噬菌体ΦX174标准物质定值方法研究

采用国际标准ISO 16604中噬菌体ΦX174的双层琼脂计数方法作为噬菌体ΦX174标准物质定值方法,针对该方法进行了方法验证和协同实验验证以及不确定度分析。结果显示,该方法重复性和复现性均较好,室内重复性相对标准偏差为10. 18%,室间相对标准偏差为14. 58%。经统计分析,双层琼脂计数法相对扩展不确定度为12. 44%,适用于噬菌体ΦX174标准物质的定值,对于人员防护装备防护性能评价具有重要意义。

T4、φχ174D和f2三种噬菌体对戊二醛消毒剂抵抗力的比较研究

目的筛选出消毒实验中评价消毒因子对病毒灭活效果的指示噬菌体。方法比较研究噬菌体T4、φχ174D和f2对戊二醛消毒剂的抵抗力。消毒剂对噬菌体的灭活效果采用悬液定量灭活试验、中和剂鉴定试验、噬菌体的检测采用双层琼脂法。结果13000mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用20min,或6000mg/L的戊二醛对噬菌体T4作用5min即可达到消毒水平(对噬菌体T4的灭活对数值(LIV)或噬菌体T4的对数减少值〔LRV)(log10No-log10Nt)≥4.00log10〕;22500mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用20min,或5000mg/L的戊二醛对噬菌体φχ174D作用5min达到消毒水平;34000mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用40min,或8000mg/L的戊二醛对噬菌体f2作用10min达到消毒水平。结论上述三种噬菌体对戊二醛的抵抗力由强到弱为:噬菌体f2>噬菌体T4>噬菌体φχ174D。

高度稀释的顺势疗法药物对噬菌体感染的细菌基因水平的作用(英文)

目的:探讨具有抗病毒作用的高度稀释的顺势疗法药物对噬菌体感染的大肠杆菌在基因水平调节噬菌体ΦX174 DNA的作用。方法:本研究之所以选用噬菌体ΦX174是因为其对大肠杆菌的宿主特异性及其在宿主内进行溶菌素基因E的组成性表达。采用顶层琼脂法,计数琼脂板上的斑块数量以衡量不同的顺势疗法药物对噬菌体感染的大肠杆菌的保护作用。被噬菌体感染的大肠杆菌接受不同顺势疗法药物的干预,以高度稀释的乙醇做为安慰剂对照,并加设空白对照组。琼脂板上的斑块数量表明菌群被噬菌体ΦX174感染并溶解的数量。反之,我们在用顺势疗法药物干预前将噬菌体ΦX174混入药物中,再与细菌作用,以确定药物本身对感染细菌的噬菌体ΦX174没有作用。结果:每一种顺势疗法药物干预后的细菌琼脂板上的斑块数量均较安慰剂对照组和空白对照组有显著下降;而混入药物的噬菌体ΦX174感染细菌后,琼脂板上的斑块数量并无明显下降。因为噬菌体ΦX174在细菌内开始其溶菌过程,斑块数量的下降可能是因为溶菌素基因E被抑制或者整个噬菌体ΦX174的DNA被大肠杆菌内的基因产物(抑制酶)所破坏。结论:本研究的结果证实了高度稀释的顺势疗法药物对噬菌体感染的大肠杆菌在基因水平有调节作用。

细菌生长过程中的病毒消失行为研究

环境中土著微生物存在及微生物的不同生长阶段可能影响病毒去向。本研究选择自然界广泛存在的3株细菌:恶臭假单胞菌(PP)、铜绿假单胞菌(PA)、枯草芽孢杆菌(BS)为微生物代表,以噬菌体X174为指示病毒,通过30℃(PP)和35℃(PA和BS)条件下病毒与细菌同步生长的培养实验和4℃条件下病毒与不同生长时段的菌株培养物的静态吸附实验,比较分析了细菌生长发育阶段对病毒消失(包括可逆/不可逆吸附和消亡)的影响。培育实验结果表明,病毒在30℃和35℃培养基中的浓度随着培育时间持续降低;但当培养基中接菌时,病毒浓度从接种至对数期6 h间急剧降低,降低幅度超过对照处理,其中在BS处理中降幅最大,其次为PA和PP处理;随着细菌由对数期进入稳定期和衰亡期,病毒浓度先反弹升高,然后后持续降低,反弹最高点病毒浓度在3株菌处理中均高于各自对照处理,反弹持续时间和病毒浓度的反弹提升程度依不同菌株而异。静态实验结果表明,菌株培养物的培育时间从6 h延长至18 h时,病毒的消失比例逐渐降低,继续延长至24 h时又迅速升高,然后随着培育时间的进一步延长而持续降低。以上结果表明细菌对病毒消失的影响随细菌生长发育阶段和菌种而异,暗示在研究病毒在环境中去向时,必须考虑环境中本土微生物的存在及其组成。

酶促DNA合成研究的进展

笔者介绍了酶促DNA合成研究的进展。科恩伯格和他的同事经历了从合成核苷酸、核苷三磷酸到合成DNA的历程。他们分离并提纯了DNA聚合酶,弄清了合成DNA的最直接的前体,揭示了DNA合成的化学机理,合成了具有感染性的噬菌体ΦX174DNA。

某种正压生物防护服的病毒气溶胶防护性能评价

目的评价某种正压生物防护服对病毒气溶胶的防护效果。方法制备Phi—X174噬菌体悬液，在气溶胶密闭舱室内发生Phi—X174噬菌体气溶胶，应用空气动力学粒子分析仪检测粒子直径，在高送风档和低送风档条件下，调节气溶胶密闭舱室内的湿度，用安德森六级采样器采样，通过计数噬菌体噬斑数评价该正压生物防护服对病毒气溶胶的防护效率。结果Phi-X174噬菌体气溶胶粒子质量中值直径约为0．922仙m，气溶胶粒子本底浓度〉2．0×10^4个／m^3，在不同的测试条件下，该正压生物防护服内病毒气溶胶浓度为0—21PFU／m^3，对Phi—X174噬菌体气溶胶粒子防护效率均〉99．9％，送风量（P=0．84）、环境湿度（P=0．33）以及采样时间（P=0．07）对正压防护服防护效率的影响无统计学意义。结论该正压生物防护服对Phi—X174噬菌体气溶胶的防护效果较好。