基于嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7的资生肾气丸镇痛机制研究

目的:探索资生肾气丸对醋酸致小鼠扭体模型的镇痛作用。方法:将42只小鼠随机分为7组,分别给予相应药液灌胃,末次灌胃1 h后造模,建立醋酸致小鼠扭体模型。观察小鼠扭体次数,计算其扭体抑制率,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E 2(PGE 2)、神经生长因子(NGF)含量,采用实时PCR(RT-PCR)检测嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)mRNA、Nod样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、NIMA相关激酶7(NEK7)mRNA的表达情况。结果:与模型组比较,随着时间的增加,资生肾气丸低剂量、中剂量、高剂量均可抑制小鼠扭体反应,降低扭体次数,增加小鼠扭体抑制率,降低小鼠血清中IL-1β、PGE_(2)、NGF的含量,降低P2X7RmRNA、NLRP3mRNA、NEK7mRNA的表达以抑制疼痛反应,以高剂量效果最优(P<0.05),与吲哚美辛、痛风舒片疗效相近。结论:资生肾气丸高剂量对小鼠血清疼痛因子的降低效果显著,其机制可能与嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7信号通路有关。

嘌呤受体P2X配体门控离子通道7与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的关系

目的 分析外周血胞膜上嘌呤受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)水平与老年高血压合并冠心病患者心肌缺血及自主神经改变的关系。方法 前瞻性选取2020年8月至2022年8月三二〇一医院诊治的老年冠心病患者146例,根据心肌缺血情况分为心肌缺血组86例,非心肌缺血组60例。比较2组外周血P2X7R水平与心肌缺血总负荷(TIB)差异,分析P2X7R与TIB的相关性。采用ROC曲线分析P2X7R对心肌缺血的预测价值。以P2X7R预测心肌缺血的截断值分为高水平组76例,低水平组70例,比较2组心率变异性时域指标、频域指标差异。结果 心肌缺血组外周血P2X7R及TIB明显高于非心肌缺血组(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,P2X7R水平与TIB呈正相关(r=0.624,P<0.01)。ROC曲线分析显示,P2X7R预测老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的截断值为698.94 ng/L,曲线下面积为0.800(95%CI:0.726~0.874),敏感性、特异性分别为70.9%、88.3%。P2X7R、TIB是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血发生的危险因素(OR=2.056,95%CI:1.373~3.079,P<0.01;OR=1.276,95%CI:1.128~1.444,P<0.01)。高水平组心率变异性时域指标明显低于低水平组,心率变异性频域指标明显高于低水平组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 外周血P2X7R是老年高血压合并冠心病患者心肌缺血的影响因素,与心肌缺血严重程度相关,可反映自主神经功能损害程度。

P2X7R过表达的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达观察

目的观察嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7的配体(P2X7R)过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞单钠尿酸盐(MSU)晶体诱导痛风炎症反应过程中NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白、IL-1β、TNF-α表达情况。方法取人单核细胞白血病细胞系THP-1,并随机分为过表达组、空白组、模型组、对照组;过表达组和空白组分别转染P2X7R过表达质粒、空白载体质粒,转染5 d,将过表达组、空白组、模型组THP-1细胞用100 ng/mL的PMA刺激3 h后分化为巨噬细胞,另将MSU晶体用氢氧化钠溶解配制成浓度为100μg/mL的MSU乳糜状悬液加入培养液中孵育6 h;对照组正常培养。分别采用RT-PCR法和Western blot法测算巨噬细胞P2X7R mRNA、蛋白,ELISA法检测巨噬细胞上清液IL-1β、TNF-α,Western blot法测算巨噬细胞NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白。结果与对照组比较,过表达组、空白组、模型组P2X7R mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组、空白组比较,过表达组P2X7R mRNA、蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论P2X7R过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达增加,IL-1β、TNF-α水平升高可能通过激活NLRP3蛋白来实现。

