C型钠肽预处理小鼠卵母细胞后的胚胎发育能力

背景:C型钠肽作为生理抑制剂可抑制小鼠卵母细胞的减数分裂,但其是否对所获得胚胎的发育能力具有促进作用尚不完全明确。目的:研究C型钠肽预处理对小鼠胚胎质量的影响。方法:利用C型钠肽预处理小鼠卵母细胞8 h后,再进行体外成熟24 h,将成熟后的卵母细胞体外受精,获得体外胚胎(实验组),以小鼠卵母细胞常规体外成熟培养24h后所获得的胚胎为对照组。实验方案中有关动物伦理问题已经得到乌兰察布医学高等专科学校动物实验伦理委员会的批准,伦理批号:WYZLL[2016]1601。结果与结论:实验组平均囊胚细胞数明显高于对照组平均囊胚细胞数(P<0.05);2组的线粒体DNA拷贝数均随胚胎发育逐渐增加,且实验组增长速度较对照组快(P <0.05);实验组的活性氧水平显著低于对照组(P <0.05),实验组各胚胎时期胚胎细胞的谷胱甘肽水平显著高于对照组(P<0.05)。提示C型钠肽预处理对小鼠胚胎的发育能力有了明显的提高。

褪黑素对牛体外胚胎生产效果的影响

为了探讨褪黑素对牛体外胚胎生产效果的影响,对体外成熟液(TCM199),受精液(BO)及胚胎培养液(SOF)添加不同浓度(0、10^(-8)、10^(-9)、10^(-10)褪黑素,研究在体外胚胎生产全程添加褪黑素对体外受精效果的影响。分别从屠宰场采集卵巢获得卵母细胞,卵母细胞经体外成熟、体外受精、早期胚胎体外培养。试验结果表明:体外胚胎生产过程中填加10^(-9)褪黑素组的卵母细胞卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数显著优于其对照组(P<0.05);说明体外胚胎生产过程中全程填加抗氧化剂,可以达到抗细胞过氧化反应的目的,克服早期胚胎的发育阻滞,提高体外胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数,提高囊胚质量。

褪黑素对肉羊体外胚胎生产效果的影响

为了探讨褪黑素对肉羊体外胚胎生产效果的影响,本实验体外成熟液(TCM199),受精液及胚胎培养液(SOF)添加不同浓度(0、10^(-8)、10^(-9)、10^(-10))褪黑素,研究在体外胚胎生产全程添加褪黑素对体外受精效果的影响。本实验分别从屠宰场采集肉羊卵巢获得卵母细胞,卵母细胞经体外成熟、体外受精、早期胚胎体外培养。试验结果表明:体外胚胎生产过程中添加10^(-9)褪黑素组的卵母细胞卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数显著优于其对照组(P<0.05);说明体外胚胎生产过程中全程添加抗氧化剂,可以达到抗细胞过氧化反应的目的,克服早期胚胎的发育阻滞,提高体外胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数,提高囊胚质量。

牛血清白蛋白对小鼠原核期胚胎玻璃化冷冻的影响

以小鼠原核期胚胎为对象,以胚胎的存活率、卵裂率、囊胚率以及囊胚细胞数作为检测指标,在M2液的基础上添加8种浓度(0,2,4,8,16,32,64,96mg/mL)牛血清白蛋白(BSA)配置防冻液,探讨防冻液和玻璃化冷冻后对胚胎发育的影响。BSA防冻液对胚胎发育影响的实验结果表明,8个浓度组间以及与对照组间胚胎的卵裂率、囊胚率以及囊胚细胞数无显著差异(P>0.05),说明在防冻液中加入一定浓度的BSA对小鼠胚胎无毒性作用。防冻液经玻璃化冷冻后对胚胎发育影响的实验表明,8个浓度组间冷冻胚胎复苏后的存活率、卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数无显著差异(P>0.05)。表明BSA在这种防冻液中没有明显的保护作用。从经济、实用、生物安全角度考虑,不支持在玻璃化防冻液中添加BSA。

c-型钠钛对小鼠胚胎体外发育的影响

为了探讨c-型钠钛(CNP)对小鼠2细胞/4细胞胚胎转变及囊胚腔形成的影响,收集了小鼠原核期胚胎进行体外培养,随后在不同发育时期的培养体系中添加0,100,200μg/L CNP,分别为对照组、1组和2组。当胚胎发育至2-细胞阶段添加CNP,统计4细胞率和囊胚率;当胚胎发育至致密桑葚胚阶段添加CNP,统计囊胚成腔率、囊胚腔扩张率及囊胚孵化率,并测定扩张囊胚直径、囊胚腔面积占比及囊胚细胞数。结果表明:(1)2细胞阶段添加CNP后,与对照组相比,2组的4细胞发育率和囊胚率显著降低(P<0.05);(2)致密桑葚胚阶段添加CNP,与对照组相比,1组的囊胚成腔率、囊胚腔扩张率、囊胚腔直径、囊胚腔面积占比及孵化率无显著变化(P>0.05),但囊胚总细胞数显著降低(P<0.05);(3)致密桑葚胚阶段添加CNP,与对照组相比,2组的囊胚成腔率、囊胚腔扩张率、孵化率、囊胚腔直径、囊胚腔面积占及囊胚总细胞数均显著降低(P<0.05)。说明外源添加CNP抑制了小鼠2细胞/4细胞胚胎的转变、囊胚腔的形成与扩张,并降低了囊胚细胞数。

抑制NO的产生对小鼠胚胎体外发育的影响

目的利用NO合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲基酯盐酸盐(L-NAME)抑制胚胎细胞产生NO,探讨NO作为细胞功能活动的重要信使分子在早期胚胎发育中的调控作用。方法通过体外受精方式获得受精胚,将受精胚培养于添加不同浓度L-NAME的胚胎培养液中,检测胚胎发育的卵裂率、囊胚率和囊胚的总细胞数。结果 0.1mmol/L的L-NAME对胚胎的卵裂率和囊胚率没有显著影响,但囊胚的总细胞数显著降低;随着L-NAME浓度的增加,1和10 mmol/L L-NAME组胚胎的卵裂率、囊胚率和囊胚的总细胞数显著降低。结论 NO在早期胚胎发育过程中具有重要的调控作用,抑制胚胎细胞中NO的产生将严重影响早期胚胎的发育及发育质量。