刺参一种囊膜病毒的分离及其超微结构观察

利用电镜负染技术检测发病的养殖刺参[Apostichopus japonicus(Selenka)]组织提取液.观察发现,提取液中存在大量病毒样粒子,该病毒粒子近似球形,具有囊膜.囊膜内可见高电子密度的核心结构.完整的病毒粒子直径为80～100 nm,囊膜厚6～10 nm,核心结构直径35～45 nm,呈六边形.应用超薄切片技术对刺参的触手顶部、触手臂、疣足、呼吸树、背肠血管、肠等组织的病毒感染状况进行观察,发现该种病毒粒子大量存在于所检测各组织内.感染细胞超微结构表现为大量细胞器崩解形成空泡结构,并出现'髓袢样'结构等病理变化.根据观测结果,该病毒是一种无包涵体病毒.

囊膜病毒膜融合的分子机制

囊膜病毒可能采用相似的病毒 宿主细胞膜融合机制 ,即病毒表面糖蛋白结合到宿主细胞受体后 ,启动了病毒融合蛋白的一系列构象变化 ,根据囊膜蛋白构象变化特征 ,囊膜病毒可采用两种以上的方式发生膜融合 ,并据此分为两类 :Ⅰ型病毒膜融合和Ⅱ型病毒膜融合 .Ⅱ型病毒膜融合以黄病毒为代表 ,其分子机制与Ⅰ型病毒膜融合不同 ,但不很清楚 .而Ⅰ型病毒膜融合中 ,如艾滋病毒 ,流感病毒等 ,在囊膜蛋白变构形成稳定折叠的发夹三聚体结构时 ,拉近了两膜之间的距离 ,此过程释放出来的能量进一步促使两膜融合 .膜融合使病毒蛋白及病毒RNA基因组释放到宿主细胞内而感染宿主 .以上述研究为基础设计的C肽 /N肽小分子抑制子 ,可以在病毒糖蛋白中间体构象形成的短时间内 ,高效、特异地竞争结合其配体 ,从而阻止糖蛋白的进一步折叠 ,达到抑制病毒入侵的目的 ,为病毒疾病的防治提供了新思路和策略 .针对艾滋病毒设计的C肽 ,即T2 0或Enfuvirtide在临床应用效果很好 .以艾滋病毒和流感病毒为例 。

Ⅱ类囊膜病毒膜融合的分子机制

病毒囊膜与宿主细胞膜的膜融合是囊膜病毒入侵的重要过程,病毒囊膜融合糖蛋白的一系列结构变化引发此过程.综述了Ⅱ类囊膜病毒、弹状病毒及疱疹病毒融合蛋白结构与功能研究的最新进展,介绍了软件分析并定位融合蛋白功能区域的方法.Ⅱ类病毒与Ⅰ类病毒融合蛋白的融合前结构不同,但融合后结构(发夹三聚体结构)相似.弹状病毒与疱疹病毒的融合蛋白集合了Ⅰ/Ⅱ类融合蛋白的某些特征,但其结构变化及融合过程各不相同,被归为新型融合蛋白.上述研究为基础设计的以病毒融合过程为靶标的抑制子,可为抗病毒新药的研制提供新思路.

囊膜病毒膜融合分子机制研究进展

囊膜病毒通过病毒与宿主细胞膜融合的方式感染宿主,病毒囊膜蛋白介导了膜融合过程。根据这些囊膜蛋白在病毒囊膜表面的排列、蛋白结构及其在融合肽中的位置不同,可将裳膜病毒分为三类,其利用这些囊膜特殊的蛋白分子与受体相互作用完成膜融合。在分子水平上研究这一过程有助于认识病毒侵染的本质和发现关键环节,达到预防与治疗病毒病的目的。

囊膜病毒的生物素标记

随着近年来多起突发性病毒疫情爆发，使人们对病毒的基础性研究工作越来越关注，而病毒的动态可视化分析作为一种直观，活体，实时的分析手段成为病毒研究领域的新热点。但是作为病毒动态研究的前提就是要将病毒进行标记而不改变病毒的活性，常用的病毒标记方法有：（1）直接偶联法，

