四分子交联体5表达上调对结直肠癌细胞转移能力的促进作用观察

目的研究上调四分子交联体5(Tspan-5)表达对结直肠癌细胞转移能力的影响。方法构建Tspan-5基因真核表达载体Tspan-5/pEGFP-C1,采用基因转染技术上调Tspan-5在低转移潜能结直肠癌细胞株LST-R1中的表达,采用Western blotting和激光共聚焦鉴定转染结果。采用异质黏附实验研究LST-R1黏附性改变,趋化运动实验研究运动性改变,穿膜侵袭实验研究侵袭性改变,裸鼠肝转移模型研究肝转移能力改变。结果 Western blotting结果显示稳定转染重组Tspan-5真核表达载体的LST-R1细胞表达Tspan-5/EGFP重组蛋白,激光共聚焦显微镜观察显示重组蛋白定位于细胞膜。异质黏附和趋化运动实验显示,上调Tspan-5表达可显著增强LST-R1细胞在基底膜主要成分Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)、玻连蛋白(VN)上的黏附性(P<0.001)及运动性(P<0.001),并可增强LST-R1细胞的侵袭性(P<0.001)。体内肝转移模型显示,上调Tspan-5表达可显著促进LST-R1细胞在裸鼠体内的肝转移能力(P<0.001)。结论 Tspan-5在结直肠癌细胞的转移中发挥重要作用。

四分子交联体Tspan-5的研究进展

四分子交联体Tspan-5属于四分子交联体家族TM4SF的成员之一。研究表明，Tspan-5在神经细胞分化成熟、肿瘤细胞转移和破骨细胞生成中发挥重要作用。Tspan-5还表达于绒毛外滋养细胞中，并且影响滋养细胞的侵袭，提示Tspan-5可能在胚胎植入中起着重要作用。此外，研究发现Tspan-5与ADAM10相互作用，通过调节Notch活性进而改变细胞的侵袭和迁移性，这可能是Tspan-5发挥生物效应的分子机制。

Tspan-5在高转移大肠癌细胞系中的表达及其对黏附行为影响的研究

目的:研究四分子交联体5(tetraspanin 5,Tspan-5)在不同转移潜能大肠癌细胞株中的差异表达及其与大肠癌细胞异质黏附能力的关系。方法:用Western-Blotting研究Tspan-5在3种细胞株的差异表达,用RNAi技术下调Tspan-5在高转移潜能LoVo细胞株中的表达,观察其对LoVo细胞在不同基底膜主要成分上黏附行为的影响。结果:Tspan-5在不同转移潜能大肠癌细胞株中存在差异表达,转移潜能最高的LoVo细胞株表达最强,转移潜能最低的LST-R1细胞株表达最弱,下调Tspan-5可显著抑制LoVo细胞在Collageon Ⅳ、Fibronectin、Laminin、Vitronectin上的黏附行为。结论:Tspan-5在高转移潜能的大肠癌细胞中过表达,并可调节大肠癌细胞的基底膜黏附力,其与大肠癌转移的关系值得进一步研究。

TM4SF9在大肠侧向发育性肿瘤细胞株中的表达及意义

目的:研究四分子交联体5(TM4SF9)在大肠侧向发育性肿瘤(laterallyspreadingturmor,LST)、SW480和Lovo细胞中的差异表达,以及TM4SF9表达差异与三个细胞株黏附能力的关系.方法:用基因芯片技术研究3个细胞株的共同差异表达基因,从中筛选出TM4SF9作为研究对象,用半定量RTPCR技术验证基因芯片检查结果,用黏附实验研究3个细胞株黏附性的差异.结果:基因芯片检查发现TM4SF9在3个细胞株中都有表达,Lovo细胞株表达最强,LST表达最弱,半定量RTPCR检查与基因芯片检查结果相符,黏附实验显示TM4SF9表达水平最高的细胞黏附性最强.结论:TM4SF9在LST,SW480,LOVO3个细胞株中存在差异表达,黏附性较强的细胞株表达较高,其与LST特性的关系值得进一步研究.

GnRHa通过影响大鼠子宫内膜异位症Tspan5的表达影响内膜容受性

目的 探讨Tspan5和OPN与子宫内膜容受性的相关性,阐明Tspan5作为评估内异症患者子宫内膜容受性的参考指标的意义。方法 40只实验大鼠随机分为GnRHa降调模型组(n=20)和对照组(n=20)。GnRHa降调模型组:按0.04 mg/kg进行肌内注射,注射浓度为0.25 mg/mL的长效GnRHa的生理盐水1 d,28 d在当日17点按1∶1的比例和正常雄鼠合笼,第2天早晨8点检查,出现阴栓标为怀孕第1日,按此类推。对照组以等量生理盐水代替GnRHa,余同GnRHa降调模型组。子宫内膜标本进行WB、real time-PCR和免疫组化以检测Tspan5和OPN的mRNA表达和蛋白定位。ELISA法检测血清E2、P、CA125水平,分析Tspan5和OPN与血清E2、P、CA125水平的相关性。结果 Q-PCR、免疫组化和免疫印迹均显示,GnRHa降调模型组GnRHa降调前子宫内膜中Tspan5及OPN蛋白的表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GnRHa降调模型组GnRHa降调后Tspan5及OPN的表达明显下降,接近对照组的表达量(P>0.05)。ELISA法检测血清中E2、P和CA125的表达水平,显示对照组子宫内膜中E2、P和CA125的表达显著高于GnRHa降调模型组(P<0.05)。结论 Tspan5在内异症大鼠的子宫内膜显著高表达,其可能是子宫内膜异位症影响内膜容受性的因素。