动态心电图参数、微小RNA-187-5p、嘌呤能离子通道型受体7与急性心肌梗死患者并发主要不良心血管事件的相关性

目的分析动态心电图参数、微小RNA-187-5p(miR-187-5p)、嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)与急性心肌梗死(AMI)患者并发主要不良心血管事件(MACE)的相关性。方法选取2020年9月至2022年9月河北北方学院附属第一医院收治的142例AMI患者为观察组,同时选取在河北北方学院附属第一医院进行体检的130例健康志愿者为对照组。根据是否并发MACE将观察组患者分为无MACE组(未并发MACE,96例)和MACE组(并发MACE,46例)。比较分析对照组与观察组患者的动态心电图参数、miR-187-5p、P2X7R以及MACE组与无MACE组患者的临床特征。采用多因素logistic回归方法分析AMI患者并发MACE的影响因素。结果观察组患者的QT离散度(QTd)、校正QT间期离散度、震荡初始、P2X7R均高于对照组,NN间期标准差(SDNN)、震荡斜率、miR-187-5p均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MACE组患者的合并高血压比例、QTd、P2X7R均高于无MACE组,SDNN、miR-187-5p均低于无MACE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,QTd、P2X7R均为AMI患者并发MACE的独立危险因素(P<0.05),SDNN、miR-187-5p均为AMI患者并发MACE的独立保护因素(P<0.05)。结论AMI患者的QTd、P2X7R、SDNN、miR-187-5p均与MACE的发生显著相关。

P2X嘌呤能受体通道蛋白参与实体瘤进展的研究

腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是生物体内最普遍存在的供能物质,亦是一种重要的信号分子,肿瘤微环境中ATP的表达水平显著上调。嘌呤能受体离子通道P2X广泛分布多种组织内,微环境中ATP特异性激活P2X受体,调控门控离子通道开放,进而影响下游信号传导参与机体生理活动。而异常嘌呤能信号在肿瘤恶性进展中也发挥着重要作用。本文就P2X受体蛋白家族的结构、表达与功能特点,以及P2X受体家族参与多种实体瘤进展的机制和靶向P2X家族治疗肿瘤的研究进行了综述,以期丰富嘌呤能信号相关基础研究资料,为肿瘤临床治疗靶点的开发提供新思路和策略。

嘌呤能信号在少突胶质细胞发育和髓鞘修复中的作用及机制研究进展

少突胶质细胞(OL)是发育中的中枢神经系统(central nervous system,CNS)髓鞘形成和髓鞘损伤再生的关键;ATP不仅是一种能量载体,也作为一个重要的信号分子参与细胞之间的交流,其嘌呤能受体亚型广泛存在于神经元和神经胶质细胞中,主要包括接受腺苷信号的P1受体和接受ATP/ADP/UTP信号的P2受体。不同亚型的嘌呤能受体在CNS中不同部位的表达及其在生理病理状态下发挥的具体作用和机制也各有不同,本文对近年来关于嘌呤能受体在OL发育及髓鞘形成与修复中作用和机制研究的新进展进行综述,该方面的研究对于了解嘌呤能信号在诸多脱髓鞘性疾病以及髓鞘发育障碍性疾病中的作用、发掘相应的潜在治疗靶点具有重要的意义。

