囊泡膜核苷酸转运体在核苷酸囊泡转运机制的研究进展

核苷酸在细胞内的运输不能自由穿过细胞膜,其储存与运输必须以囊泡运输的方式进行跨膜转运,当囊泡与胞膜融合时将核苷酸等内容物质释放到细胞外[1]。要探讨细胞外核苷酸/核苷激发的信号通路,就必须要理解三磷酸腺苷（ATP）和其他核酸是如何从细胞内释放出来的,而这也是生理学上的一个重要问题[2];自从囊泡膜核苷酸转运体（vesicular nucleotide transporter,VNUT）被发现,其就作为ATP转运的关键因子而被广泛关注[3];

siRNA干扰VNUT基因对INS-1胰岛素分泌的影响

目的观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰囊泡膜核苷酸转运体(vesicular nucleotide transporter,VNUT)基因对大鼠胰腺β细胞(INS-1)胰岛素分泌的影响。方法2021年1月至6月通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)等方法检测siRNA对VNUT基因表达的作用以及对胰岛素分泌的影响。采用独立样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果siRNA转染INS-1细胞24 h后,VNUT基因表达明显下降,对照组和干扰组RNA表达结果分别为(0.452±0.218)和(0.319±0.116),蛋白分别为(0.514±0.297)和(0.369±0.203),差异均有统计学意义(均P<0.05);胰岛素分泌明显抑制,对照组和干扰组结果为(281.45±24.92)ng/L和(176.54±15.70)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论siRNA明显抑制VNUT基因表达与INS-1胰岛素分泌,深入研究VNUT基因对胰岛素分泌的影响可为2型糖尿病发病机制因素提供参考资料。

胰高血糖素样肽1对INS-1细胞VNUT基因表达影响

目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)对大鼠胰腺β细胞(INS-1)内囊泡膜核苷酸转运体(VNUT)基因表达的影响及其机制。方法采用半定量RT-PCR、Western blot方法,检测INS-1细胞加入1、5和10nmol/L的GLP-1培养60min以及10nmol/L的GLP-1培养3、6和12h时VNUT mRNA和蛋白表达。结果加入1、5和10nmol/L的GLP-1培养60min后,INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达随GLP-1浓度升高而升高,差异有显著意义(F=18.59、26.73,P<0.05)。加入10nmol/L的GLP-1培养3、6和12h时,INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达随培养时间的增加均明显上升,差异有统计学意义(F=20.71、15.45,P<0.05)。结论 GLP-1能促进INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达。

葡萄糖对INS-1细胞VNUT基因表达的影响及机制探讨

目的通过观察不同浓度葡萄糖对大鼠胰腺β瘤细胞(INS-1)内囊泡膜核苷酸转运体(VNUT)基因表达和胰岛素分泌的影响,旨在初步探讨葡萄糖对VNUT与胰岛素分泌的影响,为进一步探讨胰岛素分泌机制奠定基础。方法采用半定量RT-PCR、Western blot和ELISA等方法检测不同浓度葡萄糖对INS-1细胞VNUT基因表达水平以及C-肽分泌情况从而反映胰岛素分泌水平。结果葡萄糖可升高INS-1细胞VNUT基因表达并刺激胰岛素的分泌,在2.8mmol/L和15mmol/L葡萄糖环境下培养的INS-1细胞中VNUT基因m RNA水平分别为(0.218±0.069)和(0.524±0.158),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot的结果也反映VNUT基因蛋白在高糖浓度下表达水平上升(P<0.05);而C-肽的测定结果为(84.52±11.03)pg/m L和(118.79±13.48)pg/m L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论葡糖糖能刺激INS-1细胞分泌胰岛素,其机制可能是通过使VNUT基因表达增加从而产生胰岛素分泌信号而实现的。