炎症性肠病患者P2X7嘌呤受体及肥大细胞类胰蛋白酶表达研究

目的探讨P2X7嘌呤受体及肥大细胞类胰蛋白酶在炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)患者肠组织及血清中的表达及临床意义。方法收集2016年12月至2018年3月于郑州大学第二附属医院住院的80例活动期IBD患者的肠组织活检石蜡包埋标本、血清样本及粪钙卫蛋白(FC)结果,其中溃疡性结肠炎(UC)患者58例,包括轻度活动性患者15例,中度活动性患者20例,重度活动性患者23例;克罗恩病(CD)患者22例,包括轻度活动性患者7例,中度活动性患者7例,重度活动性患者8例。另外收集40例结直肠癌患者行外科手术切除的正常断端肠组织作为对照,40名健康志愿者的血清样本作为对照。采用免疫组织化学法检测肠组织中P2X7嘌呤受体的表达,ELISA法检测血清类胰蛋白酶的含量。结果轻、中、重度UC组P2X7嘌呤受体的表达均高于对照组(χ~2=7.062,P=0.008;χ~2=18.983,P<0.05;χ~2=32.216,P<0.05),且重度UC组高于轻度UC组(χ~2=7.242,P=0.007)。轻、中、重度CD组P2X7嘌呤受体的表达高于对照组(χ~2=5.223,P=0.022;χ~2=5.223,P=0.022;χ~2=11.161,P=0.001),CD各亚组比较差异无统计学意义(P>0.05)。类胰蛋白酶在各组血清中的表达差异有统计学意义(P<0.001),IBD组高于对照组,且重度IBD组高于轻、中度IBD组。另外,P2X7嘌呤受体与类胰蛋白酶呈显著正相关(UC:r=0.872,P<0.05;CD:r=0.866,P<0.05)。P2X7嘌呤受体与FC呈正相关(r=0.543,P<0.05)。结论 P2X7嘌呤受体可能通过激活肥大细胞增加类胰蛋白酶的表达参与IBD的发生和发展,检测其变化对疾病严重程度的评估具有重要临床意义。

P2X7嘌呤能受体在自身免疫性疾病中的作用

嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7(P2X7R)是嘌呤能受体P2X家族的重要成员,分布于体内多种组织和器官,主要表达于单核细胞和巨噬细胞,在人体的固有免疫中发挥重要作用。多种炎症状态下炎症局部组织中P2X7R的表达上调,进而调控炎症介质的表达和释放,诱导细胞产生炎症细胞因子,介导炎症反应和免疫应答,参与自身免疫性疾病的发生和发展,近年来P2X7R的研究备受关注。本文主要对P2X7R在炎症反应中的作用及其在自身免疫性疾病中的研究进展做一综述。

右美托咪定通过P2X7调控NLRP3/IL-1β通路减轻大鼠炎性痛

目的探讨右美托咪定(Dex)在慢性炎性痛大鼠模型中对嘌呤能P2X7及NOD样受体蛋白(NLRP)3/白细胞介素(IL)-1β通路的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组、模型组、Dex低、高剂量组(10、20μg/kg)、Bz-ATP组(Dex 20μg/kg+P2X7激动剂Bz-ATP 15μg/kg),每组12只。左后爪足底内注射完全弗氏佐剂(CFA)诱发炎性疼痛模型,大鼠于建模前1 d、建模后即刻及建模后1、2、3 d进行腹腔注射给药,1次/d。给药结束后,行为学测试检测大鼠机械痛阈(MWT)和热痛阈(PWTL);酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑脊液中IL-1β水平;分离L4~L6背根神经节(DRG),免疫荧光法检测DRG中P2X7、NLRP3与神经元特异核蛋白(NeuN)的共表达;蛋白免疫印迹法检测DRG中P2X7、NLRP3、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、IL-1β蛋白表达。结果与对照组相比,模型组MWT、PWTL显著下降(P<0.05);脑脊液中IL-1β,DRG中P2X7与NeuN、NLRP3与NeuN共表达水平、P2X7、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,Dex低、高剂量组MWT、PWTL明显升高(P<0.05);脑脊液中IL-1β,DRG中P2X7与NeuN、NLRP3与NeuN共表达水平、P2X7、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均明显降低(P<0.05),且使用Bz-ATP激活P2X7受体,可明显逆转Dex的抗炎镇痛作用。结论Dex可能通过下调P2X7,抑制NLRP3/IL-1β通路,减轻大鼠慢性炎性痛。

