噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶抑制药三维定量构效关系研究

目的:通过构建噻嗪类11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)抑制药的三维定量构效关系(3D-QSAR)模型,用于其结构改造及发现具有更高生物活性的11β-HSD抑制药。方法:基于骨架叠合的模式,采用比较分子力场分析(CoMFA)的方法,构建噻嗪类衍生物定量构效关系模型,并用分子对接的方法对已构建的3D-QSAR模型进行验证。结果:得到了高精度的11β-HSD抑制药的3D-QSAR模型(CoMFA:q^2=0.346,r^2=0.850;其中q^2为交叉验证系数,r^2为非交叉验证系数)。结论:本文构建的3D-QSAR模型可为11β-HSD抑制药骨架各个位点的化学修饰,实施定向合理设计,为开发新型抗2型糖尿病药物提供理论基础。

11β-羟类固醇脱氢酶1抑制剂改善肥胖大鼠胰岛素抵抗机制的初步研究

目的研究11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)抑制剂对饮食诱导肥胖(DIO)大鼠胰岛素敏感性的影响及其可能的机制。方法选择24只雌性SD大鼠为研究对象,随机分为11β-HSD1抑制剂组(n=12)和对照组(n=12);每组再按食物不同分为普食组(n=6)和高脂组(n=6)。DIO造模成功后,抑制剂组大鼠予11β-HSD1抑制剂(20 mg/kg)灌胃,对照组大鼠给予生理盐水灌胃(20 mg/kg),2次/d,持续10 d;抑制剂组在灌胃前后分别称体质量,之后分别行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT),采血时间点分别为0、15、30、60和120 min,观察血糖及胰岛素敏感性的变化。采用Real-time PCR测定肝脏11β-HSD1、过氧化物酶体增殖剂激活受体-α(PPAR-α)、PPAR-γ和葡萄糖激酶(GcK)mRNA的表达。结果 11β-HSD1抑制剂灌胃后结果显示:抑制剂高脂组大鼠的体质量、血糖和胰岛素水平较灌胃前均有下降;抑制剂普食组大鼠肝脏11β-HSD1的表达上调;抑制剂组和对照组的PPAR-α、PPAR-γ、GcK mRNA的表达均升高,与普食组比较,高脂组升高更明显(P<0.01)。结论 11β-HSD1抑制剂可减轻大鼠体质量、改善DIO大鼠的胰岛素抵抗和增加胰岛素敏感性,这可能与增加葡萄糖的利用、改善脂代谢有关。

11β-羟类固醇脱氢酶Ⅰ型在代谢综合征中的作用及药物干预研究进展

综述11β-羟类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-HSD1)在代谢综合征中的作用及药物干预研究概况。11β-HSD1在脂肪细胞中通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化介导胰岛素抵抗;己糖-6-磷酸脱氢酶可活化11β-HSD1,引起胰岛素抵抗;11β-HSD1对海马(杏仁核)-HPA轴有双向调节作用。研究发现,某些中药单体及复方可通过11β-HSD1治疗代谢综合征。

11β-羟类固醇脱氢酶2在恶性淋巴细胞中的表达及与其对糖皮质激素敏感性关系

本研究讨论11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)在3种来源淋巴的细胞系中的表达及其与恶性淋巴细胞对糖皮质激素敏感性的关系。利用实时定量PCR及Western blot方法检测急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞系、淋巴瘤Daudi和Raji细胞系、以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中11β-HSD2的表达;用流式细胞术检测糖皮质激素(GC)对3种淋巴肿瘤细胞的诱导凋亡情况;应用台盼蓝拒染法观察不同浓度GC对Jurkat细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测GC联合11β-HSD2抑制剂18β甘草次酸(18β-GA)对Jurkat细胞凋亡影响。结果显示,11β-HSD2在Jurkat细胞中高度表达,而在Daudi、Raji细胞以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中不表达。Jurkat对GC诱导的凋亡耐受,而Daudi和Raji对GC诱导的凋亡敏感。18β-GA能增加Jurkat细胞对GC诱导凋亡的敏感性。结论:11β-HSD2与Jurkat细胞对GC耐药有关,干预11β-HSD2可作为改善GC耐药的潜在靶点。

厚朴中的厚朴酚选择性抑制11β-羟类固醇脱氢酶

11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)在糖皮质激素的同化作用中起关键作用。抑制该酶的活性可引起糖皮质激素在循环系统及特殊的细胞及组织中的蓄积。甘草中的甘草次酸是一种11β-HSD强抑制剂,可引起和假高醛固酮血症相似的高血压症,

