期刊文献+
共找到2篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
噬菌体呈现抗体库的构建及抗Fas-Fab抗体的研究
1
作者 王希良 黄云辉 +1 位作者 陈克敏 朱锡华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期182-185,共4页
目的构建噬菌体抗体库,获得具有功能的抗FasFab噬菌体抗体。方法以Fas重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠。取其脾细胞提取mRNA采用RTPCR方法扩增抗体基因,构建重链和κ链基因库,用重组Fas抗原对所构建的抗体库进行4轮筛选,并以ELISA法... 目的构建噬菌体抗体库,获得具有功能的抗FasFab噬菌体抗体。方法以Fas重组蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠。取其脾细胞提取mRNA采用RTPCR方法扩增抗体基因,构建重链和κ链基因库,用重组Fas抗原对所构建的抗体库进行4轮筛选,并以ELISA法鉴定其功能。结果获得抗体重链Fd基因和κ链基因长度约700bp。构建的重链Fd基因为3.5×106的抗体重链基因库。构建的重链和κ链基因库的容量均为3.1×106。经VCSM13感染得到噬菌体的滴度为8.9×1016cFu/L的噬菌体抗体库,含有抗体重链和κ链基因的噬菌体占27%。用重组人Fas抗原进行4轮筛选,得到100%的富集,说明Fas重组抗原富集了抗FasFab噬菌体抗体,经ELISA检测均有抗Fas抗体的特异性。结论制备的可溶性抗FasFab抗体具有抗Fas抗体的特异性,为进一步的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 FAS 细胞凋亡 噬菌体呈现抗体库技术 抗Fas-Fab抗体
下载PDF
抗人转铁蛋白单链抗体的研制及部分性能研究
2
作者 李兆隆 郭红玲 +4 位作者 常彩琴 涂政 肖卫民 王明鑫 王俭 《中国法医学杂志》 CSCD 2001年第S1期12-16,共5页
研制人转铁蛋白的单链抗体。以纯化人转铁蛋白免疫小鼠,制备小鼠脾脏 mRNA,RT-PCR 扩增重轻链可变区基因;Linker 连接及引入 Sfi Ⅰ和 NotⅠ酶切位点构建单链抗体基因;同载体 pCANTAB 5E 连接,转化 E.coliTG1细胞,以 M13K07挽救制备噬... 研制人转铁蛋白的单链抗体。以纯化人转铁蛋白免疫小鼠,制备小鼠脾脏 mRNA,RT-PCR 扩增重轻链可变区基因;Linker 连接及引入 Sfi Ⅰ和 NotⅠ酶切位点构建单链抗体基因;同载体 pCANTAB 5E 连接,转化 E.coliTG1细胞,以 M13K07挽救制备噬菌体抗体呈现文库,筛选抗原阳性重组噬菌体粒子(Panning);感染 E.coliHB2151菌株,制备可溶抗体并检测其性质;测定抗体基因序列并分析同源性及结构特征。制备出4株分泌抗人转铁蛋白可溶抗体的 E.coli HB2151菌株。抗体基因只由小鼠抗体的轻重链可变区基因构成,开放读码,无终止子,并紧接一末尾为一琥珀终止密码的 E 末端序列,其对应氨基酸序列 V_H 和 V_L 部分均遵从抗体可变区特征。实验证明,可把基因工程抗体技术应用于法医血清学,以制备新型抗体试剂。 展开更多
关键词 抗人转铁蛋白 单链抗体(ScFv) 噬菌体呈现抗体库 固相抗原选择
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部