P2X_7受体对缺氧诱发小鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的:探讨嘌呤受体P2X_7对缺氧诱发小鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响。方法:以小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5为研究对象,按照不同处理因素将细胞随机分为4组:正常对照组(G1)、缺氧组(G2)、缺氧+激动剂(BzATP)组(G3)、缺氧+拮抗剂(BBG)组(G4);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的存活率;用Annxin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测细胞内cleave-caspase-3和cleave-PARP蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,RGC-5细胞经缺氧处理后,细胞存活率明显降低;凋亡率显著升高;细胞内cleavecaspase-3和cleave-PARP蛋白表达增加;P2X_7受体激动剂BzATP能明显加重缺氧诱发的细胞凋亡,而BBG预处理可以显著拮抗缺氧所致的细胞凋亡。结论:缺氧能激活视网膜神经节细胞嘌呤受体P2X_7,并参与视网膜神经节细胞的凋亡。

P2X7受体在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中P2X7R的表达及其临床意义。方法回顾性分析2012年1月-2014年1月华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院收治的NSCLC患者118例癌组织标本。采用免疫组织化学法检测NSCLC组织标本中P2X7R的表达,根据免疫组织化学结果将患者分为P2X7R高、低表达组。采用Kaplan-Meier曲线和Log-rankχ^2检验比较P2X7R高、低表达组无瘤生存率和总生存率的差异;采用Cox比例风险模型分析影响NSCLC患者无瘤生存率和总生存率的独立危险因素。结果72例(61.0%)患者癌组织中P2X7R高表达。不同TNM分期和有无淋巴结转移患者的P2X7R蛋白高表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。P2X7R高表达组5年无瘤生存率低于P2X7R低表达组(18.1%VS 25.1%)(P<0.05);P2X7R高表达组5年总生存率低于P2X7R低表达组(23.3%VS 30.1%)(P<0.05)。单因素Cox比例风险模型分析显示,P2X7R表达、TNM分期及淋巴结转移是影响NSCLC患者无瘤生存率的危险因素(P<0.05)。多因素Cox比例风险模型分析表明,P2X7R表达[OR=2.082(95%CI:1.079,3.747),P=0.001]及TNM分期[OR=3.210(95%CI:0.587,6.448),P=0.028]是影响NSCLC患者无瘤生存率的危险因素。单因素Cox比例风险模型回归分析显示,P2X7R表达、TNM分期和淋巴结转移是影响NSCLC患者总生存率的危险因素(P<0.05)。多因素Cox比例风险模型回归分析表明,P2X7R表达[OR=2.893(95%CI:1.582,4.562),P=0.002]及TNM分期[OR=1.910(95%CI:0.587,2.449),P=0.038]是影响NSCLC患者总生存率的危险因素。结论P2X7R表达可作为影响NSCLC预后的新分子标志物。

脑出血病人血清P2X7R水平与脑水肿程度及认知功能相关性研究

目的 检测脑出血病人血清胞膜上嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)水平以及脑水肿程度,并分析二者与脑出血病人认知功能障碍的相关性。方法 前瞻性选取2019年7月~2021年7月本院收治的115例脑出血病人为研究组,另取同期体检健康者90例为健康对照组。检测血清P2X7R水平以及脑水肿体积;采用Pearson分析血清P2X7R水平与脑水肿体积的相关性;根据病人是否出现认知功能障碍分为无认知功能障碍组(78例)和认知功能障碍组(37例),多因素Logistic回归分析脑出血病人认知功能障碍的影响因素,绘制血清P2X7R水平与脑水肿体积对脑出血病人认知功能评估的ROC曲线。结果 研究组病人发病第1天时血清P2X7R水平高于健康对照组(P<0.05),脑出血病人血清P2X7R水平、脑水肿体积在1~5天出现逐渐升高的趋势,在第5天达到峰值然后降低(P<0.05);脑出血病人发病第1、3、5、7天血清P2X7R水平与脑水肿体积均呈正相关(r=0.712、0.583、0.589、0.472,P<0.05);认知功能障碍组血清P2X7R水平、脑水肿体积均高于无认知功能障碍组(P<0.05);血清P2X7R水平、脑水肿体积是影响脑出血病人认知功能的危险因素(P<0.05);血清P2X7R水平、脑水肿体积单独及联合预测病人认知功能障碍的曲线下面积分别是0.763、0.750和0.829。结论 脑出血病人血清P2X7R水平升高,脑水肿体积增大,二者呈正相关,联合检测可预测病人认知功能障碍的发生。

