获得性囊性纤维化跨膜传导调节因子功能障碍及炎性因子在儿童鼻-鼻窦炎中的表达特征分析

目的探讨获得性囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)功能障碍及炎性细胞因子在儿童鼻-鼻窦炎发展中的作用。方法纳入2021年1—12月在首都医科大学附属北京儿童医院耳鼻咽喉头颈外科因急慢性鼻-鼻窦炎行鼻内镜手术治疗31例患儿,其中慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)患儿17例(CRS组),急性细菌性鼻窦炎(acute bacterial rhinosinusitis,ABRS)患儿14例(ABRS组)。收集所有患儿的全血、鼻黏膜及鼻息肉样本,应用全外显子二代测序技术检测全血样本中CFTR基因的表达情况,q RT-PCR检测息肉和黏膜组织中CFTR mRNA的表达水平,微量样本多重蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测息肉和黏膜组织中炎性细胞因子的表达水平。结果根据CFTR基因检测结果,所有入组患儿均排除囊性纤维化。ABRS组鼻黏膜组织CFTR mRNA的表达水平明显低于CRS组,而CRS组鼻息肉组织CFTR mRNA的表达水平明显低于鼻黏膜组织。ABRS组鼻黏膜组织γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-13、IL-6、IL-8的表达水平明显高于CRS组(P<0.05),而CRS组鼻息肉组织IL-6、IL-8、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达水平明显高于鼻黏膜组织(P<0.01)。结论获得性CFTR功能障碍及与中性粒细胞趋化相关的炎性因子在ABRS中的作用更为明显,在CRS息肉的发生发展中也可能起到一定作用。

囊性纤维化跨膜传导调节因子在上皮性卵巢癌中的表达及机制研究

目的分析囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在人肿瘤组织中的表达特征,探讨其临床应用价值。方法采用甲基化特异性PCR检测上皮性卵巢癌组织中CFTR甲基化发生率;采用免疫组织化学法检测卵巢癌组织标本及良性肿瘤组织中CFTR蛋白的表达,分析其表达与临床病理分级的关系及CFTR对卵巢癌细胞侵袭能力的影响。结果卵巢癌中CFTR甲基化发生率大于50%,同时其蛋白表达明显降低,且卵巢癌中CFTR的表达与卵巢癌的病理分级呈正相关性。CFTR去甲基化处理后,细胞凋亡增加。结论 CFTR在卵巢癌中发挥抑癌作用,可能成为新的肿瘤标志物用于卵巢癌的早期诊断及对病情进展的检测。

囊性纤维化跨膜传导调节因子抑制药在分泌性腹泻中的应用研究进展

分泌性腹泻威胁着全球健康,是儿童发病和死亡的主要原因之一。肠上皮细胞腔内Cl-通道激活导致肠道液体过度分泌是肠毒素引起腹泻的主要原因。在霍乱及其他细菌肠毒素引发的腹泻中,囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是主要的c AMP-调节Cl-通道,其主要功能是促进上皮细胞液体分泌。利用肠上皮细胞CFTR抑制药抗分泌性腹泻是一种新途径。已有的CFTR抑制药有噻唑啉酮类、甘氨酸酰肼类和喹喔啉二酮等。同时,从天然植物中提取分离的一些成分也具有CFTR抑制作用,但研究还不够深入。因此,对CFTR抑制药的研究进展进行了综述。

囊性纤维化跨膜传导调节因子基因突变与呼吸道疾病

囊性纤维化跨膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）是一种环腺苷酸（cAMP）激活的ATP门控性氯离子（Cl-）通道，广泛分布于人体具有分泌功能的组织中。CFTR突变会导致分泌腺功能紊乱，继而引起囊性纤维化病变（cystic fibrosis．CF）。CF是白种人中最常见的常染色体隐性遗传性疾病，可引起全身各处多种疾病.

