活化激酶C受体1、四个半LIM结构域蛋白1在食管鳞状细胞癌中的表达及与患者预后的关系

目的探讨活化激酶C受体1(RACK1)、四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及与患者预后的关系。方法选取122例局部晚期ESCC患者,取其ESCC组织及癌旁组织,免疫组化法检测RACK1、FHL1的表达情况,并比较不同临床疗效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1表达情况。局部晚期ESCC患者预后的影响因素采用多元Logistic回归分析。结果ESCC组织中RACK1、FHL1蛋白阳性表达率均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。依据实体瘤疗效评价标准,有效87例,无效35例,有效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1阳性表达率均高于无效患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic分析结果显示,淋巴结转移、分化程度为低分化、肿瘤直径≥5 cm、RACK1阴性表达、FHL1阴性表达均是局部晚期ESCC患者预后死亡的独立危险因素(P﹤0.01)。结论RACK1、FHL1在局部晚期ESCC组织中阳性表达率较低,可作为评估紫杉醇联合顺铂化疗疗效、患者预后的可靠指标。

OGDHL、FHL1在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析OGDHL、4个半LIM结构域蛋白1(FHL1)在非小细胞肺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法选取80例非小细胞肺癌患者癌组织标本、癌旁组织标本(距肿瘤边缘4cm处),采用免疫组织化学染色法检测所有标本组织中OGDHL、FHL1表达水平。采用χ^(2)检验分析OGDHL、FHL1表达与患者病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析OGDHL、FHL1表达与患者预后的关系,多因素Cox回归模型分析非小细胞肺癌患者预后的影响因素。结果非小细胞肺癌患者癌组织OGDHL高表达率明显低于癌旁组织(35.00%vs 62.50%,P<0.05),FHL1高表达率明显高于癌旁组织(67.50%vs 40.00%,P<0.05)。OGDHL、FHL1表达水平与非小细胞肺癌患者TNM分期、淋巴结转移、分化程度密切相关(P<0.05)。OGDHL高表达患者术后5年总生存率为82.14%,低表达患者术后5年总生存率为36.54%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);FHL1高表达患者术后5年总生存率为40.74%,低表达患者术后5年总生存率为76.92%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析得出,TNM分期、淋巴结转移、分化程度、OGDHL表达、FHL1表达均与非小细胞肺癌患者预后密切相关(P<0.05)。TNMⅢ期、淋巴结转移、低分化、OGDHL低表达、FHL1高表达均为影响非小细胞肺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论非小细胞肺癌患者癌组织中OGDHL蛋白呈低表达,FHL1蛋白呈高表达,两者表达水平与非小细胞肺癌患者的临床病理特征及预后密切相关,能够作为评估患者预后的有效指标。

FHL2通过NF-κB信号通路调节THP-1巨噬细胞泡沫化

目的 明确4个半LIM结构域蛋白(FHL2)是否能够通过调节核因子κB(NF-κB)信号通路影响巨噬细胞泡沫化。方法 构建FHL2过表达质粒及合成FHL2小干扰RNA(si-FHL2),分别转染至人单核/巨噬细胞系THP-1中,Western blot检测FHL2表达;使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激细胞,ELISA检测细胞IL-6、IL-1β、TNF-α等细胞因子的表达;油红O染色检测细胞泡沫化程度;Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 转染过表达FHL2质粒的细胞中FHL2表达量升高(P<0.01),而转染si-FHL2的细胞表达量降低(P<0.05);敲低FHL2能够下调炎性细胞因子的分泌(P<0.01);FHL2下调能够缓解THP-1巨噬细胞泡沫化;同时,FHL2下调抑制NF-κB信号通路的活化(P<0.05),而在过表达FHL2组中结果呈相反趋势。结论 下调FHL2的表达可通过抑制NF-κB信号通路活化,降低炎性细胞因子的分泌,缓解巨噬细胞的泡沫化。