外源性三磷酸腺苷对高表达P2X7受体的宫颈癌Caski细胞生长的影响

目的:探讨外源性三磷酸腺苷(ATP)对高表达P2X7受体的人宫颈癌Caski细胞(Caski-P2X7)生长及凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。方法:选择本实验室建立的Caski-P2X7细胞和对照Caski-3.1细胞(转染空载体质粒),用不同浓度ATP分别处理两种细胞株,MTT法检测细胞生存率,荧光染色法检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率;用2.5mmol/L ATP处理两种细胞后,Western blot检测凋亡相关蛋白(细胞色素C,bcl-2,Bax)的变化。结果:不同浓度ATP作用后,两种细胞生存率及线粒体膜电位均降低,而细胞凋亡率升高,均呈浓度依赖性;同一浓度ATP作用后,Caski-P2X7细胞生存率及线粒体膜电位均显著低于Caski-3.1细胞(P<0.05),但细胞凋亡率显著高于Caski-3.1细胞(P<0.05)。2.5mmol/L ATP处理后,Caski-P2X7细胞胞质中细胞色素C及凋亡蛋白Bax表达量明显增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白bcl-2表达量明显减少(P<0.05)。结论:一定浓度的ATP可通过P2X7受体途径诱导宫颈癌Caski细胞凋亡。

P2X7受体在中枢神经系统中的作用研究进展

P2X7受体是ATP敏感的离子通道受体的一种,其在中枢神经系统(CNS)表达丰富。目前研究证明,P2X7受体不但在CNS生理过程中发挥重要作用,而且参与多种CNS疾病的病理过程。了解P2X7受体在CNS主要的生理机制和病理过程,阐明P2X7受体治疗方案在CNS相关疾病中的运用具有重要意义。现就P2X7受体在CNS中的作用研究进展进行综述。

P2X7受体在癫痫患者中的表达水平及临床意义

目的观察P2X7受体(P2X7R)在癫痫患者中的表达情况,探讨其在癫痫发病、发展过程中的作用及临床意义。方法选取2014年3月—2015年12月行手术治疗的癫痫96例作为观察组,同时选择同期行神经外科减压或清创患者14例作为对照组。观察2组脑组织中P2X7R mRNA和蛋白、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 P2X7R在正常脑组织和癫痫患者脑组织中均有表达。观察组P2X7R mRNA和蛋白、IL-1β和TNF-α表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 P2X7R可能参与了癫痫的发生与发展,为药物治疗癫痫提供了新的靶点,检测P2X7R表达水平可为癫痫的预后判断提供一定的依据。

P2X7R/NLRP3信号通路在酒精性肝损伤中的作用

目的探讨嘌呤P2X7R及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用。方法采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,将30只♂C57BL/6小鼠随机分为3组(n=10):对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组,最后1周,分组进行以下处理,对照组和模型组:给予等剂量的生理盐水腹腔注射(每只约0.2 mL),每日1次;A438079组:根据小鼠体质量,腹腔注射200μmol·kg^(-1)的A438079(按7 g·L^(-1)配制A438079,每只约0.2mL),每日1次。最后1天清晨给予单次31.5%酒精溶液灌胃,剂量为10 mL·kg^(-1)。9 h后小鼠眼眶取血,测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)。HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化方法检测肝组织中P2X7R的表达;Western blot法检测肝组织中的P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18水平。结果与对照组相比,模型组ALT、AST、TG、TCHO含量明显增强,且肝组织损伤明显;与模型组相比,A438079组ALT、AST、TG、TCHO含量明显降低。与对照组相比,模型组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达明显升高;与模型组相比,A438079组P2X7、NLRP3、ASC、IL-1β、IL-18的表达水平明显降低。结论酒精诱导的肝损伤可能与P2X7R-NLRP3信号通路有关。

