噻枯唑对水稻白叶枯病菌作用机制研究初报

透射电镜观察，噻枯唑在离体条件下能使水稻白叶枯病菌菌体内形成许多颗粒状物质，并出现大的空泡结构。噻枯唑在浓度较低时能刺激菌体的呼吸作用，对菌体胞外多糖的产生有抑制作用，但对菌体胞外水解酶的活性没有影响。噻枯唑能和金属Ｃｕ＋＋形成螯合物，但这种螯合作用没有改变噻枯唑的抑菌活性。

水稻白叶枯病菌对噻枯唑的抗药性监测

采用活体寄主法和离体含药平板法 ,测定了 1999年安徽省滁州市田间水稻白叶枯病菌对噻枯唑的抗药性。结果表明 ,在水稻活体上存在噻枯唑抗药突变体 ,其比例为 6 7 6 5 % ,比 1997、1998年有较大程度升高 ,但是离体含药平板上未能监测到抗药突变体。

水稻白叶枯病菌噻枯唑抗药突变体生物学性质研究

引起水稻白叶枯病的 Xanthomonasoryzae在用药剂处理过的水稻上鉴别为抗噻枯唑的突变体。致病力和胞外酶活性测定结果表明 ,抗药性突变体与野生敏感菌株没有明显差异 ,但抗药性突变体对离体稻叶的伤害作用及引起水稻体内脂质过氧化程度强于敏感菌株 ;胞外产物可以降低水稻白叶枯病菌对噻枯唑的敏感性 ,病菌产生抗药性与胞外产物关系密切 ;抗药突变体在无药平板上转移 10代后 ,抗药水平明显下降 ,但致病力变化在不同的突变体间表现出较大差异 ,有的保持较强的致病力 。

高效液相色谱法测定20%增效噻枯唑可溶性粉剂中噻枯唑含量

建立了 2 0 %增效可溶性噻枯唑 ( MBAMT)粉剂中有效成分 MBAMT的高效液相色谱 ( HPLC)分析方法。采用硅胶柱 ,正已烷∶无水乙醇 =9∶ 2 ( V/V )为流动相 ,所得结果良好 ,平均回收率为 93.75 % ,变异系数为 2 .1 8%。方法简易、快速、准确 。

Ce(Ⅳ)-Rhodamine B-噻枯唑体系化学发光法测定噻枯唑

在酸性介质中,Ce(Ⅳ)可以氧化噻枯唑产生较弱的化学发光,罗丹明B可以显著增强此发光,且增加的发光强度与噻枯唑的质量浓度在一定范围内呈良好的线性关系,由此建立了测定噻枯唑的流动注射化学发光新方法。该法的检出限为12μg/L(3σ),线性范围为30～1 000μg/L,对500μg/L的噻枯唑连续平行测定11次,其相对标准偏差(RSD)为2.4%。用于测定环境水样中和大米中噻枯唑含量,回收率为96.4%～104.1%。

高锰酸钾-甲醛-噻枯唑化学发光体系测定噻枯唑

在酸性条件下，甲醛与高锰酸钾能够产生较弱的化学发光，而噻枯唑的存在能够大大地增强该化学发光强度。在一定浓度范围内，增加的发光强度与噻枯唑的浓度呈良好的线性关系，由此建立了测定噻枯唑的流动注射化学发光新方法。该方法的线性范围为0．03～0．8mg／L和1．0～5．0mg／L，检出限为8．9μg／L，对0．3mg／L噻枯唑平行测定11次，其相对标准偏差为3．9％。方法用于测定环境水样中噻枯唑含量，回收率为95．4％～104．9％。

反相液相色谱技术检测农田大气和水稻茎叶、谷壳、稻米中噻枯唑分析方法研究

本文报道了用反相液相色谱技术检测噻枯唑残留分析方法。农田大气检测极限6.5ppb,吸收回收率92.08±4.99％,C.V.4.11％;茎叶、谷壳、稻米检测极限25Ppb;添加0.1～5ppm含量范围内,茎叶、谷壳回收率91.45±4.87％,C.V.3.01％～6.41％;稻米回收率92.37±4.93％,C.V.2.18％～5.49％。