四个半LIM结构域蛋白1对人肝癌细胞紫杉醇耐药影响的研究

目的探讨四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)对肝癌细胞紫杉醇耐药的作用机制。方法按照FHL1的表达状态,设置敲低FHL1表达的肝癌细胞株为实验组,表达FHL1的肝癌细胞株为对照组,分别给予紫杉醇药物处理,并同时以奥沙利铂作为实验参照。细胞活性测定不同表达的细胞活性的改变,细胞克隆实验检测不同表达细胞的克隆形成。实验组和对照组的细胞克隆接种于裸鼠,并给予紫杉醇治疗,观察两组的成瘤情况以及对紫杉醇的反应。进一步的凋亡蛋白Caspase-3活性测定实验分别对两组Caspase-3活性进行测定。结果紫杉醇药物处理后,实验组和对照组的细胞活性分别为0.41±0.02和0.70±0.02(HepG2细胞);0.44±0.02和0.63±0.03(SMMC 7721细胞),差异均有统计学意义(均P<0.05),且加入奥沙利铂后,实验组和对照组的细胞活性分别为0.70±0.02和0.71±0.02(HepG2细胞);0.64±0.02和0.63±0.03(SMMC 7721细胞),差异无统计学意义(P>0.05)。实验组与对照组的克隆形成计数分别为93.52±14.58和302.48±21.56(HepG2细胞);55.14±10.82和192.28±19.47(SMMC 7721细胞),差异均有统计学意义(均P<0.05);在裸鼠实验中,实验组与对照组肿瘤体积分别为0.02±0.02和1.89±0.51,差异统计学意义(P<0.05)。此外,Caspase-3活性实验显示,实验组与对照组Caspase-3表达分别为10.27±0.47和26.72±0.54,差异有统计学意义(P<0.05);加入抑制药Z-VAD-FMK后,实验组与对照组Caspase-3表达分别为8.87±0.36和29.96±0.68,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FHL^(-1)是紫杉醇耐药基因,FHL^(-1)敲低后,紫杉醇的抗肿瘤作用增强,促进Caspase-3激活,紫杉醇诱导的细胞凋亡作用增强。

柑橘GAST1基因的克隆及生物信息学分析

[目的]克隆一个受CTV(CitrusTristezaVirus,柑橘速衰病毒)诱导的GAST1基因,通过生物信息学分析手段揭示其可能的作用方式。[方法]以克里曼丁橘cDNA为材料,通过扩增获得该基因,并利用生物信息学软件进行分析。[结果]该基因编码序列(CDS)长度为357bp,预测可编码含有118个氨基酸残基的蛋白质,其中半胱氨酸、脯氨酸和丝氨酸含量较高,分别占总蛋白的10.2%、8.5%和8.5%。生物信息学分析结果显示,CcGAST1编码的蛋白为具有信号肽的亲水性蛋白,具有GAST家族蛋白所特有的GASA结构域。多重序列比对结果显示和其他物种GAST1蛋白一样,CcGAST1蛋白C端非常保守,含有12个保守的半胱氨酸。以不同植物GAST1蛋白序列构建进化树,发现克里曼丁橘与甜橙亲缘关系最近,其次是核桃。[结论]CcGAST1富含半胱氨酸和脯氨酸残基,其保守的GASA结构域和12个保守的半胱氨酸残基可能与其功能相关。

FHL1与泌尿系肿瘤发生发展关系的研究进展

四个半LIM结构域基因1(FHL1)蛋白含有四个半LIM结构域,LIM结构域通过调节蛋白相互作用来参与肌动蛋白细胞骨架重构和转录等过程。FHL1在大多数前列腺癌和膀胱癌组织中低表达,与前列腺癌的发生、转移和耐药相关,与膀胱癌的迁移和侵袭相关,参与肿瘤进展。在肾细胞癌中,不同病理类型的肾细胞癌组织中FHL1表达水平不同,不同肾乳头状细胞癌亚型的FHL1表达水平不同。希佩尔-林道综合征患者肾透明细胞癌病灶的FHL1表达水平与病灶大小相关,FHL1及其剪接变体可能通过抑制Notch信号通路参与低Fuhrman分级(≤2级)肾乳头状细胞癌的产生。本文对FHL1在泌尿系肿瘤中的研究进展作一综述。