基于嘌呤能信号转导途径探讨电针治疗抑郁大鼠的中枢机制

目的基于嘌呤能信号转导途径理论,观察电针治疗抑郁大鼠的中枢机制。方法选取SPF级SD大鼠150只,雌雄各半,查随机数字表将大鼠分为空白对照组、模型组、丙戊酸钠组、氟西汀组和针刺组,每组30只。除对照组外,其余4组采用慢性温和不可预见性应激刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立大鼠抑郁模型,针刺组、丙戊酸钠组和氟西汀组在造模的同时进行治疗,实验全程共28 d。针刺组选取四神聪、内关、三阴交穴;丙戊酸钠组灌胃给予丙戊酸钠(300 mg·kg-1)药液,1次/d;氟西汀组灌胃给予氟西汀(1.8 mg·kg-1)药液,1次/d。采用糖水消耗实验、旷场实验、强迫游泳实验对大鼠进行行为学观察。之后选取10只大鼠采用免疫组化法结合图像分析技术检测海马脑区P2X7、A1、A2A阳性神经元的表达;另外10只采用Western blot法观察三磷酸二磷酸水解酶(E-NTPD/CD39)、核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶(NPPs)、5'-核苷酸酶(e5NT/CD73)、腺苷脱氨酶(ADA)和黄嘌呤氧化酶(XO)蛋白表达水平;其余10只采用脑部微透析技术收集脑组织液样品,然后用高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠脑组织样品中腺苷、三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)以及尿酸的含量。结果与对照组相比,模型组大鼠体质量、糖水消耗、旷场实验的移动距离与平均速度明显减少,静止时间明显增加,强迫游泳实验中模型组的攀爬时间和游泳时间明显减少(P<0.05);而电针组、氟西汀组、丙戊酸钠组均有所好转。与对照组相比,模型组大鼠脑组织中P2X7、CD73、CD39、A2A受体细胞层数变多且较厚,排列紧密,结构清晰;ADA、腺苷激酶(ADK)、A1细胞较少,层数变薄,神经元排列紊乱、疏松,甚至有神经元缺失(P<0.05);电针组、氟西汀组与丙戊酸钠组细胞变化程度相对较轻。与对照组相比,模型组大鼠海马组织中P2X7明显升高,ATP相对减少(P<0.05);而电针组、氟西汀组、丙戊酸钠组二者均有所缓解。模型组大鼠海马组织中A1、A2A、CD39、CD73、ENPP1、ADA、ENT1、ENT2相较于对照组均有所增高,而ADK则有所降低(P<0.05)。模型组大鼠海马中AMP、腺苷(Adenosine)、肌苷(Inosine)、γ-氨基丁酸(GABA)相较于对照组均有所降低,而谷氨酸(Glu)则有所升高。结论电针可明显改善抑郁症(major depressive disorder,MDD)模型大鼠的抑郁行为情况,其机制可能是下调P2X7的表达来减少神经内炎症因子的释放,同时上调腺苷(ADO)的浓度来增强A1受体的表达,从而抑制Ca2+内流,降低神经兴奋性中毒,进而减少细胞损伤。

嘌呤能配体门控离子通道7变异体在肿瘤中的研究进展

嘌呤能配体门控离子通道7(purinergic ligand-gated ion channel 7,P2X7)是一类广泛存在于生物体内的腺苷三磷酸配体门控离子通道。在肿瘤微环境中,大量腺苷三磷酸因细胞凋亡而释放,P2X7被持续激活,进而进一步调控细胞增殖和凋亡。人P2X7基因具有高度多态性,现已发现其存在多种剪接变异体。本文主要概述P2X7变异体在肿瘤细胞生长和凋亡中的作用机制,为研发新型抗肿瘤靶向药物提供依据。

嘌呤能受体P2X3在急性牙髓炎大鼠疼痛中的作用

目的:探讨实验诱导的急性牙髓炎动物模型中,嘌呤能受体P2X3参与调控牙髓炎大鼠疼痛中的作用。方法:本实验通过牙髓暴露和脂多糖的应用在Wistar大鼠中诱导急性牙髓炎。SHAM组大鼠仅接受相同的麻醉过程,但没有任何其他干预措施。牙髓炎组大鼠分别于术后第1天和第3天,记录大鼠的擦面行为次数和测量头部缩回反射阈值,评估每组大鼠牙髓炎引起的疼痛。然后对大鼠实施安乐死,对三叉神经节、脑干的三叉神经脊束核尾端亚核和丘脑的腹后中核进行观察分析。另取两组牙髓炎大鼠分别给与P2X3受体特异性拮抗剂A-317491,于术后第1天和第3天,再次评估大鼠的擦面行为次数和测量头部缩回反射阈值。结果:在急性牙髓炎后的第1天和第3天,均发现了严重牙髓炎症的组织学证据,并且大鼠的疼痛样行为显着增加(P<0.05)。急性牙髓炎在术后第1天和第3天均诱导了左侧三叉神经节中P2X3表达上调,左侧三叉神经节中的P2X3免疫反应性显著高于对照组和右侧(P<0.05)。在双侧三叉神经脊束核中,与SHAM组相比,P2X3在术后第1天和第3天表达均没有变化(P>0.05)。在右侧丘脑中,与SHAM组比较,P2X3在术后第3天表达增加(P<0.05),在术后第1天表达没有变化;在左侧丘脑中,P2X3在术后第1天和第3天表达均没有变化(P>0.05);拮抗三叉神经节中的P2X3表达能够减轻大鼠的伤害性反应。结论:在急性牙髓炎症过程中,P2X3受体参与了外周神经系统的伤害性信号处理,拮抗三叉神经节中的P2X3能够减轻大鼠的伤害性反应。牙髓炎没有引起三叉神经脊束中P2X3表达上调,但在右侧丘脑的腹后中核中P2X3的表达有所增加,需要进一步的研究来确定是否有其他的信号通路介导牙髓炎的疼痛信号传导。

