四次跨膜蛋白1在乳腺癌中的表达及其促进乳腺癌进展的作用机制

目的·探究四次跨膜蛋白1 (tetraspanin 1,TSPAN1)在乳腺癌中的表达,及其对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法·使用免疫组织化学染色(immunohistochemistry staining,IHC)检测106例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织中TSPAN1的表达,并分析其与患者临床特征的相关性。利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析TSPAN1 mRNA在乳腺癌及癌旁组织中的表达,及其与患者临床特征的相关性。在乳腺癌细胞MDA-MB-231、SUM159PT中下调TSPAN1后,通过细胞划痕实验、细胞侵袭实验检测TSPAN1对上述细胞迁移、侵袭的影响,并采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白)的表达。结果·IHC的结果显示,TSPAN1在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织(P=0.000),且其表达水平与肿瘤的总TNM分期、M分期、N分期和病理学分级显著相关(均P<0.05)。对来自TCGA数据库的转录组测序数据分析的结果显示,TSPAN1 mRNA在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织(P=0.000),其在TNMⅢ~Ⅳ期的乳腺癌组织中的表达高于TNMⅠ~Ⅱ期(P=0.007)。与转染Control siRNA相比,转染TSPAN1 siRNA的MDA-MB-231和SUM159PT细胞的迁移、侵袭能力均有所下降,E-钙黏蛋白的表达增加、N-钙黏蛋白及波形蛋白的表达减少(均P<0.05)。结论·TSPAN1在乳腺癌组织中表达较高,可促进乳腺癌细胞的迁移和侵袭。

胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B、三叶因子家族1表达与胃癌的关系

目的探讨胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B(LAPTM4B)、三叶因子家族1(TFF1)蛋白表达与胃癌的关系。方法选取2015年8月至2018年6月郑州人民医院收集的80例胃癌组织及40例胃癌癌旁组织,采用免疫组织化学染色技术检测LAPTM4B、TFF1蛋白表达情况,观察不同病灶最大径、TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移情况、浸润程度及胃癌组织中LAPTM4B、TFF1蛋白的阳性表达率。结果胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为61.25%、TFF1蛋白阳性表达率为68.75%,胃癌癌旁组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为25.00%、TFF1蛋白阳性表达率为35.00%;胃癌组织均高于癌旁组织(P<0.05)。在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移的胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率分别为78.79%、74.42%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)48.94%、未发生淋巴结转移45.95%的病人(P<0.05);在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移、低分化的胃癌组织中TFF1蛋白阳性表达率分别为90.91%、81.40%、87.10%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)53.19%、未发生淋巴结转移54.05%、高分化和中分化的57.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌组织中LAPTM4B、TFF1表达强度明显较癌旁组织增强,可能与胃癌的发生及发展有一定的关系。

四跨膜蛋白超家族Tetraspanins在肿瘤及纤维化疾病中的作用概况

Tetraspanins是四跨膜蛋白超家族(Transmembrane 4 Superfamily,TM4SF),可以与自身和/或细胞表面分子如整合素,免疫球蛋白超家族蛋白,蛋白酶,生长因子受体和细胞内信号分子相结合形成四跨膜蛋白网络(Tetraspanin Enriched Microdomains,TEMs),调节细胞信号转导,细胞粘附、迁移、增殖、分化等生理过程。Tetraspanins通过影响肿瘤细胞的迁移、侵袭、血管生成、上皮细胞间质转化(Epithelial Mesenchymal Transition,EMT),进而参与肿瘤的发生发展。纤维化疾病与肿瘤的发病机制存在很多相似之处。近年来,有研究发现Tetraspanins在纤维化疾病如肝纤维化及肺纤维化中同样起着重要作用。为进一步加深对Tetraspanins在疾病中的认识,文章主要对Tetraspanins的结构、基本生物学功能、组织分布及其在肿瘤和纤维化疾病中的作用进行阐述,将有助于对肿瘤及纤维化疾病发病机制的理解,并为疾病的深入研究及探索新的治疗药物提供理论依据。

