基于网络药理学及分子对接分析蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制

目的:应用网络药理学及分子对接方法分析蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制。方法:应用TCMSP数据库中各成分口服生物利用度及类药性筛选活性成分,并根据血脑屏障通透性进一步筛选治疗中枢神经系统疾病的活性成分,通过DisGeNET数据库预测嘎日迪-13治疗脑卒中的潜在靶点;对靶点进行基因本体(gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,筛选关键靶点;应用分子对接验证化合物与关键靶点的结合能力。结果:通过TCMSP数据库筛选得到嘎日迪-13的活性成分58个,获得蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中潜在靶点114个;网络分析结果显示,嘎日迪-13通过参与核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路、白介素17(interleukin 17,IL17)信号通路、低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路等27条通路发挥保护作用,确定关键靶点包括:NOS3、ACE、IL6、TNF、SERPINE1、VEGFA、IL1β、MMP9、CXCL8、TP53以及MAPK1。结论:本研究通过网络药理学及分子对接提供了蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的潜在分子依据,揭示了蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制,为后续研究及临床应用提供了理论支持。

嘎日迪-5对心脏毒性的代谢通路分析

目的:采用代谢组学方法分析嘎日迪-5心脏毒性机制。方法:以大鼠为研究对象,以嘎日迪-5为示例药物,将大鼠按体质量随机分为正常组,嘎日迪-5高、中、低剂量组。除正常组外,各给药组灌胃药物溶液,连续灌胃28 d,末次给药后收集血清样本,采用LC-MS非靶向代谢组学技术分析血清内源性代谢产物变化。结果:与正常组比较,嘎日迪-5高剂量组CK、CKMB含量显著升高(P<0.05),嘎日迪-5中剂量、嘎日迪-5低剂量组CKMB含量显著降低(P<0.05)。各给药组大鼠的心电图主要表现为嘎日迪-5高剂量组心动过缓,ST段压低;嘎日迪-5中剂量组室早,宽大畸形的QRS波(P<0.05);嘎日迪-5低剂量组ST段压低。心脏组织病理检测显示,正常组心肌纤维排列整齐规则,胞核呈蓝色,胞质呈淡粉色,细胞结构清晰。嘎日迪-5高剂量、嘎日迪-5中剂量组心肌纤维排列紊乱,胞质疏松淡染,部分细胞水肿。嘎日迪-5低剂量组心肌纤维排列略紊乱,胞质疏松淡染;嘎日迪-5高剂量(GG)组心脏样本中筛出121个差异代谢物。结论:嘎日迪-5心脏毒性机制与大鼠心脏内ABC转运蛋白、精氨酸和脯氨酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢等通路有关。

嘎日迪-13和嘎日迪-15中14种元素含量的比较研究

采用ICP-AES法同时测定嘎日迪-13和嘎日迪-15中的Si、Sn、Al、Cd、Na、P、K、Ca、Mn、Fe、Cu、Zn、Mg和Pb等14种元素含量，并对各元素进行了加标回收实验,嘎日迪-13和嘎日迪-15中各元素的回收率在92.78%～105.56%之间，RSD在0.87%～3.93%之间.结果显示，在嘎日迪-13和嘎日迪-15中K、P、Ca、Na、Fe、Mg等元素含量较高，Pb未检出.

蒙药嘎日迪-13味丸对脑缺血大鼠海马组织白介素-1β、肿瘤坏死因子-α蛋白及神经细胞凋亡的影响

目的探讨蒙药嘎日迪-13味丸对脑缺血大鼠海马组织炎性细胞因子白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达及神经细胞凋亡的影响。方法采用枕大池二次注血法至大鼠脑组织缺血损伤模型,在各时间段断头取脑,用ELISA法和流式细胞仪分别检测脑缺血海马组织中IL-1β和TNF-α的含量及细胞凋亡数量的百分比。结果与正常组比较,模型组海马组织中IL-1β和TNF-α升高,细胞凋亡百分比增多(P<0.05);与模型组比较,嘎日迪-13味丸组大鼠海马组织中IL-1β和TNF-α含量降低,细胞凋亡百分比数减少(P<0.05)。结论嘎日迪-13味丸能降低大鼠脑缺血组织神经细胞凋亡数量,减轻缺血损伤程度,其机制可能与降低脑组织内IL-1β和TNF-α含量有关。