FHL2通过SK-1/S1P通路改善高糖诱导内皮细胞功能障碍的机制研究

目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)对高糖引起内皮细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用MTT检测含不同浓度葡萄糖培养基培养下的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的细胞活力。将HUVECs分为对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、siNC组(30 mmol/L葡萄糖+siNC)和siFHL2组(30 mmol/L葡萄糖+siFHL2)。利用Western blot检测对照组和高糖组的HUVECs中FHL2蛋白表达水平。采用实时定量PCR法检测转染siFHL2后FHL2的表达水平。运用Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。利用Western blot检测凋亡相关蛋白FHL2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved caspase 3表达水平。采用成管实验检测各组HUVECs的成管能力。利用Western blot检测各组SK-1/1-磷酸鞘氨醇(SK-1/S1P)通路中的蛋白表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)检测S1P表达水平变化。结果与对照组相比,高糖组HUVECs内FHL2表达上调(t=4.407,P<0.05)。与对照组相比,高糖组HUVECs凋亡水平升高,Bax和cleaved caspase 3的表达也较对照组显著上调,而下调FHL2表达后,细胞凋亡减少,凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase 3的表达下调(P<0.05)。此外,FHL2表达下调改善了HUVECs的成管能力。分子机制分析显示,与对照组比较,高糖组p-SK-1表达显著下调(P<0.05),而下调FHL2后p-SK-1水平显著上调(P<0.05),S1P水平也显著上调(P<0.05)。结论FHL2可改善高糖引起的内皮细胞功能障碍,其作用机制可能与SK-1/S1P信号通路有关。

急性白血病患者骨髓细胞LIMD1，VEGF-C，CTGF和Survivin的mRNA异常表达及相关性研究

目的研究LIM结构域蛋白1抗体在急性白血病患者的异常表达及相关性。方法选择首次确诊且未接受过治疗的急性白血病患者纳入初治组、接受化疗并达到完全缓解的白血病患者纳入缓解组、骨髓象正常的非恶性血液疾病患者纳入对照组，分离培养骨髓细胞，检测细胞中LIMDl，VEGF—C，CTGF和Survivin的mRNA含量及细胞增殖能力。结果LIMD1的mRNA含量在三组中从小到大顺序为初治组（14．52±1．96）mg，缓解组（76．67±9．56）mg和对照组（111．27±16．45）mg，差异均有统计学意义（P〈0．05）；MTT值在三组中从小到大顺序为对照组（100±15．34），缓解组（151．77±19．34）和初治组（314．45±52。28），差异均有统计学意义（P〈0．05）；VEGF-C的mRNA含量在三组中从小到大顺序为对照组（104．78±15．14）mg，缓解组（146．63±18．84）mg和初治组（259．34±31．45）mg，差异均有统计学意义（P〈0．05）；CTGF的mRNA含量在三组中从小到大顺序为对照组（99．27±16．67）mg，缓解组（162．15±19．34）mg和初治组（325．56±36．72）mg，差异均有统计学意义（P〈0．05）；Survivin的mRNA含量在三组中从小到大顺序为对照组（109．44±15．78）mg，缓解组（134．39±16．67）mg和初治组（277．74±29．34）mg，差异均有统计学意义（P〈0．05）；LIMD1与增殖能力以及VEGF-C，CTGF，Survivin的mRNA含量呈负相关（β=0．679-0．795，P〈0．05）。结论LIMD1在急性白血病患者骨髓细胞中的表达减少，且与细胞增殖以及恶性生物学分子VEGF—C，CTGF和Survivin的表达具有相关性。

CSTB基因启动子区十二核苷酸重复序列d[CGCGGGGCGGGG]n形成串联G-四链体的研究

DNA串联重复序列扩展是引起多种神经性疾病的一个重要因素。对重复序列形成的高级结构研究可为相关疾病的发病机制和治疗策略提供重要的理论基础。位于半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(cystatin B,CSTB)基因启动子区的一段十二核苷酸重复序列d[CGCGGGGCGGGG]n的扩展是导致其表达异常,进而引起神经退行性疾病进行性肌阵挛癫痫(progressive myoclonus epilepsy,EPM1)的主要原因。但对其可能机制及高级结构的研究尚未见报道。本研究采用圆二色光谱法(circular dichroism spectroscopy,CD)和核磁共振波谱法(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR),对含有多个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]n(n=2,4)形成的高级结构进行了解析。结果发现,含有2个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]2序列,可在1价阳离子K+诱导下,形成稳定的平行链G-四链体结构。而含4个重复单元的d[CGCGGGGCGGGG]4序列,可在分子内形成串联G-四链体堆叠排列。说明含多个重复单元的十二核苷酸重复序列,可形成分子内串联堆叠G-四链体高级结构。这些结果为十二核苷酸重复序列扩展,导致CSTB基因表达异常的分子机制提供了一种可能的合理假说,并为后续寻找小分子配体识别十二核苷酸串联重复扩展序列,进而调控CSTB基因表达的EPM1治疗策略提供了理论基础。