四次跨膜超家族蛋白3在肿瘤中的研究进展

四次跨膜超家族蛋白3(TM4SF3),又称为CO-029、TSPAN8,在大鼠中被称为D6.1A,是四次跨膜超家族(TM4SF)中的一员。TM4SF3在结直肠癌、肝癌、食管癌及胰腺癌等多种消化系统肿瘤中存在高表达,其表达与消化系统肿瘤患者的不良预后密切相关。TM4SF3可能通过促血管再生、增强肿瘤细胞迁移等促进肿瘤的转移与进展。该文旨在对TM4SF3在肿瘤中的作用及其分子生物学机制等方面的研究进展予以综述。

曼氏迭宫绦虫四次跨膜蛋白(SmTSP)的生物信息学分析

目的:通过对曼氏迭宫绦虫的4次跨膜蛋白(SmTSP)潜在的生物学特征和参数进行分析,从而获得其具有的潜在生物学功能和应用价值。方法:利用美国国家生物技术信息中心(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(http://www.expasy.org/)提供的在线分析工具对编码蛋白的氨基酸序列的理化性质,跨膜结构和三维空间结构进行分析,同时利用Vector NTI suite和TreeView software生物信息分析软件进行编码氨基酸序列的相似性比对和进化树分析,利用CBS Prediction Servers BepiPred进行最大胞外环(LEL)的B细胞线性表位预测。结果:从文库中得到的SmTSP是全长基因,编码的蛋白是24.8kDa,理论等点为7.88,是一个稳定的蛋白分子。编码该蛋白的氨基酸序列共有4个跨膜区,分别是TM1aa16~38、TM2aa58~80、TM3aa87~109、TM4aa200~222。LEL中含有CCG结构、PXSC结构、GC结构和含有9个二聚体结合位点的保守特征结构。SmTSP全长序列与多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫的相似性均能达到72%,但是与吸虫之间的相似性仅达到31%~59%,然而与人类相似性仅有23%,与小鼠的相似性最低,仅有17%。在进化树分析中,SmTSP与绦虫的亲源性在对比序列中是最近的,吸虫类次之,但是与埃及裂体吸虫和牛裂体吸虫、其他寄生虫(美洲钩虫和秀丽隐杆线虫)的亲源性相对较远,与哺乳动物亲源性最远。LEL有3个B细胞表位,分别是13aa^21aa、41aa^63aa和70aa^76aa。此外与人类四次跨膜蛋白的LEL中B细胞表位数量、分布的位置和编码的氨基酸都不同。结论:SmTSP可能是一个定位于虫体表膜并且具有应用前景的疫苗候选分子。

四次跨膜蛋白CD81促进人绒毛外滋养细胞失巢凋亡的初步研究

目的:探讨四次跨膜蛋白CD81表达对人妊娠早期绒毛外滋养细胞失巢凋亡的作用。方法:构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81),将pCS2-CD81或CD81特异的小干扰RNA(siCD81)瞬时转染至人妊娠早期绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞),同时转染pCS2-EV或siRNA control作为对照组。实时荧光定量PCR(QRT-PCR)和Western blot法检测pCS2-CD81及siCD81在HTR-8/SVneo细胞中的表达效率。采用聚甲基丙烯酸2-羧乙基酯(poly-HEMA)包被的培养皿模拟细胞悬浮培养的环境,采用Annexin V/PI双染法分别检测CD81对正常贴壁生长及悬浮培养的HTR-8/SVneo细胞凋亡的影响。结果:成功构建CD81的高表达质粒(pCS2-CD81)。与转染pCS2-EV比较,瞬时转染pCS2-CD81的HTR-8/SVneo细胞高表达CD81蛋白(P<0.05);与转染siRNA control比较,siCD81有效抑制HTR-8/SVneo细胞的内源性CD81表达(P<0.05)。过表达CD81或抑制内源性CD81表达对HTR-8/SVneo细胞的普通凋亡无显著影响,但过表达CD81可显著促进HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡(P<0.05),抑制内源性CD81表达能减少HTR-8/SVneo细胞的失巢凋亡达15.5%(P<0.05)。结论:四次跨膜蛋白CD81促进人妊娠早期绒毛外滋养细胞的失巢凋亡。