嘎日迪-13对大鼠脑缺血后不同时相不同脑区ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的:探讨脑组织中细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)在大鼠脑缺血损伤后不同时相不同脑区的表达及嘎日迪-13对其影响。方法:雄性SD大鼠360只,将大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、嘎日迪-13大剂量组(240 mg/kg)、嘎日迪-13中剂量组(120 mg/kg)、嘎日迪-13小剂量组(60 mg/kg)5组,每组又随机分为缺血1h组、6 h组、12 h组、24 h组、72 h组与120 h组6个时相组,采用改良Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,免疫组织化学法检测脑组织中ICAM-1和VCAM-1在1 h、6 h、12 h、24 h、72 h和120 h蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组缺血侧海马、纹状体和大脑皮质区ICAM-1、VCAM-1阳性表达量显著升高,1 h后开始上升,24 h达高峰,之后逐渐下降(P<0.01),具有显著性差异。嘎日迪-13大、中、小剂量组缺血侧海马、纹状体和大脑皮质区可明显降低ICAM-1、VCAM-1的阳性表达量,与模型组比较具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论:嘎日迪-13可能是通过减少脑缺血损伤后各时相神经元的损伤,调节黏附分子相互之间的作用,抑制其合成、分泌及释放,来减轻脑组织损伤,从而发挥对脑缺血损伤的保护作用。

蒙药嘎日迪-13对脑缺血大鼠不同时相海马中IL-1β IL-8、ICAM-1、P-selectin表达的影响

目的观察蒙药嘎日迪-13对脑缺血大鼠不同时相海马中IL-1β、IL-8、ICAM-1、P-selectin表达的影响。方法 360只雄性SD大鼠随机分为脑缺血模型组、假手术组、嘎日迪-13大、中、小剂量组,每组又随机分为6个时相组,灌胃给药,一次/d,连续27 d后,线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,神经功能评分后免疫组化法测定海马IL-1β、IL-8、ICAM-1、P-selectin的表达。结果嘎日迪-13明显降低脑缺血大鼠神经功能评分,并明显降低脑缺血大鼠海马IL-1β、IL-8、ICAM-1、P-selectin的表达水平。结论蒙药嘎日迪-13对大鼠脑缺血有较好的保护作用,其机制可能与降低IL-1β、IL-8、ICAM-1、P-selectin等因子的表达水平有关。

蒙药嘎日迪-13抗血栓及抗真菌抗炎作用的药理学研究

目的 :研究蒙药嘎日迪 - 13的抗血栓、抗真菌抗炎的药理作用。方法 :给大鼠连续灌服不同剂量嘎日迪 - 13 7d,采用血小板栓实验法测知血小板的粘附聚集功能及急慢性炎症动物模型实验。结果 :嘎日迪 - 13能明显抑制大鼠实验性颈动脉血栓形成并抑制小鼠皮肤真菌感染。与对照组比较有明显差异。结论 :嘎日迪 - 13具有明显的抗血栓。

蒙药嘎日迪五味丸中二萜生物碱的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析

采用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)对蒙药嘎日迪五味丸中的生物碱进行分析和鉴定。通过准确的相对分子质量测定,在嘎日迪五味丸中检测到了双酯型生物碱、单酯生物碱型和脂类生物碱共21种乌头生物碱,为复方中药中乌头生物碱成分的分析提供了一种新的思路。

嘎日迪散治疗溃疡性结肠炎60例临床观察

[目的]观察口服嘎日迪散治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效。[方法]将120例溃疡性结肠炎患者按随机数字表法分为治疗组60例,采用口服嘎日迪散治疗;对照60例,采用口服柳氮磺嘧啶(SASP)治疗。[结果]治疗组总有效率为93.3%,对照组总有率为73.3%,两组比较具有统计学差异(P<0.05);两组治疗前后腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重主要临床症状同组比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]嘎日迪散治疗溃疡性结肠炎疗效显著,且无不良反应。

