嘌呤能2X7受体-核苷酸结合寡聚化结构域样受体3信号通路活化在慢性胰腺炎纤维化中的作用

目的:探讨嘌呤能2X7受体(P2X7R)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体信号通路在小鼠慢性胰腺炎模型胰腺纤维化进程中的作用。方法:通过反复腹腔注射雨蛙素造成小鼠慢性胰腺炎模型,分别用P2X7R拮抗剂氧化三磷酸腺苷(Ox ATP)和亮蓝G(BBG)进行干预,处死后观察胰腺组织病理学变化,并用Western Blot及RT-PCR法对P2X7R、NLRP3和半胱天冬酶1(caspase-1)的含量进行检测,比较各组的变化。结果:正常对照组的P2X7R、NLRP3和caspase-1的蛋白表达水平分别为0.85±0.18,、0.93±0.16和1.02±0.06,模型组分别是1.55±0.22、2.00±0.35和2.23±0.56,二组比较,均有差异。OxATP组分别为1.02±0.26、1.01±0.09和0.95±0.04,BBG组分别为0.97±0.17、0.96±0.14和2.07±0.33,与模型组相比,无论是OxATP组还是BBG组,P2X7R、NLRP3和caspase-1在胰腺组织中的表达均显著降低(P<0.05)。病理结果显示,模型组出现了明显的胰腺纤维化,而OxATP组和BBG组的慢性胰腺炎和纤维化指标明显改善。结论:OxATP和BBG能够降低慢性胰腺炎模型的慢性炎症和纤维化程度,其机制与抑制P2X7R-NLRP3-caspase1信号通路的活化有关。

嘌呤能2X7受体与抑郁症的相关研究进展

抑郁症(major depression disorder,MDD)在全球疾病负担榜单中占据前位,严重影响MDD患者的健康和生活质量。近年来MDD机制研究对神经免疫炎症比较关注,临床研究发现MDD患者循环血多种炎症因子的表达上调,嘌呤能2X7受体(Purinergic 2X7 receptor,P2X7R)激活是调控这些炎症因子的上游信号之一;遗传学研究也证实P2X7R的单个苷酸多态性与心境障碍密切相关。因此,本文综述P2X7R与MDD的相关研究进展,以期为探索MDD发生的神经免疫机制提供理论依据。

曲安奈德对自发性高血压大鼠视网膜P2X7R/NLRP3通路及眼底血管病变的影响

目的探讨曲安奈德(TA)对自发性高血压(spontaneously hypertensive,SHR)大鼠视网膜嘌呤能2X7受体(purinergic 2X7 receptor,P2X7R)/核苷酸结合寡聚化结构域受体蛋白3(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)通路蛋白表达及对眼底血管病变的影响。方法将40只双眼均有视网膜病变的SHR京都维斯特(WKY)大鼠随机分为模型组(SHR组)及TA低(20 g·L-1)、中(40 g·L-1)、高(80 g·L-1)剂量组,另取10只健康WKY大鼠作为空白组(Control组);TA低、中、高剂量组球结膜下四个方向分别注射相应剂量TA各10μL,Control组和SHR组注射等体积生理盐水,每7 d 1次;给药2周后,检测各组大鼠血压、左眼眼压及各组大鼠眼底视网膜形态,利用彩色超声多普勒检查大鼠视网膜中央动脉(central retinal artery,CRA)血流速度和视网膜中央静脉(central retinal vein,CRV)血流速度。观察各组大鼠视网膜结构、微血管变化,并检测视网膜毛细血管密度;行Western blot检测视网膜通路P2X7、NLRP3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)蛋白相对表达水平。结果与Control组相比,SHR组大鼠视网膜毛细血管闭塞及黄斑水肿等病理损伤明显,收缩压、舒张压、平均血压、眼压及P2X7、NLRP3、TNF-α、IL-6各蛋白相对表达水平均升高(均为P<0.05),毛细血管密度及CRA、CRV血流速度均降低(均为P<0.05);与SHR组相比,TA低、中、高剂量组视网膜毛细血管闭塞及黄斑水肿等病理损伤程度有所减轻,P2X7、NLRP3、TNF-α、IL-6各蛋白相对表达水平均降低(均为P<0.05),毛细血管密度及CRA、CRV血流速度均升高(均为P<0.05),且TA各剂量组呈剂量依赖性;与SHR组相比,TA各剂量组大鼠收缩压、舒张压、平均血压、眼压均无明显变化(均为P>0.05)。结论TA可能通过P2X7R/NLRP3通路抑制炎症反应,进而改善SHR大鼠眼底血管病变。