FHL1在恶性肿瘤发生发展中的调控机制研究进展

4个半LIM结构域蛋白1(Four and a half LIM domains protein 1,FHL1)属于LIM-only家族成员之一,通过LIM结构域与其他蛋白相互作用,在转录调节、细胞运动和细胞增殖等功能中发挥重要作用,而且与肺癌、乳腺癌、胃肠道肿瘤、膀胱癌等多种肿瘤的发生发展密切相关。已有研究证实,FHL1在肌肉发育、肌病和心血管疾病中的重要性。本文综述了FHL1在多种肿瘤发生发展中的作用,旨在为临床寻找新型的生物标记物和药物作用靶点提供思路。

四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎大鼠的实验研究

目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后四妙散组以四妙散药液灌胃,正常对照组和KOA模型组以生理盐水灌胃。连续灌胃4周后取膝关节软骨组织,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定凋亡细胞所占比例,采用荧光定量PCR检测关节软骨组织中凋亡和自噬相关基因表达水平。结果:与正常对照组比较,KOA模型组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著升高,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著升高,自噬相关蛋白LC3的表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与KOA模型组比较,四妙散组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著降低,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著降低,自噬相关蛋白LC3的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:软骨细胞凋亡是KOA发病中的重要因素,该凋亡可能通过FADD-CASP3途径发挥作用。软骨细胞自噬作用的激活可抑制细胞凋亡,可能是延缓及控制KOA进展的一个新机制,四妙散可能通过该机制发挥治疗作用。

结肠癌组织中KiSS-1和FHL1的表达与临床意义

目的:研究结肠癌患者癌组织中人吻素1(kisspeptin 1,KiSS-1)、4个半LIM结构域蛋白1(four and a half LIM domains protein 1,FHL1)的表达与临床意义。方法:选择唐山市人民医院2010年10月至2011年5月收治的69例接受手术及术后化疗的结肠癌患者作为研究对象,分别采用免疫组织化学技术和RT-PCR技术检查KiSS-1与FHL1在结肠癌组织中的表达,随后结合患者临床信息及随访资料分析KiSS-1与FHL1表达在结肠癌中的临床意义。结果:结肠癌组织中KiSS-1,FHL1蛋白及mRNA均低于癌周组织,差异具有统计学意义(P<0.05);KiSS-1,FHL1表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);KiSS-1和FHL1阳性表达患者的5年总体生存率明显高于阴性表达患者,差异具有统计学意义(P<0.05);结肠癌组织中KiSS-1与FHL1表达呈正相关(r=0.698,P=0.012),均是结肠癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论:KiSS-1与FHL1在结肠癌组织中表达下降或缺失,联合检测KiSS-1与FHL1蛋白对判断结肠癌生物学行为、评估患者预后具有一定的临床价值。

FHL1和Paxillin在大鼠气道黏液高分泌中的表达

目的探讨FHL1和Paxillin在大鼠气道黏液分泌中的作用。方法将20只雄性Wistar大鼠分为正常对照组和实验组(内毒素E组)。采用HE染色和阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色进行气道上皮杯状细胞计数及检测气道黏液物质表达。采用免疫组化法检测各组大鼠黏液腺FHL1、Paxillin和MUC5AC蛋白的表达,对肺组织切片进行图像分析。结果内毒素E组气道上皮杯状细胞数、气道MUC5AC、气道及肺组织FHL1、Paxillin和黏液物质表达分别与正常对照组相比升高(P<0.05)。FHL1和Paxillin的表达与MUC5AC的表达呈正相关(r=0.962,0.868,P<0.05)。结论大鼠气道和肺组织高表达FHL1和Paxillin,可能参与了气道黏液高分泌的发生。