蒙药嘎日迪-13对脑缺血损伤大鼠MPO表达的影响

目的探讨脑缺血损伤后不同时相脑组织和血清中髓过氧化物酶(MPO)的活性变化以及蒙药嘎日迪-13对其的影响。方法取雄性SD大鼠360只,将大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、嘎日迪-13大剂量组、嘎日迪-13中剂量组、嘎日迪-13小剂量五个组,每组又随机分为缺血1 h组、6 h组、12 h组、24 h组、72 h组与120 h组6个时相组,嘎日迪-13大、中、小给药组分别以1.2 g/100 m L,0.6 g/100 m L和0.3 g/100 m L浓度2 m L/100 g灌胃,1次/d,连续27 d后,采用改良Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,进行神经功能评分,在各时相规定时间点麻醉大鼠后从腹主动脉采血并取脑组织,采用分光光度法检测MPO活性。结果与假手术组比较,脑缺血模型组各时相血清和脑组织中MPO活性都明显升高(P<0.05);与脑缺血模型组比较,嘎日迪-13大、中、小剂量组各时相血清和脑组织中MPO活性都明显降低(P<0.05),且12和24 h时作用尤为明显(P<0.01)。结论嘎日迪-13可能是通过减少脑缺血损伤后各时相MPO活性,调节各时相炎症因子相互之间的作用,减轻脑组织损伤,从而发挥对脑缺血损伤的保护作用。

蒙药萨丽嘎日迪对糖尿病伴蛋白尿大鼠肾组织VEGF和血清TGF-β1的调节作用

目的探讨蒙药萨丽嘎日迪对糖尿病伴蛋白尿大鼠的肾组织损伤修复作用。方法将50只Wistar雄性大鼠单次腹注链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。模型成功的大鼠按体重随机分为模型组、萨丽嘎日迪低、高剂量组,取20只正常大鼠分为空白组10只和空白给药组10只。各给药组给予相应药物,连续灌胃84 d后处死,用酶联免疫吸附试验检测尿微量白蛋白(m ALB)、血清转化生长因子(TGF)-β1;取肾组织采用HE及PAS染色,进行病理观察;用Western印迹检测肾组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组肾小球肥大,肾小球细胞增生明显,糖原颗粒变性明显,m ALB及血清TGF-β1升高,VEGF蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0. 05);萨丽嘎日迪各组肾小球系膜基质增生减少,糖原颗粒聚集少,病变情况轻于模型组,差异有统计学意义(P<0. 05)。与模型组比较,萨丽嘎日迪各组m ALB和血清TGF-β1明显下降,差异有统计学意义(P<0. 05)。与模型组比较,萨丽嘎日迪各组肾组织VEGF蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论萨丽嘎日迪可能是通过降低TGF-β1含量,下调VEGF表达,进而减轻肾损伤,减少蛋白尿。

诃子制草乌对蒙药嘎日迪-5镇痛抗炎作用的影响

目的:不同条件诃子制草乌对蒙药嘎日迪-5镇痛抗炎作用的影响。方法:比较3个不同条件(诃子汤中浸泡12h,煎煮2h[A]、诃子汤中浸泡24h,煎煮2h[B]、诃子汤中浸泡4天[C])诃子制草乌和生草乌配制嘎日迪-5混悬液的热板法镇痛作用、二甲苯致小鼠耳廓肿胀法抗炎作用。结果:对小鼠热板法致疼痛刺激反应比较结果为:在A条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液两个剂量组给药后30min、60 min时都有明显的镇痛作用(分别P<0.05和P<0.01)、B条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液高剂量组给药60 min以后不但没有镇痛作用反而有兴奋作用(P<0.05)、C条件炮制草乌配成的低、高剂量组给药60 min以后不但没有镇痛作用反而有兴奋作用(分别P<0.01、P<0.001)。对二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症的影响比较结果为:在A条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液两个剂量组都有明显的预防和治疗作用(P<0.05);B条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液高剂量组有明显的预防和治疗作用(P<0.01);C条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液没有明显的预防和治疗作用;生药组对小鼠热板法致疼痛刺激反应和对二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症都没有镇痛和抗炎作用。结论:初步研究证明在A条件炮制草乌配成的蒙药嘎日迪-5混悬液镇痛、抗炎作用最佳,此炮制方法和条件为诃子制草乌的进一步规范化研究和临床应用提供试验依据。