与慢性胰腺炎相关的囊性纤维化跨膜传导调节因子

慢性胰腺炎(CP)是慢性胰腺组织结构不可逆损坏与功能丧失的炎症性疾病。近几年来,国外学者研究发现,人类常染色体隐性遗传基因囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)的某些基因突变及多态现象与慢性胰腺炎相关[1,2]。本文就CFTR的结构、功能、基因突变和多态性及与慢性胰腺炎相关性等方面作一简要综述。

滋阴抑亢调冲汤对卵巢过度刺激综合征模型大鼠囊性纤维化跨膜传导调节因子的影响

[目的]观察滋阴抑亢调冲汤对卵巢过度刺激综合征模型大鼠腹腔毛细血管通透性、血清雌二醇(E2)含量及卵巢组织囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)水平的影响,探讨其对卵巢过度刺激综合征的疗效及机制。[方法]20日龄Wistar大鼠60只,随机分成正常组、模型组、滋阴抑亢调冲汤组及吲哚美辛组,每组15只。除正常组,另三组采用孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素建立卵巢过度刺激综合征大鼠模型。分别给予生理盐水、滋阴抑亢调冲汤或吲哚美辛灌胃,采用酶联免疫法检测大鼠血清雌二醇含量、免疫组织化学方法及免疫印迹法检测大鼠卵巢组织中CFTR的表达。[结果]滋阴抑亢调冲汤效果与吲哚美辛类似,能显著降低大鼠血清E2含量(P<0.01)、卵巢组织CFTR蛋白的表达(P<0.01),且在降低腹腔毛细血管通透性方面优于吲哚美辛(P<0.05)。[结论]滋阴抑亢调冲汤可能通过降低血清E2水平、降调卵巢组织CFTR蛋白表达及改善腹腔毛细血管的通透性发挥治疗卵巢过度刺激综合征的作用。

中国囊性纤维化患儿囊性纤维化跨膜传导调节因子基因突变分析

目的总结中国囊性纤维化（cystic fibrosis，CF）患儿囊性纤维化跨膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）的基因突变谱。方法检索1975年1月至2017年3月中国知识基础设施数字图书馆、万方数据库、维普数据库、美国国立医学图书馆数据库网上检索系统（PubMed），总结检索到的中国CF患儿及广州医科大学附属第一医院确诊的1例CF中国患儿CFTR基因突变情况。纳入标准：公开发表的文献；报道对象为确诊的中国CF患儿并有CFTR基因突变。排除标准：重复报告文献；未经确诊的病例报道；报道病例无CFTR基因突变资料。结果共58例CF中国患儿。61种CFTR基因突变，依次为：c.2909G→A（p.G970D）（出现9次），1898＋5G→T（该突变在高加索人种未发现）、c.263T→G（分别出现6次），c.3196C→T、c.1766＋5G→T、c.3068 T→G（分别出现5次），2215insG、c.1666A→G（分别出现4次），G2816A、c.293A→G、c.595C→T、c.326A→G（分别出现3次）。发现新突变c.3635delT、c.2907A→C、c.648 G→A（W216X）、c.960_961insA （1092insA）、c.1075C→T、c.1699G→T、c.2491-126T→C、c.3307delA和c.110 C→G。未发现△F508突变。结论中国CF患儿最常见的CFTR基因突变是c.2909G→A，未发现高加索人最常见的△F508突变。中国CF患儿CFTR基因突变谱与欧美国家存在较大差异。

先天性双侧输精管缺如患者囊性纤维化跨膜传导调节因子基因的检测

目的探讨先天性双侧输精管缺如（CBAVD）患者与囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）基因突变的关系。方法收集2007年5月至2009年5月85例CBAVD患者。CBAVD诊断依据：无精子；性激素4项正常；双侧输精管未触及；双睾丸体积正常，附睾饱满淤积。另设健康已生育男性85例作为对照。抽取外周血，应用聚合酶链反应一单链构象多态及PCR产物直接序列测定法检测患者及对照组CFTR基因第10，11外显子，比较两组的突变情况。结果CBAVD组85例，CFTR基因突变10例，占11．8％，分别是1556V突变4例，M469V突变2例，E527N、△F508、L558S、$485C各1例。对照组85例均未见突变。两组问比较差异有统计学意义（X2=8．606，P=0．003）。结论CBAVD主要由CFTR基因突变引起，CFTR基因突变的位点与频率与西方白种人有所不同。

