囊泡病毒和类囊泡病毒及其与寄生蜂之间的关系

囊泡病毒(ascoviruses)和类囊泡病毒(ascovirus-like viruses)通过寄生蜂para-sitoid wasp的产卵行为而散布于鳞翅目Lepidoptera幼虫体内,它与寄生蜂的关系多种多样。大部分的囊泡病毒和类囊泡病毒都是致病性的,由雌蜂携带传播。一些囊泡病毒和类囊泡病毒则是互利共生生物,其基因稳定地存在于寄生蜂的细胞核中,世代间垂直传播,通过抑制鳞翅目幼虫的防御机制来促进幼蜂的成功发育。囊泡病毒DpAV4则根据所处的寄生体系可以是致病性病毒、互利型或共生非致病性病毒。各种生物学特性显示囊泡病毒与寄生蜂之间的关系取决于寄生蜂控制病毒复制的调节因子,囊泡病毒与寄生蜂的关系类型依赖于它们之间关系得以进化的种类系统。

一株草地贪夜蛾囊泡病毒对甜菜夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响

囊泡病毒是一类具有生防潜力的双链DNA病毒,本文以含草地贪夜蛾囊泡病毒84-36浓度为9.77×1012病毒基因拷贝/m L的血淋巴,分别通过口服（1~2龄：1.09×1010病毒基因拷贝/虫;3~5龄：9.77×109病毒基因拷贝/虫）与针刺（1.56×109病毒基因拷贝/虫）2种方式接种感染甜菜夜蛾Spodoptera exigua（Hübner）幼虫,观察其死亡和生长发育情况。结果表明,口服感染时,1、2、3、4和5龄幼虫的校正死亡率分别为18.89%±1.11%、4.44%±1.11%、2.22%±1.11%、0与0,1龄幼虫较2、3龄显著易被病毒感染;针刺接种感染时,3、4和5龄幼虫校正死亡率分别为100.00%、100.00%和80%,所有被病毒感染的幼虫发育历期明显延长,3、4龄幼虫感染病毒后的第2 d即表现出日取食量显著降低、第3 d开始体重基本维持不变。由此可见,草地贪夜蛾囊泡病毒84-36毒株在生物防治上具有潜在优势。

草地贪夜蛾囊泡病毒

囊泡病毒是发现较晚的一类双链DNA昆虫病毒,该病毒隶属于囊泡病毒科Ascoviridae囊泡病毒属Ascovirus,目前报道有5个种,分别是草地贪夜蛾囊泡病毒Spodoptera frugiperda ascovirus 1a、粉纹夜蛾囊泡病毒ⅠTrichoplusia ni ascovirus 2a、烟芽夜蛾囊泡病毒Heliothis virescens ascovirus 3a、

烟芽夜蛾囊泡病毒3h株3h-122基因于棉铃虫幼虫体内的转录表达分析

本文构建了烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h)第122个基因(3h-122)的原核表达载体并制备多克隆抗体。利用蛋白免疫印迹、RT-PCR、免疫组织化学染色等技术检测3h-122的转录表达时相以及组织特异性。结果表明,3h-122编码大小16.1 kD的结构蛋白(3H-122)。HvAV-3h感染棉铃虫幼虫后3 h开始检测到3h-122的转录并稳定持续至第168 h。3H-122在棉铃虫感毒后24 h至168 h可持续检测到其表达。此外,3H-122主要在脂肪体组织中表达。本研究为阐明囊泡病毒结构蛋白的功能及其在囊泡病毒致病机制中的作用奠定了基础。

烟芽夜蛾囊泡病毒3h毒株3h-161的克隆和表达谱分析

【目的】本文旨在明确烟芽夜蛾囊泡病毒3h毒株(HvAV-3h)编码的第161号开放阅读框(3h-161)的序列特征及表达谱,为深入研究其功能奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆3h-161的CDs序列,构建原核表达载体,并制备高效的多克隆抗体;利用RT-PCR技术检测3h-161的转录情况,利用蛋白免疫印迹法检测3H-161的表达情况。【结果】3h-161编码区长516 bp,共编码172个氨基酸残基,感染甜菜夜蛾Spodopteraexigua3龄幼虫后12h开始转录、48h开始表达;3H-161在囊泡病毒属内的不同毒株(HvAV-3j、HvAV-3i、HvAV-3e、HvAV-3f和HvAV-3g)间高度保守,序列一致性为100%。【结论】本研究阐明了3h-161的序列特征、获得了3H-161的多克隆抗体,明确了其表达谱,为进一步研究该基因在HvAV-3h感染甜菜夜蛾过程中发挥的作用奠定基础。