FHL2与LDHA相互作用促进胶质瘤细胞的增殖

目的:探讨四个半LIM结构域2(FHL2)蛋白对胶质瘤细胞增殖的影响及其分子机制。方法:利用TCGA和CGGA数据库分析胶质瘤组织中FHL2 mRNA表达水平与患者预后的关系。通过WB法检测人胶质瘤组织标本及人胶质瘤细胞U87、T98G、U251、SNB19、GSC23、A172、LN229、G267和星形胶质细胞NHA中的FHL2蛋白表达水平。利用慢病毒载体构建稳定敲低FHL2的U87细胞和过表达FHL2的SNB19细胞,即U87-shGFP、U87-shFHL2-1#、U87-shFHL2-4#和SNB19-3flag、SNB19-3flag-FHL2组。通过CCK-8法、克隆形成实验检测敲低和过表达FHL2对细胞增殖的影响,免疫共沉淀(Co-IP)和液相色谱-串联质谱(LC/MS)法筛选FHL2在胶质瘤细胞中的相互作用蛋白,并用Co-IP和免疫荧光法验证它们的结合作用和共定位情况。使用酶标仪检测敲低和过表达FHL2细胞内乳酸产量和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化,WB法分析FHL2、LDHA及p-LDHA在正常脑组织和胶质瘤组织中的蛋白表达差异及其相互关系。在过表达FHL2的SNB19细胞中使用LDHA的小分子抑制剂AT-101,通过CCK-8实验和酶标仪比色法验证FHL2在胶质瘤乳酸代谢中的作用,验证AT-101在胶质瘤中潜在的治疗效果。结果:Co-IP和LC/MS检测发现,FHL2与LDHA在胶质瘤细胞中存在相互作用。FHL2过表达可提高LDHA活性和乳酸生成(均P<0.001),进而促进胶质瘤细胞增殖(P<0.001)。相反,敲低FHL2会降低LDHA活性和乳酸产量(P<0.001或P<0.05)并抑制细胞增殖(P<0.001)。AT101能抑制LDHA活性,并显著抑制FHL2促进胶质瘤细胞的增殖,同时恢复磷酸化LDHA(Y10)水平(P<0.01或P<0.001)。结论:FHL2与LDHA蛋白相互作用,FHL2通过激活p-LDHA(Y10)的表达促进LDHA活性和乳酸产生,进而促进胶质瘤细胞的增殖,靶向这种相互作用可能成为治疗胶质瘤的潜在策略。

FHL2通过MGMT影响胶质母细胞瘤U87细胞对替莫唑胺的耐药性

目的:探讨干扰四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)的表达对胶质母细胞瘤U87细胞中O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)表达的影响,以及对U87细胞替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法:利用慢病毒感染技术分别将携带不同FHL2干扰序列的慢病毒(shFHL2-1#、shFHL2-4#)及其阴性对照(shN)感染U87细胞,分别命名为shFHL2-1#、shFHL2-4#和shN组;采用siRNA转染技术将siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN转染至U87细胞,为siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN组,qPCR和WB法验证FHL2或MGMT的敲低效果。用TMZ处理上述各组细胞(以DMSO处理组为对照),随后以CCK-8法和细胞克隆形成实验检测TMZ处理前后FHL2或MGMT敲低组细胞的增殖情况,FCM检测TMZ处理前后FHL2敲低组细胞的凋亡情况,WB法和免疫荧光法检测敲低FHL2对U87细胞中MGMT表达的影响,WB法检测TMZ处理对各组细胞中FHL2和MGMT表达水平的影响。结果:成功构建敲低FHL2或MGMT表达的U87细胞。与shN组相比,shFHL2-1#、shFHL2-4#组U87细胞的增殖能力减弱、凋亡水平升高(均P<0.01),MGMT表达水平明显降低(均P<0.01)。经TMZ处理后,与相应的DMSO处理组相比,shN组细胞中FHL2和MGMT的表达水平显著升高(均P<0.05),而细胞的增殖和凋亡均无显著变化(均P>0.05);shFHL2-1#、shFHL2-4#组细胞中FHL2和MGMT的表达水平无显著改变(均P>0.05),但细胞增殖能力进一步显著降低、凋亡水平进一步显著升高(均P<0.01)。敲低MGMT使U87细胞增殖减慢(P<0.01),而siMGMT-1#、siMGMT-4#组细胞经TMZ处理后增殖能力进一步降低(均P<0.01)。结论:干扰FHL2表达使得U87细胞增殖减慢而凋亡加剧、MGMT表达下调,提示FHL2可能通过影响MGMT的表达调控U87细胞对TMZ的耐药性。

FHL2和PBX3在卵巢癌组织中表达与临床病理特征的相关性研究

目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在卵巢癌(OC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取广东省阳江市人民医院2017年6月至2019年6月收治的63例OC患者作为研究对象,收集患者的OC组织和癌旁正常组织(距肿瘤边缘4 cm处)进行研究,采用免疫组化法检测组织中的FHL2与PBX3蛋白的表达水平,并分析其与OC患者临床病理特征的关系,采用Cox回归模型分析影响OC患者预后的相关因素。结果患者癌组织中FHL2和PBX3蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05);FHL2与PBX3蛋白表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、腹水和病理分期具有显著相关性(P<0.05);所有OC患者中位生存期为30.75(24.82,36.70)个月,其中FHL2阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.67(6.33,29.01)和35.36(32.30,38.41)个月,PBX3阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.01(14.11,19.91)和33.75(31.45,36.05)个月,差异具有统计学意义(Log rank P<0.05)。经单因素分析,肿瘤低分化、淋巴结转移、病理分期Ⅲ+Ⅳ期、FHL2及PBX3阳性表达患者的生存时间均显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);Cox回归模型分析表明,淋巴转移情况(HR=0.17,95%CI:0.05~0.53)、腹水(HR=0.02,95%CI:0.00~0.17)、病理分期(HR=11.45,95%CI:2.95~44.49)、FHL2(HR=0.19,95%CI:0.05~0.71)及PBX3表达水平(HR=0.22,95%CI:0.08~0.57)均为OC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论FHL2与PBX3蛋白在OC组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织,且表达水平与OC患者的临床特征显著相关。该研究对于OC的发生、发展及预后均有着重要的临床意义。