糖基化在囊膜病毒感染中的作用机制

糖类属于生物体内分布广泛且具有重要作用的有机化合物,在糖基转移酶的作用下共价连接在特定种类的蛋白质上形成糖苷键,该修饰过程即为糖基化。随着研究技术的发展,糖基化在病毒生物学中的功能被不断发掘,广泛应用在病毒诊断、疾病预防及治疗中,如抗病毒疫苗和药物的研制等。以病毒糖蛋白和宿主细胞糖蛋白为研究对象,讨论了糖基化修饰在囊膜病毒生物学中的功能与作用机制,并对前沿方向和实际应用进行了展望。

哈兽研在量子点标记囊膜病毒研究中取得重要进展

近期,我所兽医生物技术国家重点实验室猪免疫抑制病研究创新团队利用CRISPR系统,在伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)组装的过程中实现了量子点对病毒核酸的原位标记,并系统的分析了PRV在Vero细胞和HeLa细胞中的侵染过程。相关论文“Single Virus Tracking withQuantum Dots Packaged into Enveloped Viruses Using CRISPR”在线发表于美国化学会权威期刊Nano Letters(影响因子12.279)上。该研究得到了中国博士后基金、黑龙江省杰出青年基金和黑龙江省自然科学基金的支持。

非洲猪瘟病毒跨细胞膜内化过程研究进展

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染家猪、野猪等引起的急性、烈性、出血性传染病,致死率可达100%。ASFV是一种二十面体具备囊膜结构的DNA病毒,其内化过程具备囊膜病毒的特征。本文从ASFV膜蛋白及其功能的角度,总结了膜蛋白参与跨膜和内化的过程,旨在加深对ASFV跨膜和内化的认知,对ASF的防控具有积极作用。

苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒囊膜内核衣壳排列图式的电镜观察

The arrangement patterns of nucleocapsids within the envelope of \%Autographa californica\% nuclear polyhedrosis virus were studied by electron microscopy. Numbers of nucleocapsids observed in an envelope in their cross sections ranged from 1 to 17, and the frequencies at 2,3,4,5,6 and 7 nucleocapsids were significantly higher than the others, suggesting that these numbers of nucleocapsids were more commonly involved in an envelope. The regular arrangement patterns of nucleocapsids within envelope were observed in cross sections. Envelope outlines can be classified into a triangle (3 nucleocapsids in an envelope),lozenge and square (4 nucleocapsids in an envelope), trapeziun (5 nucleocapsids in an envelope), pentagons (5 or 8 nucleocapsids in an envelope) and hexagons (7 or 10 nucleocapsids in an envelope). The irregular arrangement patterns of nucleocapsids within envelopes were also observed in cross sections.

囊膜病毒七肽重复区结构基础的研究

囊膜病毒侵染宿主的过程中很重要的一个步骤就是病毒囊膜与宿主囊膜的融合过程,该过程由病毒的融合蛋白介导,所有副粘病毒科。

昆虫细胞表达的网状内皮组织增殖症病毒囊膜糖蛋白及其免疫性

利用Bac-to-BacBaculovirusExpressionSystems构建了能表达禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)囊膜糖蛋白基因(env)的重组杆状病毒。用REV特异性单克隆抗体分别做间接免疫荧光抗体试验(IFA)和免疫转印试验,均可从感染的Sf9昆虫细胞中检出REVenv。重组杆状病毒感染的Sf9细胞裂解后制备成油乳疫苗免疫SPF鸡后,可以诱发维持45d以上的特异性抗REV抗体,并可抵抗REV病毒感染。

武汉病毒所囊膜病毒荧光标记示踪研究取得进展

中科院武汉病毒所王汉中研究组通过将小荧光分子标记到病毒成分上“与病毒同行”，可以了解单个病毒粒子在整个感染过程中的命运，为研究病毒的入侵机制提供了更为直观的实验数据。

用R_2抗血清检测内源性禽白血病病毒囊膜

致瘤性禽白血病(ALV)的免疫耐受力在某种程度上是通过内源性ALV—即EV的囊膜与免疫活性细胞的相互作用来传递的。L.D.Bacon等采用一种流量细胞计数器来检测鸡血浆或血清中的EV囊膜。