噻枯唑在水稻上的残留动态研究

南方稻区使用噻枯唑防治水稻白叶枯病，在推荐剂量下，叶面喷雾，早、晚稻（叶）上残留随时间呈指数型模式降解，半衰期（Ｔ＿１／２）１．３４－４．３３ｄ。水稻全生长期使用８次之内，距收期２０ｄ，在稻米、谷壳中最终残留量皆低于ＭＲＬ值一个量级水平，从防治效果和安全使用上，是合理、可行的。

流动注射化学发光法测定噻枯唑

研究发现,在pH为2～3的范围内,Fe3+和过氧化氢反应产生的羟基自由基(·OH)可以氧化噻枯唑产生较弱的化学发光,罗丹明6G可以大大增强此发光,且增加的发光强度与噻枯唑的质量浓度在一定范围内呈良好的线性关系,由此建立了测定噻枯唑的流动注射化学发光新方法。该法的检出限为19μg/L(3σ),线性范围为0.03～5.0mg/L,对3.0mg/L的噻枯唑连续平行测定11次,其相对标准偏差(RSD)为3.1%。该法已成功测定了环境水样和大米中加入的噻枯唑含量,结果令人满意。

稻区使用噻枯唑在农田大气和非目标物上的污染动向的研究

稻区使用噻枯唑防治白叶枯病,毗邻稻田的非目标作物(蔬菜)区农田大气中含量可达ppb～ppm级水平,随气流飘移、扩散,沿水平向呈指数型分布.距用药区2m之内,各种蔬菜作物上的残留高达20～30ppm,2～10m内全部超标,30m处仍处于MRL值同一量级,稻田用药是构成蔬菜区的主要污染源之一.

tal4基因在水稻白叶枯病菌PXO99～A对噻枯唑抗性中的作用

类似转录激活子(transcription activator-like effector,TALE)是植物病原细菌通过Ⅲ型泌出系统(T3SS)分泌到寄主细胞中的效应蛋白,其编码基因为tal基因。tal4基因是水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)PXO99A中19个tal基因中的一个,但其功能未知。本研究通过测定tal4基因缺失突变菌株在寄主水稻上的毒力,对温度、盐、酸碱等胁迫的反应以及对杀菌剂的敏感性来挖掘tal4基因的功能。通过同源交换,对PXO99A中的tal4基因进行敲除,获得了tal4基因缺失突变菌株PXO99Δtal4。将携带tal4编码基因的黏粒pHZtal4电击转化到PXO99Δtal4感受态细胞中,获得回补菌株C-Δtal4。用液体培养法测定了PXO99A、PXO99Δtal4及C-Δtal4在不同温度、盐和酸碱胁迫下的生长情况。在NA平板及寄主水稻上进行PXO99Δtal4对噻枯唑敏感性检测,并通过实时定量PCR检测了菌株中与抗药性相关的核糖体RNA 16S(ribosomal RNA 16S,rrs)和30S核糖体蛋白S12(30S ribosomal subunit protein S12,rpsL)基因的表达情况,从转录水平探究tal4基因在菌株抗药性中的作用机制。对苗期水稻的接种结果表明,PXO99Δtal4在水稻上形成的病斑长度及在水稻叶片中的定殖能力与PXO99A相比无明显变化,tal4基因的缺失不影响水稻白叶枯病菌在水稻上的毒力。PXO99Δtal4在温度、盐和酸碱等胁迫条件下的生长能力与PXO99A一致。在喷施噻枯唑的水稻上和含噻枯唑的NA平板上,PXO99Δtal4对噻枯唑的敏感性较PXO99A明显增强。噻枯唑对PXO99Δtal4的最低抑制浓度(MIC)为70μg·mL-1,显著低于对PXO99A的最低抑制浓度(110μg·mL-1),而噻枯唑对PXO99Δtal4的抑制中浓度EC50值为PXO99A的77.9%。tal4基因可以恢复PXO99Δtal4对噻枯唑的敏感性至PXO99A水平。实时荧光定量PCR测定发现,PXO99Δtal4中rrs基因的表达量显著下降,仅为PXO99A的38%,而rpsL基因的表达量与PXO99A没有显著差异。上述结果表明:PXO99A中tal4基因的缺失对病原菌的毒力没有明显影响,但在病原菌对杀菌剂的抗性中起一定的作用。本研究首次发现,水稻白叶枯病菌效应蛋白基因tal参与了病原菌对杀菌剂噻枯唑的抗药性。

