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题名噬菌体基因组DNA快速提取方法
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作者
刘秋婷
田雨顺
云龙
罗鹏
胡超群
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机构
中国科学院南海海洋研究所/中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室/广东省应用海洋生物学重点实验室
中国科学院大学
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出处
《热带生物学报》
2017年第2期232-235,共4页
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基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31370149)
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文摘
针对传统噬菌体基因组DNA的提取方法缺乏广泛适用性,并且提取中用到酚/氯仿抽提,操作步骤繁琐,会对操作人员身体造成一定程度的损伤等不足,笔者建立了1种噬菌体基因组DNA快速提取方法。其提取的主要步骤包括宿主核酸降解、噬菌体粒子沉淀、噬菌体DNA释放、杂质去除、DNA吸附、DNA清洗和DNA洗脱等。结果表明,通过此法能快速提取以溶藻弧菌、大肠杆菌和阴沟肠杆菌为宿主菌的多种噬菌体基因组DNA,最快可以在2 h内完成,而且提取的产量和纯度均较高,DNA浓度超过100 ng·μL^(-1),OD_(260/280)达到1.8以上,提取产物不受宿主菌基因组DNA污染,可用于下游的实验分析。
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关键词
噬菌体基因组dna
快速提取方法
核酸降解
噬菌体粒子沉淀
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Keywords
bacteriophagegenomic dna
rapid extraction
nucleic acid degradation
bacteriophage precipitation
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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