规模化养殖中猪圆环病毒病的综合防控

1病原学特性猪圆环病毒病是一种二十面对称的无囊膜病毒,主要遗传物质是单股负链环状DNA,其粒子直径为17~21 nm。该种病毒的两种血清型分别是PCV1和PCV2,其中前者虽然存活于猪只身内以及猪源传代细胞系中,但并没有致病的作用;而后者极易引起猪群发病,是猪圆环病毒病发生和传播必需的抗原。PCV2a、PCV2b和PCV2c等是CV2的多个基因亚型,该亚型中以PCV2b的毒性最强。猪体的免疫系统是PCV2病毒主要的攻击对象,尤其是巨噬细胞、单核细胞更容易被侵袭,严重影响着猪只的免疫性能。

基于代谢工程与生物正交反应的病毒原位标记技术研究

示踪病毒在细胞内的感染路径对探究病毒的感染机制具有重要意义,病毒标记是实现病毒示踪的关键。针对目前病毒标记方法中存在的不足,该文提出了一种基于代谢工程的病毒原位生物正交标记技术。脂质/氨基酸/单糖的叠氮衍生物经细胞代谢将叠氮基团修饰在病毒表面,被修饰病毒粒子识别结合宿主细胞后与携带二苯基环辛炔(DBCO)的荧光探针经生物正交反应连接从而实现病毒标记。结果显示,叠氮基团在囊膜病毒和非囊膜病毒表面都有很好的修饰效果,并且在原位生物正交中携带二苯基环辛炔基团的荧光探针可快速捕捉到叠氮修饰的病毒粒子实现病毒标记。该标记方法不仅操作简单,而且适用于囊膜病毒与非囊膜病毒的标记。

THBS3蛋白新功能—伪狂犬病毒侵入辅助受体

伪狂犬病病毒(PRV)是一种嗜神经病毒,可以引起仔猪明显的神经功能障碍和母猪繁殖障碍,是生猪养殖过程中必须重视的病原之一。同时由于PRV能够感染多种人类细胞,病毒进化可能会促进PRV适应人类,成为威胁人类健康的另一个新病原。PRV病毒粒子表面含有多种糖蛋白,能够介导病毒与表面受体结合、病毒囊膜与细胞融合和进入细胞3个过程。病毒侵入的这3个阶段是级联事件,其中病毒糖蛋白gC和携带硫酸肝素链(HSPGs)的细胞膜蛋白之间的相互作用介导病毒的吸附,而受体结合蛋白gD与相应受体的结合启动病毒囊膜和细胞膜之间的融合。然而,在具有氨基多糖生物合成缺陷的小鼠L细胞中使用放射性标记的病毒粒子进行吸附实验,结果表明gC和HSPGs之间的相互作用对PRV的传染性不是必需的,而且PRV gD主要有助于病毒粒子与HSPGs以外的细胞表面成分结合。此外,gB也是一种HSPGs结合蛋白,研究表明,gB结合HSPGs的能力是细胞外和细胞间人疱疹病毒有效进入细胞所必需的。在PRV感染的早期阶段,病毒糖蛋白gD和宿主受体之间的相互作用促进病毒的融合和进入。已经报道了3种gD受体,3-O-磺化修饰的硫酸肝素(3-O-S-HS),HveC(PRR1,nectin-1)和HveB(PRR2,nectin-2)。之前的一项研究表明gD可能参与病毒结合。然而,在病毒结合过程中宿主蛋白与gD的相互作用尚未见报道。

猪传染性胃肠炎病毒感染IPEC-J2细胞模型的建立

猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）属于冠状病毒科冠状病毒属成员,是一种多形性有囊膜病毒,可导致猪传染性胃肠炎（tansmissible gastroenteritisof swine,TGE）,该病是一种高度接触性肠道传染病,主要引起猪的严重呕吐、腹泻和脱水[1],对新生仔猪具有高度致死率,死亡率可达100%。TGEV能在猪源细胞系上增殖,其中较敏感的细胞有猪肾（IBRS-2）细胞、甲状腺细胞、唾液腺细胞和猪睾丸细胞。

应用电子显微镜技术对畜禽多种病毒的检查

我们应用电子显微镜技术,经过十多年的工作,对一些畜禽传染病的病原进行了形态学研究。这些病原中包括马传染性贫血强毒及其弱毒;鸡马立克氏病病毒、火鸡疱疹病毒;猪传染性胃肠炎病毒;牛流行热病毒;鸡传染性支气管炎强毒及其弱毒。