P2X7受体对牙周膜干细胞成骨分化的作用

背景:研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。目的:初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法:分离培养人牙周膜干细胞,分为4组,分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及普通培养基培养,于成骨诱导7,14 d,利用茜素红染色检测成骨效果,q RT-PCR,Western blot检测OCN、Runx2以及P2X7受体的表达。结果与结论:茜素红染色显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组牙周膜干细胞的成骨效果在7 d时显著好于成骨诱导液组,但在14 d时成骨诱导液组成骨效果显著好于成骨诱导液+三磷酸腺苷组(P<0.05);在成骨诱导7 d时,qR T-PCR结果显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组Runx2,OCN mR NA的表达达到峰值,而14 d时明显降低(P<0.05)。成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体mR NA的表达量明显高于三磷酸腺苷组(P<0.05),成骨诱导液组和对照组未见P2X7受体mR NA的表达,成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组表达量下降,明显低于三磷酸腺苷组,差异有显著性意义(P<0.05)。Western blot结果显示,成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达达到峰值,高于三磷酸腺苷组,而成骨诱导液组表达量低,对照组几乎没有表达;成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时明显下降,而三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时有所增加。结果表明外源性三磷酸腺苷可在牙周膜干细胞成骨诱导前7 d明显提高成骨效果,但在7 d后,抑制成骨诱导效果,三磷酸腺苷可以激活牙周膜干细胞P2X7受体表达,且P2X7受体的表达与牙周膜干细胞的成骨效果正相关。

P2X7R拮抗剂对小鼠慢性胰腺炎的作用及机制研究

目的探讨嘌呤能P2X7受体(P2X7R)拮抗剂——氧化三磷酸腺苷(OxATP)和亮蓝G(BBG)在抑制下游靶蛋白——核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体活化和慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化进程中的作用及可能机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机均分为正常对照组、CP模型组、Ox ATP组和BBG组。除正常对照组腹腔注射与处理组等体积的生理盐水外,其余组均通过腹腔注射雨蛙素法制作CP小鼠模型(6周)。造模结束后,CP模型组、Ox ATP组和BBG组分别予以腹腔注射生理盐水、Ox ATP(20μL,300μmol/L)和BBG(20μL,10μmol/L)处理,连续注射2周。然后处死各组小鼠并取胰腺组织,行病理学检查,以HE染色对胰腺病理组织学(炎性细胞浸润、腺泡萎缩及纤维化程度)进行评分,天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组化染色分别对胰腺纤维化程度进行评估;免疫组化法检测胰腺P2X7R、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)中的累积光密度(IOD)值。结果与正常对照组比,CP模型组炎症损伤组织学评分增加,胰腺纤维化程度显著增加,P2X7R、NLRP3和Caspase-1免疫组化IOD值显著升高(P<0.05);与CP模型组相比,Ox ATP和BBG组炎症损伤组织学评分降低,HE染色纤维化评分、天狼星红染色和α-SMA免疫组化染色均显著减轻(P<0.05),胰腺P2X7R、NLRP3和Caspase-1 IOD值均明显降低(P<0.05)。结论 P2X7R拮抗剂Ox ATP和BBG能够显著减轻CP小鼠模型的慢性炎症和纤维化程度,阻断P2X7R-NLRP3炎性体信号通路,这有望成为治疗CP及其纤维化进程的一种潜在新策略。

甘珀酸抑制eATP-P2X7R-NLRP3信号通路减轻慢性胰腺炎纤维化的实验研究

目的探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)。造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物。末次给药24 h后将小鼠脱颈处死。HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织eATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)mRNA的表达。结果HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润。模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低。模型组小鼠造模后eATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织eATP水平均低于模型组。免疫荧光染色法和qPCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05)。此外,qPCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 mRNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01)。结论CP病程中eATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用。

