囊性纤维化跨膜转导调节器在卵巢过度刺激综合征模型大鼠卵巢中表达的变化

目的建立大鼠卵巢过度刺激综合征(OHSS)模型,研究囊性纤维化跨膜转导调节器(CFTR)在OHSS大鼠卵巢中表达的变化及意义。方法未成年Wistar雌鼠,随机分为过度刺激组和常规刺激组,建立OHSS模型;比较两组间卵巢重量,血雌二醇水平;并分别通过免疫组织化学和免疫印迹法比较两组间卵巢组织中CFTR蛋白表达量的变化。结果过度刺激组大鼠卵巢重量、血雌二醇水平显著高于常规刺激组;免疫组化方法检测到CFTR呈棕黄色颗粒表达于大鼠卵巢黄体细胞以及未排卵泡的黄素化颗粒细胞和卵泡膜细胞胞质,免疫组化和免疫印迹定量分析均显示过度刺激组卵巢CFTR蛋白表达量显著高于常规刺激组。结论注射过量促性腺激素致大鼠血雌二醇水平异常升高,使卵巢内CFTR表达量显著增加,卵巢形成多发性滤泡囊肿和黄体囊肿,间质水肿,体积和重量增加,参与诱发OHSS。

卵巢过度刺激综合征中囊性纤维化跨膜转导调节器的表达

目的:探讨囊性纤维化跨膜转导调节器(CFTR)在卵巢过度刺激综合征(OHSS)发病中的变化及意义。方法:22日龄未成年Wistar雌鼠随机分为过度刺激组(实验组,n=16)和常规刺激组(对照组,n=16),PMSG10IU1d,连续腹腔注射4d,d5注射hCG30IU;对照组PMSG仅注射2d,hCG减量为10IU。测血E2水平,尾静脉注入美兰液,30min后取腹腔灌洗液和卵巢,用分光光度计测定腹腔灌洗液和卵巢组织中美兰含量,以判断腹膜和卵巢血管通透性;采用免疫组织化学法和免疫印记法检测卵巢CFTR蛋白表达量。结果:实验组大鼠卵巢重量、血E2水平、腹腔液和卵巢中美兰含量显著高于对照组;免疫组化法检测到CFTR表达于卵巢黄体细胞以及未排卵泡的黄素化颗粒细胞和卵泡膜细胞胞浆,免疫组化和免疫印记定量分析均显示实验组卵巢CFTR蛋白表达量显著高于对照组。结论:血清E2水平异常升高,使体内CFTR表达量显著增加从而参与OHSS的一些病理生理变化。

囊性纤维化跨膜转导调节器在培养人子宫内膜上皮细胞的表达

目的 探讨雌、孕激素对体外培养人子宫内膜腺上皮细胞囊性纤维化跨膜转导调节器(CFTR)基因和蛋白质表达的影响。 方法 采用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)、原位杂交、免疫组织化学方法检测CFTR mRNA和蛋白质表达量的变化。 结果 RT PCR结果显示单纯雌二醇、雌二醇与孕酮合用、对照组均扩增出特异的 CFTR mRNA条带,孕酮组则未见到;原位杂交结果也证实雌二醇刺激CFTR mRNA的表达(P<0.05),孕酮则抑制CFTR mRNA的表达。免疫组织化学检测子宫内膜腺上皮细胞中CFTR蛋白质含量表明雌二醇显著刺激其生成。 结论 卵巢性激素雌二醇上调、孕酮下调体外培养人子宫内膜腺上皮细胞CFTR mRNA及蛋白质的表达,从而调节月经周期不同时相宫腔液微环境中水与电解质含量,适应不同的生殖阶段。

囊性纤维化跨膜转导调节因子的生物学特性及对生殖功能的影响

广泛分布于各个系统的囊性纤维化跨膜转导因子,有着重要的生理功能。其突变引起的囊性纤维化除了引起其他系统的症状,对人类生殖系统也产生重要影响:在男性导致遗传性不育,在女性导致生育率下降。但其机制还有待研究。为探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子的生物学特性和突变对生殖功能的影响及其展望进行如下综述。

