玉米发芽率快速检测方法的研究

通过玉米发芽率快速检测方法的研究 ,提出了适合玉米发芽率检测的四唑盐染色快速检测方法 ,筛选出纸床法、纱布法两种新的玉米发芽率检测方法。作为玉米发芽率标准检测方法的补充 ,各实验室根据各自的条件和需要 ,可以自行选择四唑盐染色法、滤纸法、纱布法还是标准法检测玉米发芽率。

新生牛血清促细胞生长活性检测方法的建立与应用

牛血清是医药生物技术产品中重要的原辅材料之一,做好牛血清的质量控制是提高生物制品质量的重要环节。本研究通过应用PK15、BHK21和ST三种兽用生物制品研制中常用的细胞作为载体,选用国内同等价位5个不同厂家生产的新生牛血清作为比较对象,采用细胞倍增时间测定法、细胞克隆形成率测定法、细胞三次连续传代培养法、MTT比色法和微量终点稀释法五种血清质量鉴定的方法进行比较,检测新生牛血清的促细胞生长活性,最终确定了MTT比色法作为便捷高效快速筛选新生牛血清的检测方法。

国内外种子生活力和活力测定技术的最新进展

本文综述了国内外种子生活力和活力测定的最新进展。主要介绍种子生活力四唑染色测定的正确性和真空、加温及增加四唑染色溶液浓度的快速测定方法,以及已列入《2003国际种子检验规程》第15章种子活力测定中豌豆种子浸出液电导率测定和大豆种子加速老化测定的标准化技术及发展趋向。

慢性重型肝炎患者血浆对C3A 细胞增殖功能的影响

目的观察慢性重型肝炎患者血浆对 C3A 细胞株增殖功能的影响,为研究应用 C3A 细胞株的生物反应器进行生物人工肝支持治疗提供实验依据。方法分别用100%正常人血浆(normal human plasma,NHP)和100%慢性重型肝炎患者血浆(chronic severe hepatitis plasma,CSHP)培养 C3A 细胞,通过四甲基偶氮唑盐法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTr)检测细胞活力,光镜下观察 C3A 细胞在100% CSHP 中和在100% NHP 中的状态,扫描电镜观察细胞在100% CSHP 中和在100% NHP 中的生长状态,研究慢性重型肝炎患者血浆对 C3A 细胞增殖的影响。结果①连续5d 检测100% CSHP 培养的 C3A 细胞活力均明显高于100% NHP 组(t 值分别为6.26、4.89、3.55、3.94、6.17,P 值均小于0.01);②姬姆萨染色可见100% CSHP 培养的C3A 细胞生长较密;③48h 电镜下可见2组细胞生长状态均良好,但是100% CSHP 组处于分裂前期细胞数明显多于100%NHP 组,且分裂较活跃。结论 CSHP 对C3A 细胞的增殖有促进作用。

内皮抑素基因表达产物对血管内皮细胞生长的抑制作用

目的探讨逆转录病毒介导内皮抑素基因转移的方法及其表达产物人内皮抑素对人血管内皮细胞的作用。方法以逆转录病毒为载体,转导内皮抑素基因至肺腺癌A549细胞,获得含内皮抑素基因的A549/Endo细胞。PCR方法检验外源性内皮抑素基因在宿主细胞中的整合。培养A549/Endo细胞,收集上清液。ELISA法检测上清液中内皮抑素的浓度,四唑盐比色试验(MTT)、流式细胞术(FCM)、原位细胞凋亡(TUNEL)观察该上清液对血管内皮细胞EA hy926 的抑制作用。结果PCR法证实A549/Endo细胞基因组中整合有外源性内皮抑素基因。A549/Endo细胞(1×105/ml)培养48h后,上清液中内皮抑素含量为(348±120) pg/ml,MTT法显示含内皮抑素的上清液能明显抑制EA hy926细胞的生长。FCM、TUNEL法显示内皮抑素可诱导EA hy926 凋亡。结论逆转录病毒能高效介导内皮抑素基因转移,内皮抑素基因表达产物能明显抑制人血管内皮细胞的生长,诱导其凋亡。