柚皮苷对脓毒症引起的急性肺损伤小鼠保护作用的研究

目的 研究柚皮苷对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制。方法 通过腹腔注射10 mg·kg^(-1)脂多糖建立脓毒症急性肺损伤小鼠模型。将小鼠随机分为对照组(注射等量磷酸缓冲液)、模型组(脓毒症急性肺损伤小鼠模型)、柚皮苷组(脂多糖造模前1 h腹腔注射50 mg·kg^(-1)柚皮苷)、BzATP组(脂多糖造模前1 h腹腔注射50 mg·kg^(-1)柚皮苷+5 mg·kg^(-1) BzATP)。造模后24 h取肺组织,计算肺系数;用酶联免疫吸附实验检测肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;用蛋白质印迹法检测肺组织嘌呤能2X7受体(P2X7R)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。结果 对照组、模型组、柚皮苷组和BzATP组的肺系数分别为(6.26±0.31)、(9.09±1.02)、(7.02±0.45)和(8.79±0.55)mg·g^(-1);TNF-α含量分别为(56.41±0.35)、(174.68±1.58)、(85.23±1.68)和(162.97±3.42)pg·mL^(-1);IL-1β含量分别为(44.18±7.37)、(119.91±17.16)、(85.41±2.14)和(104.57±3.39)pg·mL^(-1);IL-10含量分别为(50.82±2.89)、(28.31±1.86)、(42.82±1.98)和(25.19±1.69)pg·mL^(-1);P2X7R表达水平分别为0.45±0.16、1.33±0.10、0.64±0.09和1.05±0.18;NF-κB表达水平分别为0.38±0.19、1.29±0.09、0.57±0.11和0.92±0.07;NLRP3表达水平分别为0.72±0.14、1.28±0.23、0.75±0.09和1.27±0.23。对照组、柚皮苷组上述指标与模型组比较,BzATP组上述指标与柚皮苷组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 柚皮苷可通过抑制P2X7受体介导NF-κB/NLRP3信号通路,减轻脓毒症小鼠急性肺损伤。

番石榴叶总黄酮对慢性胰腺炎小鼠纤维化的影响

目的：探讨番石榴叶总黄酮（total flavonoids from Psidium guajava leaves,TFPGL）对慢性胰腺炎（chronic pancreatitis,CP）小鼠纤维化的影响及其机制。方法：将50只C57BL/6小鼠随机均分为正常组,CP模型组,oxidized ATP（oxATP）组,TFPGL低、高剂量组。后4组小鼠腹腔注射雨蛙素50μg·kg^-1·h^-1（溶于200μL生理盐水）,每天6次,每周3 d,连续6周,建立慢性胰腺炎小鼠模型。6周后,oxATP组腹腔注射oxATP（15μg·kg^-1·d^-1,溶于200μL生理盐水）2周,TFPGL低、高剂量组分别予以TFPGL 0.186,0.372 g·kg^-1·d^-1灌胃2周。同时,正常组小鼠腹腔注射与模型组等体积、等频率的生理盐水。苏木素-伊红（HE）染色评估胰腺损伤程度;天狼星红染色检测胰腺组织胶原含量;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1）的蛋白表达水平;酶联免疫吸附法测定胰腺组织中IL-1β（interleukin-1β）,IL-18水平。结果：与正常组比较,雨蛙素注射后胰腺损伤加重（P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平升高（P〈0.01）。天狼星红染色显示胰腺组织细胞周围胶原Ⅰ（ColⅠ）,胶原Ⅲ（ColⅢ）含量较正常组升高（P〈0.01）。与模型组比较,oxATP组及TFPGL低、高剂量组炎症损伤及纤维化程度均减轻,表现为天狼星红染色程度减轻（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平均降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：TFPGL可通过抑制P2X7R介导NLRP3炎性体信号途径活化显著减轻慢性胰腺炎模型小鼠的慢性炎症及纤维化程度。

秦皮甲素减轻脂多糖刺激小鼠急性肾损伤和炎症反应的作用及其机制

急性肾损伤是临床常见的严重疾病。秦皮甲素是一种香豆素类化合物,前期研究发现秦皮甲素对糖尿病大鼠肾脏损伤具有保护作用,本研究旨在探讨秦皮甲素对脂多糖(LPS)致小鼠急性肾损伤的作用及其可能机制。H&E染色观察肾脏形态;测定血尿素氮(BUN)水平和血清肌酐含量评价肾功能;ELISA法检测炎症因子水平;RT-PCR和Western blotting分析炎症蛋白表达水平。结果表明,ES可减轻LPS所致的病理损伤和肾功能损伤,降低血清BUN水平和肌酐含量;此外,ES显著降低肾组织中IL-1β、IL-6和TNF-α、趋化因子MCP-1和细胞黏附分子ICAM-1等的释放。进一步研究发现,秦皮甲素在m RNA水平和蛋白水平下调LPS导致的小鼠肾组织中炎症通路蛋白P2X7、HMGB1、TLR4和MyD88的表达。以上结果表明,秦皮甲素对LPS刺激所致急性肾损伤具有保护作用,抑制炎症反应与下调P2X7和HMGB1/TLR4炎症通路相关。