17β-HSD3抑制剂抗前列腺癌活性及急性毒性的研究

目的探讨17β-羟基类固醇脱氢酶3(17β-HSD3)抑制剂的抗前列腺癌活性、药代动力学及其急性毒性。方法取对数生长期人雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞,设置空白对照组(Con组)、姜黄素组(Cur组,Cur 150µmol/L)、雄激素受体(AR)抑制剂组(AR inhibitor组,AR抑制剂5µmol/L)和姜黄素类似物H7组(H7组,H7150µmol/L),分组处理后采用xCELLience RTCA DP细胞分析仪检测各组细胞活性、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测细胞中Caspase-3、AR蛋白表达。C57小鼠32只,采用随机数字表法分成4组(n=8),分别为空白对照组和姜黄素类似物H7高、中、低剂量组。用1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解H7(100、50、25 mg/kg),每天灌胃1次,空白对照组小鼠灌胃1%CMC-Na,观察小鼠有无死亡及异常现象,14 d后取材,苏木素-伊红(HE)染色,观察肝脏和肾脏的病理形态学变化。SD大鼠10只,用1%CMC-Na溶解H7(5 mg/kg)灌胃后,高效液相色谱仪(HPLC)检测血药浓度,分析药代动力学参数。另取SD雄性大鼠10只,H7(5 mg/kg)灌胃30 min后,HPLC检测大鼠脑、肝、脾、肺、小肠、胃、肾、心和睾丸中药物浓度,考察药物组织分布。结果与Con组比较,Cur组、AR inhibitor组和H7组LNCaP细胞的细胞指数(CI值)显著下降,凋亡率明显升高,Caspase-3蛋白表达水平明显升高,而AR蛋白表达水平降低(P<0.05);H7组凋亡率较Cur组和AR inhibitor组明显升高(P<0.05)。连续灌胃H714 d,小鼠未出现活动增加、流涎、抽搐、昏迷等异常现象。与Con组相比,小鼠肝脏和肾脏未见明显的病理形态学变化。药代动力学参数结果显示,测出血药浓度-时间曲线下面积(AUC)为(557.31±36.12)mg/(L·h);峰浓度(Cmax)为(36.92±1.29)mg/L;最高峰时间(t_(max))为2 h;消除半衰期(t_(1/2))为(22.13±1.74)h。H7在小肠中的浓度约是脑组织中的5000倍。结论H7作为17β-HSD3抑制剂,具有明显抗激素依赖性前列腺癌的活性和良好的药代动力学参数,无明显的急性毒性作用,以胃肠吸收为主,具有进一步研究开发前景。

加味三棱丸抗子宫内膜异位症内膜细胞雌二醇生成机制的研究

目的:探讨加味三棱丸(SLW)抗子宫内膜异位症内膜雌激素生成的作用机制。方法:以SLW含药血清作用于体外培养的内异症在位内膜细胞,RT-PCR检测子宫肌瘤组、给予SLW含药血清前后内异症组类固醇类产生因子-1(steroidgenic factor-1,SF-1)、小鸡卵清蛋白上游启动转录因子(chicken ovalbumin upstream-transcription factor,COUP-TF),17-β-羟甾类脱氢酶1(17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 1,17-β-HSD 1)和17-β-羟甾类脱氢酶2(17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 2,17-β-HSD 2)mRNA的表达。Western blot检测上述各组SF-1和COUP-TF蛋白的表达。结果:子宫肌瘤对照组SF-1,17-β-HSD 1 mRNA及SF-1蛋白的表达明显低于内异症内膜组,而COUP-TF,17-β-HSD 2 mRNA及COUP-TF蛋白的表达明显高于内异症在位内膜组,差异有极显著性(P<0.01)。以内异症在位内膜为对照,给予对照组SLW 5.0,2.5 g.kg-1.d-1大鼠含药血清(体积分数为0.1)作用48 h后,COUP-TF mRNA和蛋白、17-β-HSD 2 mRNA的表达明显高于对照组,而SF-1 mRNA和蛋白、17-β-HSD 1 mRNA的表达明显低于对照组,差异有显著性或极显著性(P<0.05或P<0.01)。SLW 1.25 g.kg-1.d-1组COUP-TF mRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,SF-1蛋白和17-β-HSD 1 mRNA表达明显低于对照组(P<0.01),而SF-1,17-β-HSD 2 mRNA的表达却无明显改变。结论:加味三棱丸可降低子宫内膜异位症在位内膜细胞分泌雌二醇的水平,与其抑制SF-1和17-β-HSD 1,增强COUP-TF和17-β-HSD 2的表达密切相关。