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我国首株噬藻体(蓝藻病毒)的分离与鉴定 被引量:23
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作者 赵以军 程凯 +4 位作者 石正丽 郭亚新 祝海燕 张建红 刘永定 《自然科学进展》 北大核心 2002年第9期923-927,共5页
分离得到一株裂解织线藻和席藻的噬藻体。对该噬藻体的研究发现:光照条件是感染所必需的,但不依赖于金属离子(如镁离子);裂解织线藻的周期(27℃条件下)为4h,其中潜伏期为3h,最后的1h为裂解期,病毒释放量约200 PFU/细胞,感染过程中,织线... 分离得到一株裂解织线藻和席藻的噬藻体。对该噬藻体的研究发现:光照条件是感染所必需的,但不依赖于金属离子(如镁离子);裂解织线藻的周期(27℃条件下)为4h,其中潜伏期为3h,最后的1h为裂解期,病毒释放量约200 PFU/细胞,感染过程中,织线藻的放氧速率急剧下降,此外还发现:40℃下处理10min,噬藻体保持100%活性;50℃下处理1min,失活率小于25%;50℃下处理10min,失活率为40%;60℃下处理1min,失活率为85%;60℃下处理10min,失活率大于99%,在电子显微镜下可以观察到此病毒为噬菌体形态,头部直径为52um,尾部很短,几乎不可见,该噬藻体的遗传物质为双链DNA,基因纽约36kb。 展开更多
关键词 噬藻体 分离 鉴定 蓝藻病毒 织线藻 席藻 噬菌体形态 显微结构 双链DNA
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一株C3形态多重耐药大肠杆菌噬菌体生物学特性和基因组分析 被引量:2
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作者 左君豪 王雪 +8 位作者 曾君 王猛 郭志良 季芳 徐莉莉 韦燕文 王倩 赵瑞利 王承民 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4752-4768,共17页
【目的】多重耐药菌的出现对公共卫生安全构成严重威胁,本研究分离多重耐药大肠杆菌噬菌体,研究其生物学特性和基因组特征,为耐药菌的噬菌体疗法提供理论依据。【方法】使用双层平板法从污水样本中分离纯化大肠杆菌噬菌体;磷钨酸染色后... 【目的】多重耐药菌的出现对公共卫生安全构成严重威胁,本研究分离多重耐药大肠杆菌噬菌体,研究其生物学特性和基因组特征,为耐药菌的噬菌体疗法提供理论依据。【方法】使用双层平板法从污水样本中分离纯化大肠杆菌噬菌体;磷钨酸染色后通过透射电镜观察形态;测定其宿主范围,测定温度和pH稳定性、一步生长曲线和体外抑菌效果等生物学特性;体内抑菌试验评估噬菌体对多重耐药大肠杆菌N1203-1Af感染的大蜡螟幼虫的保护作用;基于全基因组测序对其基因组特点进行分析。【结果】本研究分离共得到5株大肠杆菌噬菌体,分别命名为pEC-S163-2.1、pEC-S163-2.2、pEC-M1167-5Ar.1、pEC-m1291-2Dr.1和pEC-N1203-2Af.1;电镜结果显示噬菌体pEC-N1203-2Af.1属于短尾噬菌体中罕见的C3形态型,头部较长,长是宽的2–3倍;pEC-N1203-2Af.1可裂解受试15株大肠杆菌中的3株;感染10 min后进入指数增长期,–20−50℃、pH值为4.0–10.0的环境下均能够保持稳定活性;大蜡螟幼虫感染大肠杆菌N1203-2Af后噬菌体pEC-N1203-2Af.1治疗感染复数(multiplicity of infection,MOI)=100、1和0.01在48 h内存活率均达到70%以上(7/10);噬菌体pEC-N1203-2Af.1基因组全长77334 bp,(G+C)%含量为42.18%,不携带耐药基因和毒力因子;功能基因预测表明,噬菌体pEC-N1203-2Af.1基因组共有121个CDS,其中CDS53–CDS64是编码噬菌体结构和裂解模块的序列。【结论】多重耐药大肠杆菌噬菌体pEC-N1203-2Af.1具有良好的抑菌活性,生物学特性稳定,可能为Kuravirus属的新成员,其具有罕见的C3形态,这种头部细长的特殊形态可能与CDS63编码的主要头部蛋白有关。不同地区的C3形态噬菌体长尾纤维远端三聚体蛋白一致性小于50%,推测该形态噬菌体为适应不同的环境可能发生了不同方向的进化。 展开更多
关键词 多重耐药大肠杆菌 C3形态噬菌体 生物学特性 结构蛋白基因 基因组学
原文传递
Bacteriophage Morphological Characterization by Using Transmission Electron Microscopy
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作者 Giuseppe Aprea Anna Rita D'Angelo Vincenza Annunziata Prencipe Giacomo Migliorati 《Journal of Life Sciences》 2015年第5期214-220,共7页
Bacteriophages or more commonly "phages" are bacterial viruses. They are ubiquitous and good indicators of bacterial contaminations since their prevalence is high in those environments where their hosts are abundant... Bacteriophages or more commonly "phages" are bacterial viruses. They are ubiquitous and good indicators of bacterial contaminations since their prevalence is high in those environments where their hosts are abundant. Phage classification is based on morphology and for this reason, even though it is considered an old technique, TEM (Transmission Electron Microscopy) still plays a key role in their characterization. In the present work, the authors focused on TEM analysis of phage ФApr-1 isolated against Lactococcuslactis (L. lactis), implicated in industrial fermentations and of phage ФIZSAM-1, active against Listeria monocytogenes (L. monocytogenes), isolated from the environment. For observation with TEM (EM 900T-Zeiss), phages were harvested in liquid media and were negative stained with fosfotungstic acid 2‰. An accurate viral ultrastructure analysis by using TEM is fundamental not only in the first approach of characterization of newly isolated phages but also for providing useful information to go further to the selection process as potential bio-decontaminants. 展开更多
关键词 BACTERIOPHAGES BACTERIA bio-decontaminants MORPHOLOGY PATHOGENS TEM (Transmission Electron Microscopy).
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