蒙药嘎日迪五味丸中微量元素的初级形态分析

采用电感耦合等离子发射光谱法(ICP-AES)对嘎日迪五味丸中Zn、Fe、Mn、Cu、Ni、Se等元素进行分析。结果表明:元素Fe含量最高(5 926.7μg/g),元素Ni(45.01μg/g)含量最低,而其中元素Ni(75.46%)总提取率最高,元素Cu(34.28%)总提取率最低。该研究结果为进一步探讨嘎日迪五味丸中微量元素与药效之间的关系提供参考。

蒙药萨日嘎日迪联合西药治疗对2型糖尿病合并勃起功能障碍患者血清同型半胱氨酸和一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的分析蒙药萨日嘎日迪联合西药治疗对2型糖尿病(T2DM)合并勃起功能障碍(ED)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。方法选取2015年1月至2017年1月内分泌科住院治疗的346例T2DM合并ED患者作为研究对象,其中来自河北港口集团有限公司港口医院213例,内蒙古自治区科尔沁右翼中旗蒙医医院133例。应用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组173例。对照组在对症治疗基础上采用α-硫辛酸、前列地尔、甲钴胺治疗,观察组在对照组治疗基础上加服蒙药萨日嘎日迪治疗,2组患者均连续治疗2周。对2组患者治疗前后的国际勃起功能指数5(IIEF-5)评分、血清总睾酮及游离睾酮、Hcy、一氧化氮及NOS水平进行比较;观察治疗期间不良反应发生情况。结果 2组患者治疗前IIEF-5评分、血清总睾酮及游离睾酮、Hcy、一氧化氮及NOS水平差异均无统计学意义(均P> 0. 05)。经治疗后,2组IIEF-5评分、血清总睾酮及游离睾酮水平均较治疗前明显升高,且观察组明显高于对照组(均P <0. 05)。经治疗后,2组血清Hcy水平较治疗前明显降低,血清一氧化氮、NOS水平较治疗前明显升高[观察组:(8. 0±1. 0)μmol/L比(13. 3±1. 7)μmol/L、(36. 2±4. 6)μmol/L比(16. 6±2. 3)μmol/L、(35. 0±4. 2) k U/L比(19. 6±2. 7) k U/L;对照组:(9. 9±1. 2)μmol/L比(13. 2±1. 8)μmol/L、(29. 5±3. 8)μmol/L比(16. 6±2. 2)μmol/L、(29. 8±3. 8) k U/L比(19. 7±2. 8) k U/L];观察组治疗后的血清Hcy水平明显低于对照组,血清一氧化氮、NOS水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0. 445)。结论在T2DM合并ED的治疗中,将蒙药萨日嘎日迪与α-硫辛酸、前列地尔、甲钴胺进行多药联合应用,能够更加明显地提升勃起功能和血清性激素水平,降低血清Hcy水平,改善血管内皮舒张功能,具有提高疗效的作用且安全性较高。

微波消解ICP-AES法测定蒙药嘎日迪-13中的多种微量元素

蒙药含有丰富的微量元素，特别是人体必需的微量元素含量较高，而人体有害的重金属元素含量较低。采用微波消解ICP-AES法同时测定了嘎日迪-13（1^#，2^#，3^#）中Ca，Cu，Zn，Fe，Mg，Mn，Pb等15种微量元素。加标回收率在97．5％～105．5％之间，相对标准偏差RSD≤2．90g，检出限≤0．009μg·L^-1。实验结果表明；1#，2^#，3^#具有一定的差异，药的性味功能与微最元素之间也有一定的关系。通过蒙药中微量元素的测定，可以控制配方的准确性及保证产品的质量。

蒙药嘎日迪乌日勒对脑缺血再灌注损伤的保护作用及对一氧化氮、一氧化氮合酶、脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子的影响

