纤蛇纹石石棉及代用纤维粉尘的光谱研究与噻唑蓝(MTT)比色法分析

以纤蛇纹石石棉、陶瓷纤维、玻璃纤维、岩棉、硅灰石为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测染毒72h后V79细胞的存活率,并通过吉姆萨染色观察细胞形态学上的变化。不同浓度ρ/(μg.ml-1)的矿物粉尘(100,200,400,600,800,1000)作用72h后,V79存活率下降,细胞增殖明显受到抑制并出现大量细胞衰亡,呈现出剂量效应关系,且细胞毒性大小为玻璃纤维>纤蛇纹石石棉>陶瓷纤维>硅灰石>岩棉;形态学观察发现染毒细胞出现空泡、肿胀、裸核、黑褐色颗粒以及胞浆胞核模糊、形态变化等现象,且不同的粉尘对V79细胞的影响不同。总体而言,岩棉是五种粉尘中毒性最低的石棉代用纤维。

噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞的活性

噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法检测细胞的活性首都医科大学微生物学免疫学教研室（１０００５４）陈哲生，孙明洁，刘振龙，陈海伦北京宣武医院刑维常，王立，卢辉章北京天坛医院李海龙Ｍｏｓｍａｎ（１９８３）［１］报道噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法测定细胞活性。经我们改良后，这...

噻唑蓝比色法测定药物最低抑菌浓度初步研究

目的 用噻唑蓝 (MTT)比色法测定药敏试验最低抑菌浓度 (MIC)。方法 利用数理统计方法确定了药物浓度和吸光度的关系式为 :1gC =a +bA(C :药物浓度 ,A :吸光度 ,a ,b :常数 )。当A趋近于零时 ,药物浓度C就是该药物的MIC ,即 :1gMIC =(A1/A2 1gC2 -1gC1) /(A1/A2 -1)。通过该药物两种浓度C1、C2 及其相应的吸光度值A1、A2 就可以求出该药物的MIC ,这样求得的MIC并非直接实验得出 ,而是由两个确定的药物浓度及相对应的吸光度值计算得出的。结果 该方法已应用于临床标本 40株大肠埃希氏菌 ,35株金黄色葡萄球菌 ,33株铜绿假单孢菌。该方法和稀释法比较 ,回归方程分别为 :Y本法 =1.0 3X +2 .79(N =40 ) ,Y本法 =1.0 3X +3.0 5 (N =35 ) ,Y本法=1.14X +0 .6 7(N =33) ,相关系数分别为 :0 .996、0 .990和 0 .990。结论 该方法简便、快速、准确、重复性好。

噻唑蓝比色法检测细菌生长和存活状况的研究

建立了细菌生长和存活状况检测的噻唑蓝 (MTT)比色分析法。将S .aureus和E .coli菌以平板菌落计数法计数活菌数量 ,将一定数量细菌或经煮沸处理细菌加入微孔板 ,同时加入MTT ,于 36～ 37℃培养 ,加入DMSO溶解 ,于 51 0nm波长处测定A值 ;将一定数量活菌 ,加入不同数量MTT ,孵育不同时间 ,用不同量DMSO溶解 ,于不同波长处测定A值 ,以优化细菌MTT比色分析法条件。结果表明 :(1 )MTT能被活细菌利用 ,形成的fomazan数量与细菌浓度成线性关系 ;(2 )细菌经煮沸后MTT显色 ,A值明显降低 ,与煮沸时间成正比例 ;(3)MTT加入后在 0～ 2h内A值与作用时间成正相关 ;(4)MTT浓度增加 ,A值有一定程度增大 ;(5)以DMSO为Formazan溶解剂 ,其最大吸收波长范围为 51 0～ 530nm ;(6)以菌液体积的 2、3、4倍量加入DMSO均可较好地溶解Formazan颗粒。MTT比色分析法能反映活细菌的生长 ,存活状况 ;其较适宜的参数 :MTT终浓度0 3mg ml,作用时间 2h ,溶解剂DMSO量为菌液量 2倍 ,最大吸收波长范围为 51 0～ 530nm。

