嘴突凸脐蠕孢菌作为微生物除草剂的潜力研究

[目的]本研究旨在探究嘴突凸脐蠕孢菌(Exserohilum rostratum)的生物学特性及其孢子悬浮液与常用农药混配后孢子萌发特性,为该菌株的生产和应用开发奠定基础。[方法]以菌株Y9511为试验材料,通过配制完全培养基及缺少碳源、氮源、磷、硫、钾、铁、镁等元素的培养基,用葡萄糖、麦芽糖、可溶性淀粉、α-乳糖分别更换完全培养基的碳源蔗糖,用Ca(NO3)2、(NH4)2SO4、大豆蛋白胨分别更换完全培养基的氮源NH4NO3,探究培养基对Y9511的菌丝生长及产孢量的影响。在5~40℃、24 h光照/24 h黑暗、pH3~9的培养条件下探究Y9511的产孢量及孢子萌发率。Y9511与丙草胺、恶唑酰草胺、氰氟草酯、莠灭净、春雷霉素、苯甲嘧菌酯、多菌灵、苯甲丙环唑等8种农药分别混配,探究Y9511和不同农药混配后的孢子萌发率。[结果]菌株Y9511生长需要碳、磷、硫3种元素,Y9511生长受到氮、铁的抑制,微量元素铜和锌抑制Y9511的生长。缺钾和缺铜的培养基上Y9511基本不产孢,缺硫和缺锌的培养基产孢量较完全培养基高,为3.76×10^6 mL^-1;5种碳源中,以蔗糖为碳源的培养基产孢量最大,为1.47×10^6 mL^-1,4种氮源中,NH4NO3为氮源的培养基产孢量最大,为1.47×10^6 mL^-1;Y9511在低于15℃和高于35℃的条件下产孢受到抑制,32℃时产孢量达到最大值,为8.15×10^6 mL^-1;pH值低于3.02和高于9.50时,产孢量较低,pH值为6.24时,产孢量达到最大值,为2.77×10^6 mL^-1。30℃时孢子萌发率最高,达98.5%;pH值为6.24时,孢子萌发率达到最大值,为85.8%。8种农药对孢子萌发均具有抑制作用,抑制率为5.0%~89.4%。Y9511与供试农药氰氟草酯的相容性最好,3种处理浓度下抑制率最高仅为7%;其次是多菌灵,3种浓度下抑制率为7.8%~19.5%;相容性最差的是苯甲嘧菌酯,其抑制率为25.1%~85.4%。[结论]嘴突凸脐蠕孢菌生长的最适温度为32℃,pH值为6,钾和锌为菌株培养的必需元素,最适碳源为蔗糖,氮源为硝酸铵;孢子萌发最适温度为30℃,最佳pH值为6~7,与农药氰氟草酯混用后孢子萌发基本不受抑制。

香蕉突脐蠕孢叶斑病菌Brn1基因的PCR扩增与序列分析(英文)

【目的】为从分子水平进一步鉴定引起香蕉叶斑病的突脐蠕孢霉,对突脐蠕孢的Brn1基因序列进行了分析。【方法】用引物Brn101(5'-GCCAACATCGCAAACATGG-3')andBrn102(5'-GCAAGCAGCACCGTCAATACCAAT-3')对3个分生孢子形态差异较大的香蕉突脐蠕孢叶斑病菌(CLER09、D087和JL05)的Brn1基因进行PCR扩增和系统发育分析。【结果】不同菌株间存在简单的碱基缺失和替换,供试菌株与Exserohilum rostratum在系统发育树上聚类在同一个分支,与Exserohilum属其他种明显分开,形成一个独立的演化群。遗传距离分析表明,供试菌株与E.rostratum亲缘关系相近,菌株间的遗传距离为0.000～0.018,而Exserohilum属种间的遗传距离为0.020～0.093。【结论】E.rostratum菌株间的遗传变异较大,但仍属种内变异;Brn1基因可作为支持具有明显形态变异菌株为E.rostratum成员的分子依据。