囊性纤维化跨膜传导调节因子对脑缺血再灌注损伤小鼠线粒体功能及氧化应激的影响

目的探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)对脑缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)小鼠线粒体功能及氧化应激的影响。方法 60只C57BL小鼠随机分为对照组、IRI组、Forskolin(FSK)组和FSK+IRI组各15只。IRI组和FSK+IRI组采用改良四血管闭塞法制备脑IRI模型,对照组和FSK组仅手术、不制备脑IRI模型。模型制备成功后,FSK+IRI组、FSK组腹腔注射FSK 2mg/kg,IRI组、对照组腹腔注射等量生理盐水;缺血再灌注后48h,检测4组线粒体膜电位、线粒体呼吸控制率(respiratory control rate,RCR)以及线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)水平、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)水平,计算GSH/GSSG;检测线粒体呼吸链complexⅠ和complexⅢ蛋白相对表达量、complexⅠ和complexⅢ活性。结果 IRI组和FSK+IRI组小鼠线粒体膜电位[(224.18±24.51)、(341.46±32.57)mV]、ATP水平[(6.52±1.03)、(13.24±1.65)mol/g]、RCR(2.12±0.64、3.97±0.86)均低于对照组[(437.15±53.14)mV、(19.47±2.64)mol/g、7.84±1.21]和FSK组[(441.05±56.43)mV、(18.93±2.71)mol/g、7.73±1.15](P<0.05),且IRI组低于FSK+IRI组(P<0.05);IRI组和FSK+IRI组小鼠线粒体ROS(2.29±0.56、1.64±0.43)、H2O2(2.24±0.77、1.41±0.52)水平高于对照组(1.28±0.27、0.97±0.35)和FSK组(1.31±0.32、1.03±0.36)(P<0.05),且IRI组高于FSK+IRI组(P<0.05);IRI组和FSK+IRI组线粒体GSH[(0.51±0.24)、(0.94±0.31)nmol/μg]和GSH/GSSG值(0.17±0.04、0.81±0.27)低于对照组[(1.35±0.42)nmol/μg、1.38±0.35]和FSK组[(1.42±0.38)nmol/μg、1.45±0.41](P<0.05),且IRI组低于FSK+IRI组(P<0.05);4组线粒体complexⅠ和complexⅢ蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);IRI组和FSK+IRI组线粒体complexⅠ活性低于对照组和FSK组(P<0.05),且IRI组低于FSK+IRI组(P<0.05);4组线粒体complexⅢ活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论激活CFTR可减轻脑IRI小鼠线粒体氧化应激,保护线粒体功能,发挥脑保护作用。

囊性纤维化跨膜传导调节因子氯离子通道在心脏疾病中作用研究进展

细胞内外带电粒子通过心肌细胞离子通道可产生电位差,传导生物电活动、兴奋心肌细胞、使心肌产生自主电活动,引起心肌收缩。心肌细胞上存在的离子通道主要包括钠离子通道、钾离子通道、钙离子通道、氯离子通道等,参与心肌的代谢过程,是心脏疾病发生、发展的基础。氯离子是最丰富的阴离子,在细胞膜和细胞器膜上广泛存在,参与细胞增殖、凋亡、容量调节、细胞兴奋性调节等多种病理生理过程,囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是重要的氯离子通道,CFTR突变易引起囊性纤维化疾病,主要影响消化道、呼吸道等上皮功能,关于CFTR的研究主要集中在囊性纤维化相关的疾病,近年研究发现CFTR参与心肌缺血、心律失常等心肌疾病的发病过程。本文就CFTR在心脏疾病中作用的研究进展作一综述。

沉默囊性纤维化跨膜传导调节因子对大鼠海马神经元细胞线粒体功能及氧化应激的影响

目的探讨沉默囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在大鼠海马神经元细胞线粒体功能及氧化应激中的作用。方法18只SD大鼠随机分为CFTR小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)组、阴性对照组、空白对照组各6只。分离3组海马神经元细胞,取对数生长期细胞进行实验。CFTR siRNA组神经元细胞转染CFTR siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不转染。转染后培养48 h,采用Western blot法检测3组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,荧光分光光度法检测线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)表达,氧电极法测定线粒体呼吸控制率(respiratory control rate,RCR),荧光素酶发光法检测线粒体三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)浓度,高效液相色谱法检测线粒体谷胱甘肽(glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)表达。结果转染后培养48 h,CFTR siRNA组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量(0.09±0.01)、线粒体膜电位[(247.16±34.28)mV]、ATP[(11.71±2.54)mol/g]、RCR(4.69±0.82)、GSH[(0.71±0.12)nmol/μg]、GSH/GSSG值(0.31±0.08)低于空白对照组[0.42±0.07、(432.18±56.04)mV、(24.18±3.64)mol/g、7.94±1.21、(1.62±0.23)nmol/μg、1.65±0.27]和阴性对照组[0.38±0.06、(434.07±52.13)mV、(22.97±3.43)mol/g、7.83±1.18、(1.57±0.21)nmol/μg、1.63±0.24](P<0.05),线粒体H2O2水平(1.73±0.11)高于空白对照组(1.00±0.02)和阴性对照组(1.08±0.06)(P<0.05);空白对照组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量及线粒体膜电位、ATP、RCR、H2O2、GSH、GSH/GSSG值与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论沉默大鼠神经元细胞线粒体CFTR可引起海马神经元细胞线粒体功能障碍,增强氧化应激反应。