嘌呤能离子通道型受体7介导骨质疏松症机制的研究进展

骨质疏松症是因骨吸收和骨重建的偶联出现缺陷,导致人体的钙磷代谢不平衡、骨密度逐渐减少的全身代谢性疾病。嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)广泛表达在各种骨细胞上,用于调节骨骼系统连续的吸收和重建。P2X7R激活与破骨细胞的形成和再吸收功能及成骨细胞的分化有关,还可通过在炎症反应期间刺激免疫细胞来影响骨质流失。本文回顾了近年来P2X7R参与骨质疏松症的相关研究进展,为骨质疏松症的发病机制及新型药物研发提供依据。

基于文献计量的嘌呤能受体与泌尿系统疾病相关性的可视化分析

目的基于文献计量学方法分析嘌呤能受体与泌尿系统疾病相关性的研究热点、前沿与发展趋势。方法检索2000年1月1日至2021年12月31日Web of Science核心合集数据库中嘌呤能受体与泌尿系统疾病相关性文献,用Excel软件进行数据分析,应用CiteSpace 5.8R3和VOSviewer进行可视化处理。结果最终共纳入文献1019篇,其中2013年发文量最多,发文量最多的作者是Burnstock G,国外发文量最大的研究机构是University College London,该领域研究最多的国家是美国。发文量排名第一的期刊是Am J Physiol Renal Physiol,其次是Brit J Pharmacol、J Biol Chem。被引频次排名前10位的期刊以美国的期刊居多,其中大部分期刊在中国科学院/期刊引文报告分区中排名靠前,包括世界顶级期刊Nature以及泌尿研究领域的专业杂志Neurourol Urodynam、J Urology等,研究热点关键词是ATP。结论嘌呤能受体与泌尿系统疾病相关性研究文献近年被引频次呈上升趋势,中国在该领域的研究也在不断增多,突现词炎症、膀胱过度活化症、急性肾损伤可能是未来的研究趋势。

嘌呤能受体与胶质瘤异质性及免疫浸润的关系

目的探索7种嘌呤能受体家族分子(P2RX1~P2RX7)与多形性胶质母细胞瘤(GBM)和低级别胶质瘤(LGG)患者的预后及免疫浸润的相关关系。方法下载癌症基因图谱(TCGA)和基因型组织表达(GTEx)数据库中P2RXs表达谱数据及临床信息,分析P2RXs在GBM或LGG中的表达模式。利用LASSO回归法构建预测模型,根据风险值对患者进行分组并进行生存分析。利用单因素及多因素Cox回归分析评估P2RXs的表达及临床因素与预后的关系,并绘制列线图。利用Spearman相关性检验分析P2RXs与肿瘤异质性参数、干性指数、免疫检查点等的相关性。利用TIMER、ESTIMATE和xCell算法分析P2RXs与免疫成分、基质成分等的相关性。利用R软件进行差异基因的富集分析。结果在胶质瘤中,P2RX1和P2RX5的表达显著下调,P2RX3、P2RX4和P2RX7的表达显著上调(P<0.05)。LASSO回归分析显示P2RX1、P2RX4和P2RX6与GBM和LGG患者预后均有关。列线图显示P2RX4、P2RX6和年龄均可作为GBM和LGG患者独立的预后因素。高表达P2RX1和P2RX4的胶质瘤患者预后不良。P2RX4的表达不仅与多个肿瘤干性评分有关,还与免疫细胞、肿瘤基质成分、巨噬细胞调控、PD-1、PD-L1、ITGB2等多种免疫检查点有关。P2RX4差异基因主要参与淋巴细胞激活、分化、增殖等过程。结论P2RX家族多个分子尤其是P2RX4可为胶质瘤预后的评估提供新思路,有望成为胶质瘤免疫治疗的靶点。

嘌呤能受体P2X_4结构的研究进展

近年研究发现,嘌呤能受体P2X4对生物体内的多种重要生命活动起到调节作用。ATP-门控阳离子通道受体P2X4是P2X受体家族中的一员,其主要表达在哺乳动物组织中。P2X4受体的结构分为3个部分,即胞外结构域、跨膜区和胞内N,C端。目前已经解出分辨率高达2.8的担尼鱼(斑马鱼)P2X4(zfP2X4)受体的晶体结构,为后续P2X4结构的研究奠定了基础,也为P2X4受体机制的研究提供了理论依据。本文对P2X4受体的结构进行综述,希望能够为新药的设计与发现提供理论依据。