四次跨膜蛋白分子的研究进展

四次跨膜蛋白分子自1990年被发现以来，逐渐成为研究热点。在四次跨膜蛋白分 子的结构、家族成员、生理及病理意义等方面取得了突破性进展，本文对此进行综述。

四次跨膜蛋白8在肿瘤中的研究进展

四次跨膜蛋白8(tetraspanin 8,Tspan8),又称为CO-029或TM4SF3,是四跨膜超家族(transmembrane 4 super family,TM4SF)中的一员。Tspan8在多种肿瘤中存在高表达现象,其可能通过促进血管再生以及增强肿瘤细胞迁移和侵袭等促进肿瘤的转移与进展。本文旨在对Tspan8在肿瘤中的作用、对肿瘤的分子生物学机制和肿瘤治疗等方面的研究进展予以综述。对探索肿瘤发生和发展机制、预测肿瘤进程、预后评估以及研究新型靶向治疗药物有重要意义。

胃腺癌组织中TM4SF5 mRNA、蛋白的表达变化及其意义

目的观察胃腺癌组织中四次跨膜蛋白超家族5(TM4SF5) mRNA、蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法选取胃腺癌组织及癌旁正常组织各76例份,采用qRT-PCR法和免疫组化法分别检测其TM4SF5 mRNA、蛋白,并分析TM4SF5蛋白表达与胃腺癌临床病理参数的关系。结果胃腺癌组织、癌旁组织中TM4SF5 mRNA相对表达量分别为1. 236±0. 731、0. 402±0. 210,两者比较,P <0. 05。胃腺癌、正常组织中TM4SF5蛋白阳性率分别为59. 2%(45/76)、13. 2%(10/76),两者比较,P <0. 05。TM4SF5蛋白表达与胃腺癌淋巴结转移、浸润深度相关(P均<0. 05)。结论胃腺癌组织中TM4SF5 mRNA、蛋白表达升高,TM4SF5蛋白表达与胃腺癌淋巴结转移、浸润深度相关,其可能与胃腺癌的发生发展有关。

趋化素样因子超家族成员5研究进展

趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM5是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的四次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。研究表明,CMTM5广泛表达于人类正常组织,在大多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,恢复其表达可抑制肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移等生物行为。CMTM5抗肿瘤活性的机制尚不明确,可能参与了多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM5与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。

四次跨膜蛋白在病毒感染中作用的研究进展

四次跨膜蛋白(Tetraspanins,Tspans)是一个作为“细胞膜主要组织者”的跨膜糖蛋白家族。它们与其他膜蛋白横向结合形成富含Tspans的微结构域(Tetraspanin-enriched microdomains,TEMs),在细胞表面建立了独特的平台,从而直接或间接参与病毒感染的多个阶段。Tspans在调控病毒进入、转录、复制和组装释放等阶段均发挥了重要作用。研究Tspans在病毒感染中的作用,可以为病毒感染疾病的临床药物研发提供新靶点。本文综述了Tspans在病毒感染中作用的研究进展。

四次跨膜蛋白超家族成员与肿瘤的研究进展

Tetraspanins又称四次跨膜蛋白超家族(transmembrane 4 superfamily,TM4SF),包含33个家族成员,通过形成二聚体或异二聚体,或与其他蛋白质分子如整合素、黏附分子、主要组织相容性复合体II类抗原(major histocompatibility complex class II,MHC II)、T细胞受体等相互作用,调控细胞黏附、增殖、组织分化、免疫反应等生物学过程。越来越多研究表明,一些TM4SF分子也与肿瘤发生发展密切相关,参与迁移、上皮-间质转化、血栓形成、肿瘤干细胞及外泌体信号转导等多阶段过程。对能够促进或抑制肿瘤发生发展的TM4SF功能和调控机制的深入了解,将为未来有针对性的靶向干预提供新的策略。

