杭州市首例外环境水体中检出稻叶型霍乱弧菌及病原学分析

目的监测杭州市外环境水体中霍乱弧菌并对分离菌株进行病原学分析。方法2006年5月-2006年9月采集杭州市运河水系水样75份,按国标方法进行霍乱弧菌分离与鉴定。采用PCR检测霍乱弧菌分离菌株ctxA和tcpA毒力基因携带情况。采用KB纸片法检测霍乱弧菌分离菌株对14种临床常用抗生素的敏感性。结果从75份运河水标本中检出O1群霍乱弧菌稻叶血清型1(编号06-19)。O1群霍乱弧菌06-19株噬菌体分型6K,属于霍乱弧菌非流行株;ctxA和tcpA毒力基因PCR结果均为阴性。该菌株对11种抗生素均显示不同程度敏感性,但对四环素、氯霉素、链霉素耐药。结论本次分离的O1群霍乱弧菌06-19株属于不产生霍乱肠毒素和菌毛的非流行菌株。由于霍乱弧菌非流行株可引起散发性腹泻以及运河水系与杭州市市民日常生活的密切关系,故仍有必要加强对运河水系霍乱弧菌监测及污染源管理。

四川省噬菌体6型霍乱流行病学调查分析

目的分析四川省噬菌体6型霍乱的流行及病原学特征,为制定防控对策提供依据。方法根据1998-2001年省噬菌体6型霍乱流行病学个案调查表、专题调查、实验室检验鉴定结果以及各地霍乱防治工作总结等资料,进行描述流行病学分析和实验室结果分析。结果1998-2008四川省出现首例噬菌体6型霍乱病例,1998-2001年累计报告6b型霍乱2 239例,死亡100例。6b型霍乱年平均发病率为0.66/10万,病死率为4.47%。疫情波及全省5个市(州)的20个县(区)。分子生物学试验:噬菌体分型6型菌株与同期流行的1型菌株完全一致,具有流行株的分子特征。结论噬菌体6型霍乱菌株具有引起霍乱流行的能力,且病死率较高。

2002年-2016年广州海珠区O1/O139群霍乱弧菌流行状况及生物学性状分析

目的了解广州海珠区霍乱病原体O1/O139群霍乱弧菌的流行、分布状况及生物学性状,为霍乱疫情的有效防控提供科学依据。方法对2002年-2016年本区肠道门诊腹泻患者、患者接触者等疫点处理、珠江河水、饮用水、养殖水、各种水产品、市售熟食、健康人群等标本进行O1/O139群霍乱弧菌的分离培养、形态鉴别、生化鉴定及血清分型,对检出的O1群霍乱弧菌进行噬菌体-生物分型,并对检出的部分菌株进行ctx A毒力基因及tcp A毒力基因检测。结果13 385份标本中O1/O139群霍乱弧菌阳性的有84份,阳性率为0.63%。84株菌株中,O1群67株,构成比为79.8%,分属于16个不同的噬菌体-生物型,小川2f型为优势;O139群17株,构成比为20.2%。从患者分离的流行株携带ctx A毒力基因,非流行株与O139群菌株未发现携带ctx A毒力基因。结论小川型、稻叶型及O139群霍乱弧菌在本地区并存,且其传播和流行呈逐渐减弱的趋势;流行株携带ctx A毒力基因,可引发较大规模的疫情暴发,而更多的散发则是由非流行株或O139群霍乱弧菌所引发。

杭州市下城区餐饮业健康人群中检出3株小川型霍乱弧菌

目的:对食品从业人员粪便标本进行霍乱弧菌监测,对分离到的霍乱弧菌进行病原学鉴定,为霍乱防治提供信息。方法:按照W S289-2008《霍乱诊断标准》和《霍乱防治手册》第五版,分离霍乱弧菌,并确定所分离的霍乱弧菌血清型和生化反应特性;采用噬菌体生物分型区别流行和非流行株及不同菌型;采用PCR检测霍乱弧菌分离菌株ctxA和tc-pA毒力基因携带情况;采用脉冲场凝胶电泳(Pu lsed field gelelectrophoresis,PFGE)进行分子分型;采用K-B纸片法检测分离株对14种抗生素的敏感性。结果:从辖区同一家餐饮店不同工种的食品从业人员肛拭子中检出3株O1群霍乱弧菌小川血清型。3株菌噬菌体生物分型均为15 e,属埃尔托生物型非流行菌株,霍乱弧菌毒力基因PCR检测结果为ctxA阴性,tcpA阳性,3株菌PFGE分型结果一致。结论:检出的3株O1群霍乱弧菌埃尔托生物型虽然为非流行菌株,但从同一家餐饮店在同一时间段同时检出,杭州市尚属首例,应引起密切关注。传统的细菌系统鉴定结合分子分型方法,为霍乱弧菌的快速检测和流行病学溯源提供了技术支持。

脉冲场凝胶电泳方法在霍乱暴发溯源中的应用

目的应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法对不同类型的霍乱暴发事件进行分析，了解霍乱菌株的PFGE特征，追溯菌株的来源及其演变过程，探讨霍乱暴发流行的特点和规律。方法采用限制性内切酶Not I，对20032005年广州地区霍乱暴发疫情中41株霍乱弧菌进行PFGE分子分型，用BioNumerics Version4．0软件（复选Dice相关系数和UPGMA方法）进行聚类分析，并与噬菌体．生物分型及致病相关基因分型方法作比较。结果在霍乱暴发事件中，PFGE能有效地区分流行病学上密切相关菌株与无关菌株，与噬菌体一生物分型和致病相关基因分型方法相比具有更高的分辨能力。结论PFGE分型可揭示人和环境分离的霍乱菌株之间的流行病学联系，为霍乱疫情溯源提供分子流行病学证据和支持。

O1群E1Tor型霍乱弧菌溶原性测定的机理研究

目的 确定我国O1群El Tor生物型霍乱弧菌“噬菌体-生物分型”方案中“溶原性测定”中检测噬菌体的种类,研究溶原性测定的原理.方法 选择O1群El Tor型霍乱弧菌76株、O1群古典株8株、O139群菌株34株,利用溶原性测定方法检测菌株溶原性,检测菌株自发产生的溶原性噬菌体种类,检测阳性和阴性菌株染色体中该前噬菌体基因组,并检测这些菌株对溶原性噬菌体919TP（弧菌噬菌体K139家族）的敏感性.结果 O1群El Tor型菌株溶原性测定为阳性的19株菌,其释放的噬菌体主要为K139家族,具有溶原化的K139噬菌体,并对溶原性噬菌体919TP的敏感性为阴性;O1群El Tor型菌株22株对溶原性噬菌体919TP的敏感性为阳性,溶原性测定全部为阴性,基因组中不含有K139噬菌体;6株O1群古典型菌株溶原性检测为阳性株,但产生的噬菌体不是K139类;0139群菌株中5株溶原性测定为阳性,能检测到溶原性K139噬菌体基因组,并且34株菌全部不能被919TP感染.结论 O1群El Tor型霍乱弧菌“噬菌体-生物分型”方案中溶原性测定指标主要检测的是菌株释放K139类噬菌体的能力,即是否有K139噬菌体的溶原化并释放子代,“对溶原性噬菌体的敏感性”检测的是菌株能否被K139家族噬菌体（919TP）感染,因此生物分型中“溶原性测定”与“对溶原性噬菌体的敏感性”两个指标是相关联的.