囊性纤维化跨膜转导调节子(CFTR)对肺癌A549细胞恶性特性的影响研究

背景与目的肺癌发病率逐年上升,有必要寻找新型的治疗靶点,而最新研究发现囊状纤维化跨膜转导调节子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)与多种肿瘤的发生和恶性转化有关。本研究探讨CFTR对肺癌A549细胞恶性特性的影响。方法应用CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验以及克隆形成实验等方法分别检测CFTR的表达对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭等细胞恶性特性的影响。同时通过免疫印迹(Western blot)分析CFTR基因表达对肿瘤干细胞相关转录因子表达的影响。结果过表达CFTR基因显著抑制A549细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成等肿瘤恶性特征,而RNA干扰A549细胞CFTR的表达导致细胞上述特征的明显增强。免疫印迹实验进一步发现CFTR基因过表达抑制A549细胞中干细胞相关转录因子SOX2和OCT3/4,以及细胞表面CD133蛋白的表达;相反,RNA干扰A549细胞中CFTR基因的表达增加SOX2、OCT4和CD133的表达。然而,免疫印迹和流式细胞术发现CFTR基因表达对A549细胞肺癌干细胞标志乙醛脱氢酶1的表达和阳性细胞数量无显著影响。结论 CFTR基因在肺癌A549细胞中具有抑制细胞恶性特征的作用,提示其可能是肺腺癌治疗的一个新的靶点,但其对其他肺腺癌细胞的作用与分子机制还有待进一步研究。

囊性纤维化跨膜转导调节因子的生物学特性及与妇科疾病的关系

囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是囊性纤维化(CF,cystic fibrosis)基因编码的cAMP依赖的氯离子通道。它在多种组织器官的上皮细胞均有表达,调节细胞的离子浓度和水分转运。近年研究发现,CF基因突变除可引起囊性纤维化症外,还与一系列的妇科疾病有着重要的关系。现就CFTR的功能及其与不孕、卵巢过度刺激综合征、输卵管积水及生殖道感染等的关系做一综述。

囊性纤维化跨膜转导调节因子表达率与人精子受精能力的关系

目的:研究人精子囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conduc-tanceregulator,CFTR)表达率与精子受精能力间的关系。方法:运用间接免疫荧光法及蛋白印迹分析法研究CFTR在人精子上的表达及其在不同类型(生育组、不明原因性不育组及不育组)精子上的表达率情况。结果:通过间接免疫荧光法发现CFTR表达在人精子赤道板上,蛋白印迹分析进一步证实人精子中存在CFTR,分子量为170kD;采用间接免疫荧光技术,CFTR在生育组、不明原因性不育组及不育组(包括畸形精子症、弱精症、少精症)上的表达率有显著差异:CFTR在生育组精子上的表达率(88.13%±3.79%)远高于不明原因性不育组(52.93%±15.36%)及不育组(35.89%±20.41%)(P<0.01)。结论:CFTR表达率下降与人精子受精能力降低有关。

囊性纤维化跨膜转导调节因子对低氧诱导的心肌H9c2细胞凋亡的影响

目的:探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)对低氧诱导的大鼠心肌H9c2细胞损伤的影响及其作用机制。方法:利用专业缺氧工作站使大鼠心肌H9c2细胞暴露于1%氧含量环境中建立缺氧培养模型。H9c2细胞中CFTR过表达后在缺氧环境中培养,RT-qPCR和Western blot法检测CFTR的mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡;DCF-DA探针检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成。结果:1%低氧环境培养可显著诱导H9c2细胞凋亡,同时伴随CFTR mRNA和蛋白水平的下调和ROS的生成增加(P<0.05)。过表达CFTR后低氧诱导的H9c2细胞凋亡以及ROS生成均明显减少;而CFTR蛋白特异性抑制剂CFTRinh-172可显著逆转过表达CFTR的作用。结论:CFTR可能通过抑制ROS生成对抗低氧诱导的心肌细胞凋亡。

囊性纤维化跨膜传导调节因子基因突变与呼吸道疾病

囊性纤维化跨膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）是一种环腺苷酸（cAMP）激活的ATP门控性氯离子（Cl-）通道，广泛分布于人体具有分泌功能的组织中。CFTR突变会导致分泌腺功能紊乱，继而引起囊性纤维化病变（cystic fibrosis．CF）。CF是白种人中最常见的常染色体隐性遗传性疾病，可引起全身各处多种疾病.

囊性纤维化跨膜转导因子与多囊卵巢综合征发病机制的相关性研究

目的:通过观察囊性纤维化跨膜转导因子(CFTR)对人源卵巢颗粒肿瘤细胞(COV434)增殖活力和凋亡等生物学特性的影响,探讨CFTR与多囊卵巢综合征(PCOS)排卵障碍发病机制的相关性,为PCOS提供新的病因诠释及防治靶点。方法:在CFTR特异性阻滞剂CFTRinh-172干预下,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察COV434细胞的增殖活性及凋亡情况,利用Western Blot检测COV434细胞中半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶(Cleaved-Caspase3)蛋白、环氧化酶-2(COX-2)蛋白的表达情况,利用PCR检测肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的表达情况。结果:不同浓度(10μmol/L和50μmol/L)CFTRinh-172阻滞剂作用于COV434细胞后均致其生长活力下降,且随浓度的增加其生长抑制显著,CFTRinh-172阻滞剂处理72h后的COV434细胞生长抑制率差异列更显著,抑制率与作用时间显著正相关;不同浓度(1μmol/L和10μmol/L)CFTRinh-172阻滞剂作用COV434后,Cleaved-Caspase3和COX-2的蛋白表达量随浓度的增加而增加,其中,Cleaved-Caspase3的蛋白表达量在培养48h后明显高于培养24h后;添加不同浓度(1μmol/L和10μmol/L)CFTRinh-172阻滞剂后,COV434中TRAIL基因的24h表达量与对照组相比呈低表达,且随着浓度的增加抑制效果更显著。结论:CFTR缺失通过Cleaved-Caspase3、COX-2及TRAIL分别影响卵巢颗粒细胞的凋亡、血管生成及卵巢内炎症反应,从而推测CFTR缺失可能是多囊卵巢综合征的卵泡发育异常的重要病理生理改变和发病机制之一。