目的探讨蒙药嘎日迪乌日勒对脑缺血再灌注损伤的保护作用及对一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组、阳性组、嘎日迪乌日勒低、高剂量组,每组20只,10只用于脑梗死面积百分比测定,10只用于脑匀浆中NO、神经型一氧化氮合酶(n NOS)、VEGF及BDNF含量测定。嘎日迪乌日勒低、高剂量组分别给予灌胃嘎日迪乌日勒0.18、0.36 g/kg,阳性组给予金纳多片0.16 g/kg,1次/d,连续给药7 d。再灌注24 h后处死大鼠,取脑,进行TTC染色计算脑梗死面积,HE染色观察脑组织病理改变;制备10%的脑组织匀浆,检测NO、n NOS、VEGF及BDNF含量。结果与假手术组比较,其他组脑梗死面积明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性组、嘎日迪乌日勒高、低剂量组脑梗死面积明显降低(P<0.05)。HE染色,给药组正常脑组织结构消失,椎体细胞体积缩小,部分椎体细胞脱失、坏死、组织稀疏,间质水肿,与梗死区边界模糊。与假手术组比较,模型组、嘎日迪乌日勒低、高剂量组NO、n NOS、BDNF、VEGF均明显升高(P<0.05);阳性组NO、n NOS、VEGF明显升高(P<0.05)。与模型组比较,阳性组、嘎日迪乌日勒低、高剂量组NO、n NOS明显降低,嘎日迪乌日勒低剂量组BDNF明显升高、VEGF明显降低(P<0.05)。结论嘎日迪乌日勒对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与调节脑组织中NO、n NOS、BDNF、VEGF的含量有关。

一测多评法同时测定嘎日迪-5丸中4种化学成分

用HPLC法,以木香烃内酯为内参物,建立该成分与没食子酸、鞣花酸和去氢木香内酯的相对校正因子(f_(s/i)),采用f_(s/i)计算各成分的质量分数.同时以外标法(ESM)测定上述4种化学成分的质量分数,比较两种方法所测含量的差异.结果表明,各相对校正因子重复性良好,RSD值均小于3.0%,嘎日迪-5丸中4种成分采用一测多评法测定结果与外标法测定结果无显著性差异.

HPLC法测定蒙药嘎日迪-13味丸中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯、去氢木香内酯含量

目的:HPLC法同时测定蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量。方法:甘草苷核甘草酸铵色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸(B)梯度洗脱,0-10 min(16%-18%A),10-30 min(18%A),30-40 min(18%-27%A),40-85 min(27%-45%A),85-86 min(45%-16%A);柱温:30℃;检测波长:237 nm;流速:1 m L·min-1。木香烃内酯和去氢木香内酯色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(65:35),检测波长:225 nm,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1,结果:甘草苷、甘草酸铵线性范围分别为0.10-1.2μg(r=0.999 9)、0.341-4.092μg(r=1.000 0);平均回收率分别为97.07%和100.13%,RSD分别为1.00%和1.84%(n=5)。木香烃内酯和去氢木香内酯线性范围分别为0.12-1.2μg(r=1.000 0),0.106-1.06μg(r=1.000 0);平均回收率分别为98.44%和98.90%,RSD分别为2.21%和3.38%。结论:该方法专属性强,重复性好,可用于蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量测定。

蒙药嘎日迪散对大鼠溃疡性结肠炎的作用

目的:探讨嘎日迪散对大鼠溃疡性结肠炎的作用.方法:采用免疫法复合TNBS诱导法制作溃疡性结肠炎模型,从宏观和微观评价嘎日迪散对大鼠溃疡性结肠炎的治疗效果.结果:动物疾病活动指数、结肠粘膜损伤指数、结肠粘膜镜下评分的结果显示,各给药组和模型组相比具有统计学意义,HE结果显示,模型组还存在典型的溃疡,各给药组粘膜修复良好.结论:嘎日迪散能有效治疗大鼠溃疡性结肠炎,其作用和阳性药柳氮磺吡啶及补脾益肠丸相当.