噻唑蓝比色法测定化学物皮肤致敏性的研究

目的:研究噻唑蓝比色法在检测和评价化学物皮肤接触致敏性中的应用。方法:将致敏物质肉桂醛、DNCB和化妆品纤体精华液、防晒型营养水分别对BALB/c小鼠双耳进行连续3 d染毒,第5天取小鼠耳部淋巴结制备单细胞悬液,用噻唑蓝比色法检测淋巴细胞增殖,用方差分析进行比较。同时采用传统实验方法-局部封闭涂皮法对DNCB、纤体精华液与防晒型营养水进行皮肤变态反应试验。结果:与溶剂对照组比较,肉桂醛与DNCB能引起淋巴细胞的显著增殖,与空白对照组比较,纤体精华液与防晒型营养水未引起淋巴细胞明显增殖,经传统实验方法检测证实,DNCB引起75%动物皮肤变态反应,而纤体精华液与防晒型营养水未引起动物皮肤变态反应。结论:噻唑蓝比色法具有评估化学物皮肤接触致敏性的能力,对化妆品皮肤致敏性评价具有较好的应用前景。

噻唑蓝比色法检测变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌的研究

目的探讨噻唑蓝(MTT)法用于口腔常见细菌(变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌)活菌计数的可行性及具体应用过程中的实验条件。方法本实验以菌落形成单位(CFU)法为标准对照。实验通过改变比色的波长、反应时间、试剂剂量、细菌菌龄等实验条件,获得MTT法测量常见口腔细菌的一系列参数,对变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌进行活菌计数,并与CFU法所测的细菌数量相比较。结果 MTT法在测量变异链球菌时,最佳的检测波长为510nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105～1.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量血链球菌时,最佳的检测波长为545nm,最佳的测定细菌范围是1.5×105～2.0×107CFU·mL-1。MTT法在测量伴放线菌嗜血菌时,最佳的检测波长为557nm,最佳的测定细菌范围是1.0×106～5.0×107CFU·mL-1。MTT法与菌落形成单位法的测量结果是一致的,并且对于不同菌龄的变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌均适用。结论 MTT法可以用于检测变异链球菌、血链球菌、伴放线菌嗜血菌等口腔常见细菌的活菌数量,并且具有快速、方便等优点。

用四噻唑蓝比色法测定氯化镉的细胞毒性

用四噻唑蓝比色法测定氯化镉的细胞毒性吕中明１张伟亻告２杨永年３宋玲３１．江苏省卫生防疫站毒理研究室（南京２１０００９）２．江苏省实验动物中心细胞室３．南京医科大学卫生毒理研究室１９８３年由Ｍｏｓｍａｎｎ提出的四噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法，是根据活细胞的线...

噻唑蓝比色法与~3H─TdR释放法检测人LAK细胞活性的比较

噻唑蓝比色法与３Ｈ┐ＴｄＲ释放法检测人ＬＡＫ细胞活性的比较秦北宁沈丽英（第四军医大学西京医院呼吸内科西安７１００３３）关键词噻唑蓝比色法３Ｈ－ＴｄＲ释放法ＬＡＫ细胞活性中图号Ｒ４４６．０１噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法是一种检测细胞生长和存活情况的新方法，其...

MTT比色法检测赖氨酸、蛋氨酸对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响

采用噻唑蓝比色法检测赖氨酸、蛋氨酸对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响。赖氨酸和蛋氨酸在培养基中的添加浓度分别为0、0.05、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8、25.6mmol/L和0、0.025、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8mmol/L;培养期为24、48和72h。结果表明,赖氨酸在0.8-1.6mmol/L、蛋氨酸在0.4-0.8mmol/L浓度范围内对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞增殖的促进作用最明显且在48h时增殖作用最强(P<0.0001)。

MTT比色法在干扰素生物学活性测定中应用的探讨

目的探讨MTT比色法能否提高干扰素的生物学活性测定(细胞病变抑制法)结果的准确性。方法比较在干扰素的生物学活性测定后期,采用结晶紫染色脱色后比色的方法(方法一)和采用加入噻唑蓝(MTT)后裂解比色的方法(方法二),经过6次的比较证明两种方法哪种测定的结果的准确性更高。结果采用方法一测得的多次结果之间产生的偏差较大,单次结果的可信度较低;而采用方法二测得的多次结果之间产生的偏差较小,单次测定结果的相关系数R值不因方法的改变而有所降低,单次测定结果的准确度较高。结论采用MTT比色法可提高干扰素的生物学活性测定结果的准确性。