基于cAMP信号通路探讨小青龙汤对CFTR离子通道调节哮喘黏液纤毛清除功能的作用机制

目的:观察小青龙汤对哮喘寒饮蕴肺证小鼠环磷酸腺苷(cAMP)、囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)、黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响,探讨小青龙汤基于cAMP通路对CFTR离子通道改善黏液纤毛清除功能的作用机制。方法:常规卵清白蛋白(OVA)加寒性刺激干预建立小鼠哮喘寒饮蕴肺证模型,于末次激发后取肺组织进行苏木素-伊红(HE)及阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色,收集支气管肺泡灌洗液及肺组织上清液,检测肺泡灌洗液中MUC5AC水平及肺组织上清液中cAMP、CFTR水平。结果:成功构建哮喘小鼠寒饮蕴肺证模型,小鼠肺泡灌洗液中MUC5AC表达上升,肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均下降,肺组织病理切片见气道周围炎症细胞浸润,气道黏液分泌及杯状细胞增生。与模型组比较,地塞米松组、小青龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达均下降,小青龙汤组肺泡灌洗液中MUC5AC表达下降幅度小于地塞米松组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,cAMP组、小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达均上升,小青龙汤组肺组织上清液中cAMP、CFTR表达上升幅度均小于cAMP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。病理切片见,小青龙汤组支气管周围基本无炎性细胞浸润,支气管管壁及肺泡保持较完整,平滑肌增生、支气管增厚与cAMP组、地塞米松组相比程度较轻,管腔内未见黏液栓及脱落的肺泡上皮。小青龙汤组支气管管壁清晰,杯状细胞增生较少,气道内黏液分泌少于cAMP组、地塞米松组。结论:小青龙汤可以减轻哮喘寒饮蕴肺证小鼠气道黏液高分泌及保障黏液纤毛清除功能运行,作用机制为通过cAMP通路提高CFTR离子通道。

基因突变导致的囊性纤维化及其疾病的研究进展

囊性纤维化(CF)是白种人最常见的常染色体隐性遗传性疾病之一,多是由于ΔF508缺失突变造成的,本文主要介绍了CF疾病以及现有治疗方法和对未来药物的展望。

囊性肺间质纤维化的治疗进展

传统上治疗囊性肺间质纤维化主要针对该病所致的黏液阻塞及继发感染进行对症治疗。近几年通过对囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)基因进行干预,使该病在治疗上取得了重大进展。作者对目前临床上囊性肺间质纤维化的常规治疗方法及相关新疗法的进展作一综述。

囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)表达率与人精子获能及顶体反应间相关性研究

目的:研究人精子囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)表达率与精子获能及顶体反应间的相关性。方法:通过间接免疫荧光染色法观察CFTR在人精子上的表达率,金霉素染色法评估精子获能及顶体反应。结果:CFTR定位在人精子赤道板上,随着CFTR表达率降低,精子获能率也随之降低,故CFTR表达率与人精子获能呈正相关(r=0.985,P<0.01),而且精子顶体反应率也随之减少,因此CFTR表达率与人精子顶体反应呈正相关(r=0.979,P<0.05)。结论:人精子CFTR表达率与精子获能及顶体反应呈正相关。

FDA批准新药Kalydeco治疗罕见囊性纤维化患者

资料来源：FDA网站发布时间：2012.1.31 美国食品药品监督管理局（简称FDA）于近日批准Kalydeco（ivacaftor）用于治疗囊性纤维化跨膜转导调节器（CFTR）基因发生特定G551D突变、年龄≥6岁的罕见囊性纤维化（CF）患者。CF是一种严重的遗传病,该病会累及肺和其他器官,最终导致患者过早死亡。CF是编码一种名为CFTR的蛋白质的基因突变（基因缺陷）而引起的;CFTR可以调节体内离子（如氯离子）和水的转运。