10种杀菌剂对橡胶树嘴突凸脐蠕孢菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法测定10种杀菌剂对橡胶树嘴突凸脐蠕孢叶斑病菌的抑菌能力,结果表明各杀菌剂对嘴突凸脐蠕孢菌的毒力差异显著,苯醚甲环唑、丙环唑、咪鲜胺、异菌脲对橡胶树叶斑病菌的毒力较强,EC50范围在0.0133~0.5572μg/mL,其中苯醚甲环唑、丙环唑对橡胶树叶斑病菌的抑制效果最佳,EC50均小于0.1μg/mL;代森锰锌、百菌清、三唑酮的抑制效果较差,EC50为1~100μg/mL;而多菌灵、甲基硫菌灵、嘧菌酯对嘴突凸脐蠕孢叶斑病菌基本无效。

橡胶树嘴突凸脐蠕孢菌生物学特性研究

对橡胶树叶斑病嘴突凸脐蠕孢菌生物学特性的研究表明,菌丝最适生长温度为30℃,最适生长pH 6~8,致死温度为53℃10 min;不同的光照条件对菌丝生长影响较小;菌丝可利用多种碳源、氮源,其中碳源以蔗糖、木糖、麦芽糖、乳糖、淀粉生长最好,氮源以胰蛋白胨为优,表明嘴凸脐蠕孢菌具有较强的环境适应能力。

嘴突凸脐蠕孢菌Y9511油剂剂型研究

嘴突凸脐蠕孢菌Y9511是一株千金子生防潜力菌。本研究采用PDA平板培养法,以菌株Y9511的菌落直径、产孢量和孢子萌发率为指标,探究5种载体、9种表面活性剂、6种溶剂油和3种稳定剂对它的影响,且对孢子的分散性、悬浮性和稳定性做了研究,为菌株Y9511的制剂开发提供一定依据。结果表明:5种载体、9种表面活性剂、6种油类助剂和3种稳定剂对菌株Y9511的菌丝体生长均存在抑制作用;但珍珠岩、农乳700#、大豆油对产孢量的影响较明显,能使菌株Y9511产孢量达到5.3×10^(6)孢子/mL、10.8×10^(6)孢子/mL、4.3×10^(6)孢子/mL;将孢子粉分别与珍珠岩、大豆油按1:1和2:1配制时,萌发率最高,为47.00%和75.67%;根据分散力和稳定性测定结果,农乳1601#的分散力最好,分散力指数I为0.35;海藻酸钾的稳定性最好,斜率为0.0526;将农乳1601#和海藻酸钾配制成不同浓度,与孢子粉混合,当农乳1601#浓度为0.3%,海藻酸钾浓度为0.1%时,孢子萌发率高达54.33%和88.67%。基于上述比例,初步配方确定为Y9511孢子粉39.84%、珍珠岩39.84%、大豆油19.9%、农乳1601#0.3%和海藻酸钾0.1%。本试验从生物相容性的角度出发,筛选出嘴突凸脐蠕孢菌Y9511油剂的最佳配方,为后续开发与应用奠定了基础。

桂牧1号杂交象草叶斑病病原鉴定及其生物学特性分析

从儋州牧草种质中心资源圃的桂牧叶斑病叶片上分离得到一株致病真菌,通过采用形态学观察、致病性测定、分子生物学等鉴定方法对该致病菌进行了研究。结果表明,菌丝体表面光滑,有横隔,分生孢子呈球棒形或长纺锤形,淡褐色至中等褐色,端部钝圆,基部有明显突出的脐点,有3-12个隔膜,大小约（71.22-76.97）μm×（3.54-6.16）μm。其型态特征与蠕孢属（Exserohilum sp.）描述高度相符。对其核糖体DNA内转录间隔区（ITS）序列进行PCR扩增、测序获得长度为602 bp的序列,经BLAST比对,该序列与嘴突凸脐蠕孢（Exserohilum rostratum）ITS序列同源性达99%。结合致病菌的形态特征和ITS序列分析结果,将其鉴定为嘴突凸脐蠕孢。经生物学特性研究发现：适宜该菌菌丝体生长的温度为25-32℃,最适温度为28-32℃;菌丝体生长的最适p H为6-8;菌丝体生长的最佳碳源为葡萄糖、蔗糖和甘露醇;最佳氮源为硝酸钠,尿素不适合菌丝体生长;全黑暗条件有利于菌丝体生长;菌丝体致死温度为55℃,10 min。杀菌剂室内毒力测定结果显示：对嘴突凸脐蠕孢毒力最强的杀菌剂为咪鲜胺和苯醚甲环唑,EC50分别为0.007 1 mg/L和0.007 2 mg/L;嘴突凸脐蠕孢对戊唑醇最敏感。