自陕西地产猕猴桃果汁的6株本土脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus）具有潜在污染猕猴桃果汁的能力,并具有一定的生物多样性。

欧姆加热对嗜酸耐热菌的杀灭作用研究

本实验探讨了欧姆加热对嗜酸耐热菌的杀灭作用。利用自行设计的批式欧姆加热装置,对苹果汁中嗜酸耐热菌进行处理,分析了欧姆加热的电压、pH值、时间及加热体积等对杀菌效果的影响,并利用扫描电镜观察微生物细胞壁膜结构的变化,利用电导率仪和紫外吸收分光光度计测定菌悬液的成分变化。结果表明欧姆加热可以有效的杀灭苹果汁中的嗜酸耐热菌,杀菌率随电压、加热体积的升高而增大,随pH值的降低而增大。通过环境扫描电镜可观察到嗜酸耐热菌的表面出现凹陷和破损,电导率仪和紫外吸收分光光度计测定细胞内容物的溢出,据此推测欧姆加热造成了嗜酸耐热菌的"电穿孔"。

果汁中的嗜酸耐热菌

嗜酸耐热菌可污染浓缩果汁和果汁饮料 ,本文对该菌的来源、生长特点、危害、耐热性进行了分析 ,阐述了嗜酸耐热菌的分离计数方法 。

利用顶空SPME-GC-MS联用技术检测苹果汁中嗜酸耐热菌代谢产物的研究

以苹果汁中分离获得的1株嗜酸耐热菌和标准嗜酸耐热菌为材料,采用优化的AAM培养基进行培养,用顶空SPME-GC-MS联用技术对其代谢产物进行了研究。结果表明:①嗜酸耐热菌的主要代谢产物为愈创木酚和2,6-二溴苯酚;②单因素分析发现愈创木酚含量远远高于2,6-二溴苯酚,可以作为整个苹果汁中嗜酸耐热菌污染程度和风味败坏的衡量指标;③正交试验分析得到顶空固相微萃取法萃取愈创木酚的条件为DVB/CAR/PDMS萃取头,添加1.8gNa2SO4在温度55℃下萃取20min。

浓缩苹果汁车间空气中嗜酸耐热菌的分离鉴定研究

对浓缩苹果汁生产车间空气进行采样分析,分离得到了1株污染浓缩苹果汁的嗜酸耐热菌。在耐热、耐酸性检验中,这株菌可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点。再通过与标准菌A.acidoterrestris进行细胞、菌落形态观察、生长条件、生理生化特征和糖、醇利用等方面的比较,结果表明这株菌与标准菌各方面都表现出较大的相似性,故与标准菌应为同属不同种。

浓缩果汁生产厂中嗜酸耐热菌的跟踪检测

研究探索用美国KRUEGER实验室分析检测嗜酸耐热菌方法 ,探讨了不同厂家的化学试剂对检测结果的影响。采取改进了的双膜过滤测定法对浓缩果汁生产厂中不同地点的空气、水质取样检测 ,该法加大了取样量 ,在常量取样未能检出的取样点检出了嗜酸耐热菌 ,弄清了该菌在浓缩果汁生产厂中的污染途径 。

果汁中嗜酸耐热菌的特性 控制与检测

嗜酸耐热菌,即环脂芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp).,能够经受果汁加工中的高温瞬时灭菌过程,并能在酸性果汁中生长,从而导致果汁风味的劣变和腐败。嗜酸耐热菌是果汁加工中的主要目标控制微生物,为果汁的主要安全性指标之一。系统阐述了果汁中嗜酸耐热菌的生长与耐热特性,危害与污染途径;并在此基础上,全面介绍和分析了嗜酸耐热菌的各种控制与检测方法。其中,非热灭菌技术对嗜酸耐热菌的控制,以及嗜酸耐热菌的特异性快速检测技术,是当前工业界和学术界共同关注的热点。

柑橘汁中嗜酸耐热菌的分离、鉴定以及单宁酸对其抑菌作用研究

采用酸化的凯氏培养基对柑橘中的嗜酸耐热菌进行分离、培养纯化和鉴定并与标准菌株进行对比,再用不同浓度的单宁酸对柑橘中的嗜酸耐热菌进行抑菌试验,确定最低的抑菌浓度。结果表明,分离得到的两株可疑菌可在25~55℃温度范围以及2.4~6.0的p H值范围,符合嗜酸耐热菌的特点。与标准菌株在菌落形态、显微形态、生理生化特性以及16S r DNA等方面进行比较表明,2株分离菌与标准菌株有明显的相似性。抑菌试验表明,单宁酸对嗜酸耐热菌有一定的抑菌作用,单宁酸的最低抑菌浓度为1.25 mg/m L,分离菌与标准菌表现高度相似性。

嗜酸耐热菌检测技术和控制方法的研究进展

嗜酸耐热菌是存在并繁殖于浓缩果汁中的主要目标微生物,可导致果汁腐败变质,成为食品工业所面临非常棘手的问题,是果汁的主要安全性指标之一。本文主要综述了嗜酸耐热菌对果汁安全性带来的危害,在此基础上全面介绍嗜酸耐热菌的各种控制和检测方法,快速检测技术是当前研究的热点领域。