肿瘤细胞计数——单波长噻唑蓝比色分析法

将噻唑蓝（ＭＴＴ）与肿瘤细胞（ＭＧｃ８０－３）共育４～６ｈ，产生ＭＴＴ甲Ｚａ蓝色结晶，溶解后，用酶标比色计采用单一检测波长４９２ｎｍ测定ＯＤ值，可以很好地反映肿瘤活细胞数目的变化，与细胞增殖数目成直线关系。与双波长ＭＴＴ比色分析法、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法比较，三者与肿瘤活细胞数目的相关密切无显著差异，可互相代替；而单波长ＭＴＴ比色分析法具有简单、方便、客观、准确、重复性好、无同位素污染等优点。

噻唑蓝(MTT)法空斑形成实验在病毒检测中的应用

目的:探讨噻唑蓝(MTT)法空斑形成实验在病毒滴度检测中的应用。方法:用噻唑蓝(MTT)代替常规的中性红作为染色剂进行空斑形成实验MDCK和Hep-2细胞在12孔板上形成单层后,分别感染流感病毒和呼吸道合胞病毒,加入单层琼脂糖代替传统双层琼脂糖培养3-4天,用噻唑蓝(MTT)代替常规的中性红作为染色剂计数空斑。结果:⑴MTT法空斑形成实验检测流感病毒和RSV病毒滴度操作简单,时间短;⑵与常规中性红法空斑形成实验比较检测病毒滴度没有差异;⑶MTT法可以避免假空斑形成。结论:MTT法空斑形成实验可替代中性红法空斑形成实验,且更快速、准确。

噻唑蓝显色法测定肝细胞再生因子的活性

采用改良的简便、快速的噻唑蓝比色分析法测定肝细胞再生刺激因子的活性和特异性。选用的细胞株为肝源性细胞——人肝癌细胞HTC7721和非肝源性细胞——人肺癌细胞A549,结果显示肝细胞再生刺激因子对HTC7721细胞有增殖作用。

应用噻唑蓝法初步研究兔外周血单个核细胞转化的条件

应用噻唑蓝法研究了ＰＨＡ－Ｐ引起兔外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）转化的最适条件，培养时间为４８ｈ，ＰＢＭＣ密度为５×１０１２／Ｌ，ＰＨＡ－Ｐ的终浓度为０．５ｍｇ％。并测定了在此最适条件下的吸光值（ＯＤ），为０．２７６±０．１４２。

一种抗癌药物的体外筛选方法—MTT比色分析法

本文主要介绍一种国外目前研究十分活跃的MTT法。由于它不涉及使用同位素，操作简单、快速、准确，适用于基层单位，是肿瘤学、免疫学研究极为简便的方法。

噻唑蓝比色法用来研究人淋巴细胞和小鼠巨噬细胞的活性

我们采用噻唑蓝(MTT)比色法来研究人淋巴细胞和小鼠巨噬细胞的活性。应用中药多糖、人工合成多糖、细菌多糖、有丝分裂素,升高cAMP浓度的药物直接活化人淋巴细胞;应用中药多糖、人工合成多糖、细菌多糖和升高cAMP浓度的药物,直接活化小鼠巨噬细胞。结果显示黄芪甙和两种升高CAMP浓度的药物对上述两种细胞有直接活化作用,尤其是两种药物相加,呈现明显地协同作用。阐明人淋巴细胞和小鼠巨噬细胞活化与胞内cAMP浓度上升相关。

小鼠局部淋巴结分析试验噻唑蓝比色法实验条件的研究

目的研究并初步制定小鼠局部淋巴结分析试验噻唑蓝比色法(LLNA-MTT法)评价化学品致敏性的判定标准。方法采用正交设计,对LLNA(MTT法)试验的3个关键因素各设3个水平进行试验,以确定最佳水平,并对小鼠淋巴结重量、淋巴细胞计数、吸光度值做相关性分析。结果采用正交试验结果的最佳水平进行试验,2,4-二硝基氯代苯(DNCB)与对照组比较,小鼠淋巴结重量,淋巴细胞计数及吸光度值均增加,且有统计学意义(P<0.01),刺激指数大于3,提示具有致敏性。结论初步制定了小鼠局部淋巴结分析试验评价皮肤变态反应的标准。