对噻枯唑具有抗性的水稻白叶枯病菌菌株的性质

对田间和室内分别筛选的抗噻枯唑的水稻白叶枯病菌菌株性质研究发现:室内筛选的抗药菌株在水稻上失去致病性,而田间抗药菌株在离体下则不表现抗药性;抗噻枯唑的菌株对敌枯唑表现交互抗性,对叶枯净不表现交互抗性;抗性菌株与敏感菌株混合接种于无药水稻上发现,抗性菌株的竞争力稍低于敏感菌株;供试的抗性菌株在无药平板上转移6代后,抗性仍很稳定,但在无药的水稻上反复接种、分离4代后,抗性水平有所下降。

抗噻枯唑和抗叶枯净的水稻白叶枯病菌株的适应度比较

将水稻白叶枯病噻枯唑抗性菌(Sa^r)和叶枯净抗性菌(P^r)的适应度(Fitness)特性进行了比较。当Sa^r和P^r与敏感菌(S)的等量混合物在植株上繁殖时,Sa^r和P^r竞争不过S,但P^r竞争能力较Sa^r强。Sa^r和P^r的致病力与S的无明显差异。但在离体保存时Sa^r和P^r易于丧失致病力。这种致病力的丧失是由于被保存的群体中低致病力的敏感菌比例上升所致,进一步说明Sa^r和P^r的适应度不及S。结果表明,白叶枯病菌抗药性菌适应度较差,在田间不易建立抗性群体,但不排除在高强度选择压力下也会出现抗性群体的可能。P^r在田间则比Sa^r易于建立抗性群体。

拌种灵、叶枯唑和萎锈灵对病菌的毒力机制比较

Virulence of seedvax (amicarthiazol), saikuzuo (bismerthiazol) and carboxin to Xanthomonas citri、X. oryzae pv. oryzae、X.campestris pv. glycines and Rhizoctonia cerealis were determined , and the relation of their activity with their composition were analysised , Furthermore, their effects on growth, respiration and fungiactive mode to X. citri were taken into investigation . The results indicated that virulence mechanism of seedvax is interrelated to that of saikuzuo and carboxin , seedvax possibly attack any targets of the respiration pathway and other unknown bio chemical sites, seedvax is characterized with poly active location when transported in bio metabolic ways.

20%噻森铜悬浮剂对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的田间防效

20%噻森铜悬浮剂是一种新型杀细菌剂。田间试验表明,20%噻森铜悬浮剂使用剂量为有效成分225-300 g/hm^2时,在防治适期,连续用药2次,对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防效均可达70%,与20%噻枯唑可湿性粉剂300 g/hm^2防效差异不显著。20%噻森铜悬浮剂可用于对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防治。

塞枯唑测定方法改进研究

报道塞枯唑新的电位法，有效地排除了酸的干扰、滴定曲线上第一个突跃为酸。

噻森铜对水稻白叶枯病和细菌性条斑病室内杀菌活性

噻森铜是一种新杀细菌剂。室内活体杀菌活性测定表明,噻森铜对水稻白叶枯病菌和细菌性条斑病菌的毒力EC50分别为160.69、214.47mg/L,与噻枯唑差异不显著;离体抑菌活性测定显示,噻森铜抑菌作用明显低于噻枯唑,噻森铜的作用机制可能不同于噻枯唑。噻森铜具有良好的开发和应用前景。

水稻白叶枯病杀菌剂叶枯唑

本品采用纯品高质噻枯唑原药加10％国外进口助剂，在相同用量下使用，其药效为普通叶青双的2．5～3倍．可广泛用于水稻白叶枯病、细菌性条斑病等细菌性病害的防治。本品药效稳定，持效期长，预防和治疗作用均相当出色：安全性好，在作物上正常使用均不产生药害。

叶枯唑

本品采用纯品高质噻枯唑原药加10％国外进口助剂，在相同用量下使用．其药效为普通野双青的2．5～3倍．可广泛用于水稻白叶枯病、细菌性条斑病等细菌性病害的防治。本品药效稳定，持效期长，预防和治疗作用均相当出色：安全性好，在作物上正常使用均不产生药害。