趋化素样因子超家族8研究进展

趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM8是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的4次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。CMTM8在多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭功能。CMTM8抗肿瘤的机制尚未完全明确,可能参与多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM8与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。

四次跨膜蛋白-1与肝癌关系的研究进展

原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球病死率极高的恶性肿瘤,然而到目前为止HCC的临床治疗效果仍不令人满意。因此,亟需寻找更为可靠、安全的HCC治疗手段。四次跨膜蛋白-1是四次跨膜蛋白家族的重要成员之一,其介导细胞发育、活化、生长和运动的信号转导过程。四次跨膜蛋白-1在HCC、肺癌、结直肠癌、膀胱癌、卵巢癌、胰腺癌等多种肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。该文概述了TM4SF1的结构和功能,归纳了已经研究过的TM4SF1促进HCC发生、发展的相关机制,并回顾了近年来TM4SF1作为癌症免疫疗法的理想抗原和新型生物标志物的临床应用。

四次跨膜蛋白-1与胰腺癌的关系研究进展

胰腺癌是具有高度侵袭性的恶性肿瘤之一,目前在胰腺癌的手术治疗及放化疗方面虽已取得明显进展,但胰腺癌患者术后5a生存率仍较低,因此寻找胰腺癌新的靶向治疗方法至关重要。四次跨膜蛋白-1是四次跨膜蛋白家族的重要成员之一,其在多种肿瘤组织中高表达,而在正常组织中低表达,且该基因与肿瘤细胞侵袭、迁移和血管生成等多种功能密切相关,近年已作为恶性肿瘤治疗的新靶点被广泛研究。本文就四次跨膜蛋白-1与胰腺癌的研究进展作一综述。

血清LTBP2、TM4SF1在大肠癌患者预后评估中的研究

目的探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、四次跨膜蛋白1(TM4SF1)在大肠癌患者预后评估中的意义。方法将南阳市中心医院2016年7月至2019年7月手术治疗的大肠癌患者108例作为试验组,同期108例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清LTBP2、TM4SF1水平;比较不同血清LTBP2和TM4SF1表达水平的大肠癌患者临床资料的差异;采用免疫组化染色法分析大肠癌组织中LTBP2、TM4SF1的表达;Pearson相关分析明确血清LTBP2和TM4SF1表达的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LTBP2和TM4SF1联合评估大肠癌患者预后的价值。结果试验组血清LTBP2和TM4SF1水平均高于对照组(P<0.05),二者表达水平呈正相关(r=0.305,P<0.05),大肠癌组织LTBP2和TM4SF1表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤直径>5cm、肿瘤低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管瘤栓的大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1表达水平高于患者肿瘤直径≤5 cm、肿瘤中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管瘤栓的大肠癌患者(P<0.05)。血清LTBP2、TM4SF1联合预测大肠癌患者预后不良的AUC为0.886。结论大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1水平升高,二者联合对大肠癌患者预后不良具有较好的预测价值。