CARMA蛋白家族与疾病关系的研究进展

含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白(CARMA),属于膜相关鸟苷酸激酶家族成员。CARMA蛋白家族有三个成员,分别是CARMA1、CARMA2和CARMA3。CARMA蛋白家族三个成员均可通过与B细胞淋巴瘤10(BCL10)、黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤基因1(MALT1)组成CARMA1-BCL10-MALT1(CBM)复合体参与人核转录因子κB(NF-κB)的激活过程,从而发挥其生物学功能,广泛参与各种人类疾病的发生、发展过程。

FHL2与PBX3在宫颈癌组织中表达与临床病理特征及预后的相关性

目的 探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)FHL2与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在宫颈癌组织中的表达与临床特征及预后的相关性。方法 选取该院2013年12月至2015年12月收治的55例宫颈癌患者作为研究对象,回顾性分析患者的临床资料,将收集到的患者标本分组,55例癌组织标本作分为研究组。将55例癌旁组织标本(距肿瘤边缘4cm处)作为对照组。并采用免疫组化法检测所有患者的FHL2与PBX3蛋白的表达,分析FHL2与PBX3蛋白表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系,并采用Cox比例风险分析影响宫颈癌患者预后的相关因素。结果 研究组FHL2、PBX3蛋白阳性表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);FHL2、PBX3蛋白表达与宫颈癌患者的年龄、病理类型等临床特征不相关(P>0.05),但与宫颈癌患者的肿瘤分化程度、淋巴结转移、浸润深度以及病理分级相关(P<0.05),当肿瘤分化程度越低、有淋巴转移、浸润深度越深以及病理程度越高时,FHL2、PBX3蛋白阳性表达率越高(P<0.05);宫颈癌患者平均中位生存期20个月,其中FHL2阳性表达和阴性表达患者的中位生存期分别为18、30个月,PBX3阳性表达和阴性表达患者的中位生存期分别为17、32个月中位生存期;经单因素分析得出:肿瘤低分化、淋巴结转移、浸润深度>1/2、病理分级G3、FHL2、PBX3阳性表达的患者生存时间均显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05);经多因素Cox比例风险回归模型分析得出:肿瘤低分化、淋巴结转移、浸润深度>1/2、病理分级G3、FHL2、PBX3阳性表达均为影响宫颈癌患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论 FHL2与PBX3蛋白在宫颈癌组织中的表达水平升高,且表达水平与宫颈癌患者的临床特征显著相关,对于宫颈癌的发生、发展以及预后均有着重要的临床意义。

原癌基因LMO2短剪切模式的结合蛋白鉴定及功能分析

目的研究原癌基因LMO2短剪切模式（LMO2-C）的结合蛋白在白血病细胞K562中的表达及功能分析。方法利用麦芽糖结合蛋白（MBP）沉淀技术和哺乳动物双杂交技术研究LMO2-C的结合蛋白在K562细胞中的表达；半定量RT-PCR检测过表达LMO2-C的K562细胞中红系发育的标志性基因GPA的表达水平。结果MBP原核表达系统成功表达并被纯化出可溶性MBP-LMO2-C结合蛋白，利用MBP沉淀技术验证了LMO2-C能与K562细胞中内源性的GATA-1、LDB1结合；哺乳动物双杂交试验进一步证明LMO2-C能与LDB1结合，而且其过表达能够抑制LMO2-L与LDB1的结合，抑制率达（81．13±0．68）％；半定量RT-PCR结果显示在过表达LMO2-C的K562细胞中，GPA基因相对表达水平下调（51．00±1．58）％。结论LMO2-C能结合K562细胞中内源性GATA-1、LDB1蛋白，并能下调红系发育的标志性基因GPA的表达。