嘌呤能系统在高血压病中的作用及机制研究进展

在全球所有心血管疾病中,高血压病是发病率和死亡率的主要原因。现已有研究发现高血压病与嘌呤能系统关系密切,其作用机制复杂。嘌呤能系统可通过交感神经、脑干神经元、颈动脉体、血管内皮细胞、免疫系统、肾素-血管紧张素系统、钠排泄和肾脏自身调节等多种途径在高血压发生过程中发挥重要作用。提示了嘌呤能化合物具有治疗高血压病的作用。

嘌呤能2X7受体-核苷酸结合寡聚化结构域样受体3信号通路活化在慢性胰腺炎纤维化中的作用

目的:探讨嘌呤能2X7受体(P2X7R)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体信号通路在小鼠慢性胰腺炎模型胰腺纤维化进程中的作用。方法:通过反复腹腔注射雨蛙素造成小鼠慢性胰腺炎模型,分别用P2X7R拮抗剂氧化三磷酸腺苷(Ox ATP)和亮蓝G(BBG)进行干预,处死后观察胰腺组织病理学变化,并用Western Blot及RT-PCR法对P2X7R、NLRP3和半胱天冬酶1(caspase-1)的含量进行检测,比较各组的变化。结果:正常对照组的P2X7R、NLRP3和caspase-1的蛋白表达水平分别为0.85±0.18,、0.93±0.16和1.02±0.06,模型组分别是1.55±0.22、2.00±0.35和2.23±0.56,二组比较,均有差异。OxATP组分别为1.02±0.26、1.01±0.09和0.95±0.04,BBG组分别为0.97±0.17、0.96±0.14和2.07±0.33,与模型组相比,无论是OxATP组还是BBG组,P2X7R、NLRP3和caspase-1在胰腺组织中的表达均显著降低(P<0.05)。病理结果显示,模型组出现了明显的胰腺纤维化,而OxATP组和BBG组的慢性胰腺炎和纤维化指标明显改善。结论:OxATP和BBG能够降低慢性胰腺炎模型的慢性炎症和纤维化程度,其机制与抑制P2X7R-NLRP3-caspase1信号通路的活化有关。

5-单硝酸异山梨酯对兔离体隐动脉交感嘌呤能缩血管反应的影响

采用兔离体隐动脉血管环张力实验及电场刺激诱发交感嘌呤能血管收缩实验,观察5-单硝酸异山梨酯(isosorbide-5-mononitrate,ISMN)对交感嘌呤能缩血管反应的作用,并分析其作用机制。结果表明,电场刺激(电压15 V,波宽1 ms,时程1 s)诱发兔离体隐动脉(去内皮)产生血管收缩反应。该收缩反应呈频率(2~16 Hz)依赖性,可被0.1μmol.L-1河豚毒素(tetrodotoxin)完全抑制。α1受体阻断药哌唑嗪(1μmol.L-1)对2~8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应无影响。P2X1受体激动药α,β-亚甲基ATP(3μmol.L-1)脱敏P2X1受体,同时联合应用哌唑嗪(1μmol.L-1)完全抑制电刺激诱发的血管收缩反应。采用一个标本一个浓度给药时,ISMN(0.1 mmol.L-1)显著抑制8 Hz电刺激诱发的血管收缩反应,在0.3及1.0 mmol.L-1时ISMN显著抑制各频率电刺激诱发的血管收缩反应;1.0 mmol.L-1ISMN对电刺激诱发的血管收缩反应的抑制率分别为46%(2 Hz)、47%(4 Hz)、34%(8 Hz)和22%(16 Hz)。ISMN(0.3及1.0 mmol.L-1)对外源性去甲肾上腺素(0.01~100μmol.L-1)或腺苷三磷酸(1 mmol.L-1)诱发的血管收缩反应无影响。以上结果提示,ISMN显著抑制电场刺激诱发的交感嘌呤能血管收缩反应,其作用机制可能是ISMN作用于交感神经末梢突触前膜抑制嘌呤能神经递质产生的血管收缩反应。

嘌呤能信号在炎症性肠病中的作用研究

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一种慢性、复发性、炎症性肠道疾病.近年来其发病率持续上升,到目前为止, IBD的确切发病原因仍未知.嘌呤能信号广泛参与机体的炎症免疫反应,与疼痛的发生也密切相关.越来越多的证据显示,嘌呤信号及其受体系统在IBD中占有重要地位,广泛参与了IBD的发生发展,也为其治疗提供了新的思路.本文就嘌呤能信号在IBD中的作用及相关靶向治疗药物发展进行了综述,以期为相关研究提供线索.