囊性纤维化跨膜调节因子氯离子通道在人肺泡上皮细胞损伤中的保护作用

目的探讨人肺泡上皮细胞囊性纤维化跨膜通道调节因子(CFTR)氯离子(Cl-)通道对肺泡上皮细胞损伤的保护作用。方法采用全细胞膜片钳法,在0mV钳制电压下,对正常A549细胞或H2O2处理(氧化损伤)的A549细胞分别按照不同方式给予4-氯苯[F]异喹啉(CBIQ)、二苯胺-2-羧酸(DPC)及钙通道阻断剂尼卡地平,观察细胞从-90mV至50mV经步阶电压(20mV)刺激后CFTRCl-电流随时间变化的曲线,并绘制电流-电压(I-V)曲线。结果正常及H2O2损伤后的细胞中均记录到典型的CFTRCl-电流,均可被相对特异性的CFTRCl-通道阻断剂DPC抑制。H2O2损伤细胞的CFTRCl-电流较正常细胞明显减小。CBIQ对H2O2损伤细胞的CFTRCl-电流以及被DPC+尼卡地平阻断后的正常细胞中的CFTRCl-电流均有激动作用。结论氧化应激可导致CFTRCl-通道功能异常,CBIQ可以抑制这种作用。CFTRCl-通道激活剂CBIQ可能通过调节CFTRCl-通道和Ca2+通道发挥保护受损细胞的作用。

囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)氯通道对心血管功能影响的研究进展

囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)是一类ATP门控、cAMP依赖激活的氯离子通道,其基本生理功能是调控氯离子分泌与跨膜物质转运。CFTR基因突变导致囊性纤维化(CF)的发生,这是一种罕见却致命的常染色体隐性遗传疾病,主要影响呼吸道、肠道和生殖系统腺上皮功能。现已有针对CF单基因突变的新药上市,这些药物显著改善CF患者呼吸道症状,延长患者生命和改善生活质量。CFTR研究多聚焦于上述CF相关系统,在心血管系统的作用尚未清楚。CFTR参与血管收缩和心肌动作电位形成,近来研究提示CFTR参与心肌缺血和肺动脉高压等心血管疾病的发生发展。

川陈皮素对囊性纤维化跨膜传导调节因子的激活作用

本实验利用荧光淬灭实验和膜片钳技术在稳定表达人CFTR和荧光绿蛋白突变体EYFP/H148Q的Fischer大鼠甲状腺上皮细胞(Fischer rat thyroid,FRT)上,测定川陈皮素(nobiletin)对囊性纤维化跨膜传导因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)氯离子通道的激活作用。结果发现,川陈皮素以剂量依赖的方式激活CFTR氯离子通道的Cl-转运活性,且这种活性是快速、可逆的,并能够被CFTR特异性抑制剂CFTRinh-172完全抑制。初步的分子机制研究表明,川陈皮素是以与CFTR直接作用来激活通道活性的。进一步的研究结果显示,川陈皮素能够有效刺激小鼠气管黏膜下腺液体分泌速度。因此,川陈皮素可能发展成为治疗包括支气管扩张在内的CFTR相关疾病的先导药物。