西地那非有望治疗囊性纤维化

来自于英国Cardiff威尔士大学医学院的Robert L．Dormer教授近日报道说，研究表明西地那非（sildenafil，SF）有可能通过纠正突变囊性纤维化跨膜传导调控子（CFTR）的错误定位而有益于该疾病的治疗。CFTR最常见的突变型δ-F508可在细胞内错误定位，因此大多数囊性纤维化患者的治疗就需要选择性纠正该突变的定位和功能。

囊性纤维化跨膜转导调节因子在子宫内膜中表达的变化及其意义

目的 探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子 (CFTR)在人月经周期子宫内膜中表达的变化及其意义。方法 采用免疫组化、免疫印迹、原位杂交方法检测人月经周期子宫内膜中CFTR的蛋白及mRNA的分布与含量变化。结果 (1)CFTR仅在子宫内膜腺上皮细胞中表达 ,增生期晚期、分泌期、月经期内膜腺上皮细胞中均富含CFTR ,与增生期早期相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;免疫印迹法证实 ,增生期晚期、分泌期内膜存在特异性的、相对分子质量为 170 0 0 0的CFTR条带 ;(2 )CFTRmRNA在增生期晚期和分泌期早期子宫内膜中含量最高 ,与增生期早期、分泌期晚期相比 ,差异有显著性 (P<0 0 5 )。结论 人月经周期子宫内膜腺上皮细胞中存在CFTRmRNA和蛋白的表达 ,含量均随月经周期而变化 ;增生期晚期CFTR表达的增强。分泌期CFTR的表达及局部调节可能参与人类胚泡着床的调控。

囊性纤维化跨膜转导调节因子与男性不育

囊性纤维化是一种常染色体隐性遗传疾病,由于囊性纤维化跨膜转导调节因子突变所致,该因子是一种环磷酸腺苷(c-AMP)调控的阴离子通道蛋白。囊性纤维化是一种累及全身的系统性疾病,主要累及呼吸系统、内分泌系统、消化系统、免疫系统、皮肤和泌尿生殖系统。在生殖系统中,本病突出表现为不育症,有超过96%的患者表现为先天性双侧输精管缺如。最近更多的研究表明囊性纤维化跨膜转导调节因子的突变不仅可以导致输精管发育缺陷,还可能影响精子发生及其功能等多个环节,降低患者的生育力。

囊性纤维化跨膜转导调节因子在支气管肺发育不良发病中的作用初探

目的探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)发病中的作用。方法以新生大鼠高氧肺损伤为BPD模型(吸入氧浓度>90%),将新生大鼠分为对照组(吸入空气)、单纯模型组、激动剂组和抑制剂组,于生后24、48、72 h分别腹腔注入50 μl的磷酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、染料木黄酮(CFTR激动剂)[50 mg/(kg·次)]和花生四烯酸(CFTR抑制剂)[500 mg/(kg·次)]。观察大鼠存活率,绘制生存曲线;对照组和单纯模型组于生后3 d、14 d及21 d,激动剂组和抑制剂组于生后14 d及21 d,取肺组织行苏木精-伊红染色,观察肺组织病理变化,比较单纯模型组、激动剂组和抑制剂组急性肺损伤评分;采用蛋白质免疫印迹法观察前述各时间点CFTR蛋白表达,Graphpad软件分析灰度值变化。结果(1)生存情况:对照组、单纯模型组、激动剂组和抑制剂组新生大鼠存活率分别为96.8%、93.3%、100%和34.5%。抑制剂组存活率明显低于其他3组,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)肺组织病理变化:对照组大鼠随日龄增加,肺泡发育逐渐完善。单纯模型组肺血管充血、肺泡出血、肺泡壁增厚和炎性细胞浸润,部分组织肺泡腔扩大、数量减少;随着日龄增加,炎症反应逐渐减轻,但部分组织肺泡腔明显扩大、数量明显减少。激动剂组和抑制剂组肺组织病理变化与单纯模型组类似,14 d、21 d时3组急性肺损伤评分差异无统计学意义(P>0.05)。(3)肺组织CFTR表达:生后3 d时单纯模型组明显低于对照组(P<0.01);生后14 d时单纯模型组与对照组差异无统计学意义(P>0.05),激动剂组明显高于单纯模型组(P<0.01),抑制剂组高于单纯模型组(P<0.05);生后21 d时单纯模型组明显低于对照组(P<0.01),激动剂组高于单纯模型组(P<0.05),抑制剂组与单纯模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CFTR在BPD发病中可能起保护作用。

囊性纤维化跨膜转导调节因子基因突变与特发性慢性胰腺炎

特发性慢性胰腺炎（idiopathic chronic pancreatitis，ICP）指现今未发现可识别的致病因素的CP。随着医学的发展，ICP的比例有所下降，但仍占CP患者总数的10％～25％^[1]，在女性和儿童CP患者中，这一比例更是高达40％～70％^[2-3]。