噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白3抗体文库

目的用噬菌体展示技术构建寻常型天疱疮患者桥粒芯糖蛋白 3抗体文库。方法收集寻常型天疱疮患者外周血，分离淋巴细胞抽提 RNA，采用 RT-PCR反应以人的抗体特异性 HuVHBACK、 HuJHFOR和 HuVkBACK、 HuJkFOR引物扩增抗体重链可变区（ VH）和轻链可变区（ VL）基因片段，并将其与接头拼接成 ScFv片段克隆于大肠杆菌。结果抗体基因 ScFv片段与噬菌体基因Ⅲ的产物以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达，构建了天疱疮患者的重组噬菌体抗体库， ELISA检测证明 ScFv基因产物具有抗体活性。结论天疱疮噬菌体抗体库的构建为天疱疮发病机理、诊断和治疗研究打下了基础。