NaHS对ATP诱导大鼠小胶质细胞P2X受体表达的影响

目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理。(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理。(3)NaHS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中。(4)KN-62(P2X_7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,荧光染料YO-PRO-1检测各组相对荧光单位(RFU)反映膜的通透性,Western blot检测各组P2X_7受体表达水平。结果:(1)与对照组相比,不同浓度的ATP(1、3、5、10 mmol/L)作用3 h均可明显降低大鼠小胶质细胞活力,Na HS(200μmol/L)干预后大鼠小胶质细胞活力较ATP组明显增加(P<0.01),但Na HS达400μmol/L浓度时,其保护作用未进一步增加。(2)随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P<0.01)。(3)ATP(3 mmol/L)能上调P2X_7受体蛋白表达水平,而Na HS(200μmol/L)预孵育则可明显抑制ATP引起的P2X_7受体蛋白表达的上调(P<0.01)。结论:Na HS可减少ATP致伤的大鼠小胶质细胞的P2X_7受体表达、降低通透性、增加细胞活力,提示调控P2X_7受体的表达和功能可能是H_2S神经保护作用的重要环节。

P2X7R介导的神经炎症在神经精神疾病中的作用

嘌呤能P2X7受体(P2X7R)是腺苷三磷酸门控阳离子通道受体,作为嘌呤受体P2X家族受体亚型之一,主要由各种免疫细胞表达。P2X7R及其介导的信号通路可触发炎症反应的激活,具有介导先天免疫反应的重要作用。中枢神经系统的炎症反应能激活小胶质细胞,从而导致白细胞介素1β等炎性因子的释放,这些炎性因子促使组织变性、损伤及细胞的死亡。目前认为,神经炎症是神经退行性疾病、精神疾病和各种脑损伤的病理进程中的重要一环,也就成为人们试图干预这些疾病落脚点。

P2X7R在缺血性中风发病中作用的研究进展

由于老年人口的持续增加,脑血管病已成为中老年人死亡的主要原因之一。因此,进一步研究缺血性中风发生、发展的机制,积极开展有效的早期预防,是广大医务工作者的共同愿望。该文对P2X嘌呤能受体7(P2X7R)在缺血性中风发病中作用的研究进展进行综述,旨在为缺血性中风的治疗提供理论依据。

血清铁蛋白、P2X7R、HSP70在痛风患者中的表达及其临床价值

目的分析血清铁蛋白(SF)、胞膜上嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)、热休克蛋白70(HSP70)在痛风患者中的表达及其临床价值。方法回顾性选取2018年1月至2020年1月十堰市太和医院收治的痛风患者83例,将其纳入观察组。另选取同期83例高尿酸血症患者,将其纳入对照组。比较两组患者血清SF、P2X7R、HSP70水平,分析观察组组内SF正常组(n=33)、SF升高组(n=50)、急性期组(n=52)和慢性期组(n=31)患者血清SF、P2X7R、HSP70水平,探讨其诊断价值。结果观察组患者血清SF、P2X7R、HSP70水平为(546.99±16.24)mg/m L、(678.98±20.19)pg/m L、(53.29±2.19)ng/m L,均高于对照组[(325.18±16.29)mg/m L、(384.29±20.17)pg/m L、(11.17±2.15)ng/m L],差异均有统计学意义(P<0.05)。SF正常组患者血清SF、P2X7R、HSP70水平为(646.89±12.64)mg/m L、(795.91±18.32)pg/m L、(65.97±4.06)ng/m L,均低于SF升高组[(415.81±15.29)mg/m L、(466.29±18.36)pg/m L、(36.98±4.01)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。急性期组患者血清SF、P2X7R、HSP70水平为(598.02±32.14)mg/m L、(741.28±32.15)pg/m L、(72.15±12.69)ng/m L,均高于慢性期组[(308.47±32.19)mg/m L、(365.28±32.16)pg/m L、(40.25±12.61)ng/m L],差异均有统计学意义(P<0.05)。血清SF水平升高导致P2X7R、HSP70水平升高,血清SF水平与P2X7R、HSP70水平呈正相关(P<0.05)。血清SF、P2X7R、HSP70联合诊断痛风价值高于任何单一血清SF、P2X7R、HSP70指标或任2项指标。结论痛风患者血清SF、P2X7R、HSP70水平明显升高,且联合检测能明显提升痛风诊断价值,推荐使用。