烟芽夜蛾囊泡病毒3h株编码的3H-117蛋白能干扰AcMNPV的口服活性

【目的】囊泡病毒是一类体液传播的昆虫病毒,具有特殊的致病历程和良好的生防应用潜力。烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)是我国分离的第一株囊泡病毒,其编码的3H-117蛋白被报道为HvAV-3h病毒粒子的结构蛋白。【方法】为了进一步探究3h-117基因的功能,本研究以Bac-to-Bac昆虫表达系统为研究平台,将3h-117插入到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclepolyhedrovirus,AcMNPV)的基因组中,成功构建了具有口服活性的重组病毒AcMNPV-117。【结果】通过与野生型病毒(AcMNPV-Egfp)的比较,证实在感染Sf9细胞72–96 h后,AcMNPV-117的出芽型病毒粒子产量以及病毒DNA的拷贝数显著降低,且AcMNPV-117的多角体明显增大。进一步的生测结果表明,AcMNPV-117对三龄甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的90%致死浓度明显高于AcMNPV-Egfp。此外,被病毒感染的甜菜夜蛾幼虫生长相对健康幼虫明显减缓,且试虫的日均取食量也因病毒的感染而被抑制。共聚焦结果表明,3H-117与AcMNPV-117感染后宿主细胞核骨架的聚集过程相关,提示3H-117在囊泡病毒感染过程中可能具有瓦解宿主细胞核的功能。【结论】本研究的结果进一步验证了3h-117的功能,为囊泡病毒的分子生物学研究奠定了基础。

烟芽夜蛾囊泡病毒3h株对草地贪夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响

为寻找有效防控外来入侵物种草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的技术,以烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)为研究对象,通过测定不同龄期草地贪夜蛾幼虫口服或针刺感染HvAV-3h后的死亡率、存活时间、取食量及体重,分析该毒株对草地贪夜蛾幼虫的感染特性及对其生长发育的影响。结果显示,草地贪夜蛾1、2龄幼虫口服HvAV-3h后的校正死亡率分别为9.22%和0,3~6龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的校正死亡率则高达100.00%,感染HvAV-3h的幼虫均在幼虫期或蛹期死亡。3~5龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的存活时间明显长于健康幼虫;3~6龄幼虫针刺感染HvAV-3h后其体重和取食量均受到不同程度的抑制作用,体重抑制率分别为67.79%、41.68%、16.31%和10.30%,总取食量抑制率分别为57.80%、33.90%、17.42%和41.82%;其中3龄幼虫针刺感染HvAV-3h后的体重和取食量被显著抑制,且蜕皮困难,最终在幼虫期死亡;部分4~6龄感染HvAV-3h幼虫能够完成化蛹,但是均无法羽化。表明HvAV-3h感染能够有效控制草地贪夜蛾幼虫,有望开发为草地贪夜蛾的生防制剂。

囊泡病毒(Heliothis virescens ascovirus 3h)毒株的寄主范围

为阐明囊泡病毒[Heliothis virescens ascovirus 3h(HvAV-3h)]毒株的寄主范围,本文以含1.11×1011基因拷贝/mLHvAV-3h毒株的血淋巴通过针刺接种方式感染隶属于4科7属的8种鳞翅目昆虫幼虫,结果表明,HvAV-3h能感染夜蛾科和粉蝶科昆虫,但不能感染蚕蛾科和毒蛾科昆虫,其中对夜蛾科昆虫的致病性较强。

囊泡病毒凋亡抑制蛋白研究进展

囊泡病毒是一类依赖寄生蜂传播的以鳞翅目幼虫为宿主的双链环状DNA昆虫病毒。囊泡病毒具有特殊的致病历程,即宿主幼虫在感染囊泡病毒后会拥有一个2~4倍延长的幼虫期,这预示着囊泡病毒或许能通过干扰宿主细胞的凋亡为自身的复制和包装争取足够的时间和空间。目前,共有4种囊泡病毒被报道,其基因组序列均已被完整测定,包括草地贪夜蛾囊泡病毒、烟芽夜蛾囊泡病毒以及粉纹夜蛾囊泡病毒在内的3种囊泡病毒均被预测到能够编码凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein, IAP)。IAP作为一种重要的参与调控细胞凋亡的蛋白之一,在多种病毒中被表达且具有明显的抑制细胞凋亡的作用。为了进一步明确囊泡病毒可能存在的抗凋亡机制,本文对囊泡病毒编码的IAP结构及其功能进行了统计,并综述了几种常见的杆状病毒IAP的功能,以期为后续深入地研究囊泡病毒的抗宿主凋亡机制奠定理论基础。

湖南省武冈市草地贪夜蛾侵入现状与防控策略

草地贪夜蛾作为世界性重大迁飞性害虫,自2019年1月侵入我国后,短短几个月内在我国蔓延。尽管我国本土已发现对草地贪夜蛾有较好控制作用的自然天敌,如昆虫囊泡病毒、斯氏侧沟茧蜂等,但该虫将可能造成的影响不容忽视,借此我们于2019年3月开始对武冈市的玉米地进行持续的监控,在5月9日首次发现草地贪夜蛾入侵武冈市,随之开展系统调查,基本摸清草地贪夜蛾在我市的发生情况及为害程度、为害特点,并做出群防群治、早发现早防治的策略方案。