荷叶碱对野生型和突变型囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道的激活作用

目的:从天然单体化合物中筛选能够激活囊性纤维化跨膜电导调节因子(CFTR)Cl-通道转运活性的激活剂。方法:利用稳定表达人CFTR和对卤族元素碘离子高度敏感的荧光绿蛋白突变体EYFP-H148Q的Fischer大鼠甲状腺上皮细胞为筛选模型,测定386种中药单体化合物对CFTR介导的I-内流速度的影响。结果:发现生物碱类化合物荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTRCl-通道具有激活作用,而对G551D突变型CFTRCl-通道无激活作用。荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTRCl-通道的激活作用具有作用迅速、可逆的特点,并且依赖于细胞内cAMP水平。荷叶碱不提高细胞内cAMP水平,当CFTR磷酸化程度达到最大时仍能进一步激活CFTRCl-通道激活作用,表明它可能是通过与CFTR直接结合而发挥作用的。结论:首次发现荷叶碱对野生型和△F508突变型CFTRCl-通道的激活作用,该天然化合物将在阐明CFR活性机制及作为先导化合物开发与CFTR有关的疾病治疗药物等方面具有重要用途。

木犀草素促进囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道开放

目的:研究木犀草素对依赖于3,5-环腺苷酸(cAMP)的囊性纤维化跨膜电导调节因子(CFTR)Cl-通道的激活作用。方法:利用稳定共表达人CFTR与一种对卤族元素敏感的荧光绿蛋白突变体(EYFP-H148Q)的Fischer大鼠甲状腺(FRT)细胞模型,测定木犀草素对CFTR介导的I-内流速度。结果:木犀草素能够以剂量依赖的方式激活CFTR的I-转运,其对CFTRCl-通道的激活效应具有作用迅速、可逆的特点。木犀草素在发挥激活作用时依赖于腺苷环化酶激动剂For-skolin的存在,其单独与细胞孵育不提高细胞内cAMP的水平。结论:发现了木犀草素能够以剂量依赖方式激活CFTR,并且初步确定了木犀草素通过直接与CFTR结合发挥作用。

囊性纤维化跨膜传导因子与输精管缺如关系的研究进展

囊性纤维化是一种在白种人群中常见的常染色体隐性遗传病,由囊性纤维化跨膜传导因子基因突变所致。囊性纤维化跨膜转导因子(CFTR)基因突变典型的临床病症为慢性肺部疾病等一系列症候群,在男性生殖系统中多表现为先天性双侧输精管缺如(CBAVD)、先天性单侧输精管缺如(CUAVD)和精子质量低下。先天性双侧输精管缺如和部分伴有合并症的单侧输精管缺如可导致男性不育。本文旨在系统综述囊性纤维化跨膜传导因子与输精管缺如关系的最新研究进展。

丹皮酚对囊性纤维化跨膜电导调节因子氯离子通道的激活作用

目的:研究丹皮酚对依赖于3’,5’-环腺苷酸(cAMP)的囊性纤维化跨膜电导调节因子(CFTR)Cl-通道的激活作用。方法:利用Cl-通道细胞荧光测定模型进行测定丹皮酚对CFTR介导的I-内流速度。结果:丹皮酚对野生型和ΔF508突变型CFTR Cl-通道均具有激活作用,而对G551D突变型CFTR Cl-通道无激活作用。丹皮酚在发挥激活作用时具有快速、可逆的特点并依赖于腺苷环化酶激动剂Forskolin的存在。初步确定了丹皮酚通过直接与CFTR结合发挥作用。结论:研究提示CFTR可能是某些中药降压作用药靶之一。此外,本实验为传统中药的降压作用的分子药理学机制作了初步探讨。

囊性纤维化跨膜传导因子基因与男性不育

囊性纤维化(cysticfibrosis,CF)是白种人的一种常见致命性常染色体隐性遗传病,由囊性纤维化跨膜传导因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)基因突变所致。CFTR基因突变在男性不育中多表现为先天性双侧输精管缺如、单侧输精管缺如和精子质量低下。卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术使囊性纤维化患者有了生育后代的机会,但同时可能将突变的基因遗传给下一代。因此,胚胎植入前的遗传学诊断与遗传学风险评估非常重要,应该避免将有基因突变的胚胎植入母体子宫,提高生育质量。

囊性纤维化跨膜转导调节因子的生物学特性及对生殖功能的影响

广泛分布于各个系统的囊性纤维化跨膜转导因子,有着重要的生理功能。其突变引起的囊性纤维化除了引起其他系统的症状,对人类生殖系统也产生重要影响:在男性导致遗传性不育,在女性导致生育率下降。但其机制还有待研究。为探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子的生物学特性和突变对生殖功能的影响及其展望进行如下综述。