噬藻体PP效价的日波动

研究了噬藻体PP效价的日动态变化,实验分别选取了8月、9月、10月、12月份的代表性晴天,采样点设在武汉东湖风光村湖面上。结果发现噬藻体的效价在一天中存在明显的规律性变化:当水温高于22℃时,噬藻体PP的效价在上午9:00时和下午15:00-17:00会出现两个明显的峰值,而晚上的波动则不明显;当冬季水温降至8℃左右时,噬藻体PP效价的波动不明显。进一步的研究表明水温(与季节相关)是影响噬藻体PP 增殖的重要因素:当水温为28℃时,噬藻体PP的裂解周期为6h,释放量为75 PFU·Cell-1;而当水温为8℃时,噬藻体PP的裂解周期则超过24h。

紫外光和日光对噬藻体PP活性的影响

分别研究了实验室条件下紫外灯照射及不同季节中日光照射对噬藻体PP活性的影响。结果表明紫外光(UV-A和UV-B)对噬藻体PP有较强的致失活作用,并且其致失活作用强弱与波长有关。日光的作用下,夏季时噬藻体PP的日失活率为88.60%,冬季时为58.86%。同时发现不同季节中,尽管在某些时段的日光强度相似,但噬藻体PP失活率的差别却较大,这一现象可能是由于光质不同引起的。上述结果有助于解释淡水环境中噬藻体种群大小的季节性波动。

模拟酸雨对噬藻体PP失活率、野生藻的吸附率、裂解周期及释放量的影响

研究不同pH值的模拟酸雨对噬藻体PP失活率及噬藻体PP感染野生藻的吸附率、裂解周期及释放量的影响。用离心法测定了噬藻体PP对宿主藻的失活率、吸附率,用一步生长曲线法获得了噬藻体PP对宿主藻的裂解周期及释放量。结果表明,在pH4.0～7.0的条件下:噬藻体PP7h的失活率分别为81.9%、74.8%、72.8%、67.1%,且pH4.0组的失活率显著高于与pH7.0组(对照组);噬藻体PP对野生藻的吸附率在45min时达到最大值,分别为54%、56.9%、67.9%、68.8%,各处理组的最大吸附率均显著低于对照组;噬藻体PP感染野生藻的潜伏期均介于30～90min之间,释放量分别约为42、52、29、104PFU·mL-1,各处理组与对照组的释放量存在极显著差异。表明模拟酸雨对噬藻体感染动力学过程的影响具有重要的意义。

武汉东湖PP类噬藻体的遗传多样性研究

设计出一对特异性扩增噬藻体PP序列的引物159B,利用该引物对若干季节的武汉东湖不同湖区的PP类噬藻体进行PCR扩增和PCR产物直接测序.结果表明:PP类噬藻体PCR扩增序列的差异不大(最大不超过12%),推测环境中PP类噬藻体的遗传多样性较为稳定.

PP类噬藻体的生态分布及系统进化研究

全国范围内采集富营养化水体,从5个省份分离出PP类噬藻体.设计了PCR引物GPA和GPB,扩增所分离的PP类噬藻体.对PCR产物测序后提交Genebank进行Blast,实验结果表明,分离的PP类噬藻体核酸与实验室PP相似性高达95%左右;氨基酸水平进化分析显示分离的PP类噬藻体与实验室PP亲源性也极高,证明它们是同一类病毒且分布广泛;并发现它们与噬藻体Pf-WMP3/4,脓肿分枝杆菌及其噬菌体,梭状芽胞杆菌及其噬菌体,茎瘤固氮根瘤菌和橙色滑柱菌的相关结构蛋白有一定的相似性.

不同光照条件下噬藻体PP感染野生藻的吸附率、裂解周期及释放量研究

通过对不同光照条件下,噬藻体PP对野生宿主藻的吸附率,感染后的潜伏期及释放量的研究,发现日光照射对噬藻体PP的增殖有重要意义。光照不是噬藻体吸附到宿主上的必要条件,但是,光照能够提高噬藻体PP对野生宿主藻的吸附率;光照是子代噬藻体PP释放的必须条件,而在黑暗条件下,噬藻体PP尽管能够与宿主细胞发生吸附,甚至完成复制的部分过程,但却不能完成子代噬藻体PP的释放。上述试验结果有助于解释自然水体中PP类噬藻体的效价在白天波动明显,但夜间波动不明显的现象。

Characterization and Genomic Analysis of a Plaque Purified Strain of Cyanophage PP

Cyanophages are ubiquitous and essential components of the aquatic environment and play an important role in the termination of algal blooms.As such,they have attracted widespread interest.PP was the first isolated cyanophage in China,which infects Plectonema boryanum and Phormidium foveolarum.In this study,this cyanophage was purified three times by a double-agar overlay plaque assay and characterized.Its genome was extracted,totally sequenced and analyzed.Electron microscopy revealed a particle with an icosahedral head connected to a short stubby tail.Bioassays showed that PP was quite virulent.The genome of PP is a 42,480 base pair(bp),linear,double-stranded DNA molecule with 222 bp terminal repeats.It has high similarity with the known Pf-WMP3 sequence.It contains 41 open reading frames(ORFs),17 of which were annotated.Intriguingly,the genome can be divided into two completely different parts,which differ both in orientation and function.