嘌呤能信号通路在肺动脉高压中的作用

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是以肺血管阻力进行性升高及右心衰竭为主要表现的临床病理综合征,发病率、致残率及死亡率高,严重威胁居民健康。诊断标准为海平面、静息状态下、经右心导管检查测定平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)≥25 mmHg(1 mmHg=0.133kPa)[1]。临床上PH分为5大类:动脉性PH(pulmonary arterial hypertension,PAH);左心疾病所致PH;肺部疾病和(或)低氧所致PH;慢性血栓栓塞性PH和(或)其他肺动脉阻塞性病变所致PH;未明和(或)多因素所致PH。病理特征主要表现为肺动脉内膜增殖、中膜肥厚及持续的收缩、外膜纤维化及炎症浸润,近年发现肺静脉血管重塑也参与PH发生[1]。

Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3和嘌呤能离子通道型受体7在急性痛风性关节炎发病中的作用研究进展

Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(Nod-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)和嘌呤能离子通道型受体7(purinergic P2X7 receptor,P2X7R)是近年发现的炎症小体,在多种疾病的发病过程中发挥着重要作用。为了探讨急性痛风性关节炎的发病机制,本文对NLRP3及其在急性痛风性关节炎发病中的作用、P2X7R及其在急性痛风性关节炎发病中的作用、NLRP3和P2X7R的关系以及二者在急性痛风性关节炎发病中的协同作用进行了综述。

大鼠嘌呤能受体P2X_4稳定表达细胞系的建立及功能的验证

目的建立大鼠嘌呤能受体P2X4(rP2X4)稳定表达细胞系,并对细胞系功能进行验证。方法构建绿色荧光蛋白rP2X4受体(pEGFP-N1-rP2X4)重组质粒,采用脂质体转染法将pEGFP-N1-rP2X4转染于人胚肾(HEK293)细胞,采用抗生素G418(1 g·L-1)压力筛选,qRT-PCR和Western蛋白质印迹法验证rP2X4受体的表达量。全细胞膜片钳技术检测稳定表达的rP2X4受体Ca2+电流。结果测序结果表明,pEGFP-N1-rP2X4重组质粒序列完全正确;采用脂质体法稳定转染HEK293细胞后,qRT-PCR和Western蛋白质印迹法结果表明,HEK293-pEGFP-N1-rP2X4稳定转染细胞系在连续传代25代后(1,3,5,10,15,20和25代)rP2X4受体均保持稳定表达;全细胞电流记录实验表明,嘌呤受体激动剂ATP 3.0μmol·L-1能激活HEK293-pEGFP-N1-rP2X4细胞上表达的rP2X4受体并产生特异性激活电流,且该电流能被非选择性P2X4受体拮抗剂三硝基苯酚(TNP)-ATP(30.0μmol·L-1)阻断。结论 HEK293-pEGFP-N1-rP2X4稳定转染细胞系上rP2X4受体表达稳定,激活后能产生特异性激活电流。该细胞系可用于rP2X4受体的药物筛选及其机制研究。

P2z/P2x7嘌呤能受体的研究进展

P2受体是许多种类细胞共有的一类膜受体,能选择性地与胞外ATP(ATPe)结合,产生多种生物效应.P2受体不同于P1受体,因后者也是一类嘌呤能受体,但仅选择性识别腺嘌呤,现称为A1、A2受体.包括ATP在内的多种天然或合成的核苷酸对不同亚型的P2受体有着不同的激活能力,因此根据药理学性质将P2受体分为五类:P2x、P2y、P2u、P2z和P2t,其中前四种是ATP受体,而P2t则是血小板(PLT)表达的ADP受体[1].P2z受体有一个其他P2受体不具备的药理学特性:苯甲酰苯甲酸三磷酸腺苷(BzATP)对它的激活能力很强.

嘌呤能2X7受体与抑郁症的相关研究进展

抑郁症(major depression disorder,MDD)在全球疾病负担榜单中占据前位,严重影响MDD患者的健康和生活质量。近年来MDD机制研究对神经免疫炎症比较关注,临床研究发现MDD患者循环血多种炎症因子的表达上调,嘌呤能2X7受体(Purinergic 2X7 receptor,P2X7R)激活是调控这些炎症因子的上游信号之一;遗传学研究也证实P2X7R的单个苷酸多态性与心境障碍密切相关。因此,本文综述P2X7R与MDD的相关研究进展,以期为探索MDD发生的神经免疫机制提供理论依据。