血清HE4、TM4SF1、HSP90α预测卵巢癌患者术后复发价值

目的:探究血清人附睾分泌蛋白4(HE4)、四次跨膜蛋白1(TM4SF1)、热休克蛋白90α(HSP90α)联合对卵巢癌(OC)患者术后复发的预测价值。方法:选取2018年10月-2020年12月在本院手术治疗的OC患者122例临床资料(OC组),根据术后3年随访复发情况分为未复发组(n=85)和复发组(n=37);同期在本院治疗的卵巢肿瘤良性患者102例(良性组)、本院健康体检正常女性115例为对照组。对比3组血清HE4、TM4SF1、HSP90α水平;logistic回归分析OC患者术后复发影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HE4、TM4SF1、HSP90α对OC术后复发的预测价值。结果:OC组血清HE4(158.49±41.27 pmol/L)、TM4SF1(171.28±42.33 ng/ml)、HSP90α(79.22±15.38 ng/ml)水平均高于良性组(34.53±8.39 pmol/L、111.18±25.46 ng/ml、58.19±10.24 ng/ml)和对照组(33.31±8.12 pmol/L、102.37±22.39 ng/ml、56.22±9.27 ng/ml),且复发组血清HE4、TM4SF1、HSP90α水平均高于未复发组(均P<0.05),而良性组与对照组水平均无差异(P>0.05)。logistic回归分析显示,FIGO分期III期、分化程度低、淋巴结转移、血清HE4、TM4SF1、HSP90α水平升高均为OC患者术后复发的影响因素。ROC曲线分析显示,HE4、TM4SF1、HSP90α单独预测OC患者术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.874、0.828、0.872,敏感度分别为89.2%、89.2%、89.2%,特异度分别为66.8%、69.2%、63.3%,3项联合预测OC患者术后复发的AUC为0.958,敏感度86.5%、特异度78.3%联合预测AUC最佳(P<0.05)。结论:OC术后复发患者术前血清HE4、TM4SF1、HSP90α水平均异常升高,且升高是OC患者术后复发的危险因素,3指标联合检测对OC患者术后复发有一定预测价值。

跨膜蛋白CD82在流感病毒感染初期的表达

目的 了解细胞跨膜蛋白CD82在流感病毒感染初期的表达变化,分析CD82在流感病毒感染中的作用。方法 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对流感病毒感染4 h内的HEP-2细胞中CD82蛋白mRNA表达量进行检测。结果 流感病毒感染HEP-2细胞后1 h-3 h细胞CD82的mRNA表达量降低,并且随着流感病毒接种量增加CD82表达量降低持续时间延长。结论 流感病毒可以在转录水平调节宿主细胞CD82的表达。CD82在流感病毒感染初期表达下降,提示CD82可能在流感病毒与宿主细胞粘附和入侵过程中发挥作用。

miR-323a-3p通过靶向结合TM4SF1而调控NSCLC A549细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探究miR-323a-3p、四次穿膜蛋白超家族成员1(TM4SF1)在NSCLC组织和细胞中的表达及两者间的靶向调控关系,观察两者表达对A549细胞增殖、迁移、侵袭和裸鼠移植瘤生长的影响。方法:收集2014年1月至12月间青海省人民医院手术切除的20例NSCLC组织及其相应的癌旁组织,qPCR和WB法检测癌组织中miR-323a-3p、TM4SF1 mRNA和TM4SF1蛋白的表达。向A549细胞转染miR-323a-3p mimic,采用MTT法、Transwell法、WB法检测miR-323a-3p过表达对细胞的增殖、迁移和侵袭以及TM4SF1、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。采用生物信息学预测工具StarBase和双荧光素酶报告基因实验分析miR-323a-3p与TM4SF1靶向关系。将si-TM4SF1转染至A549细胞,以及分别将miR-323a-3p mimic与pcDNA或pcDNA-TM4SF1共转染A549细胞,评估细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化;同时建立各组细胞的BALB/c裸鼠移植瘤模型,在14、21和28 d时测量并计算移植瘤体积。结果:与癌旁组织相比,NSCLC组织中miR-323a-3p表达水平明显下调,TM4SF1 mRNA和蛋白表达水平显著上调(均P<0.01)。miR-323a-3p过表达或抑制TM4SF1表达都会降低A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力及cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达而促进p21蛋白表达,并且抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长(均P<0.01)。生物信息学StarBase工具预测和双荧光素酶基因报告实验结果显示miR-323a-3p能够靶向结合TM4SF1基因并调控TM4SF1的表达。上调TM4SF1表达后,miR-323a-3p过表达对A549细胞恶性生物学行为及cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达、移植瘤生长的抑制作用均被部分逆转(均P<0.01),对p21蛋白表达的促进作用也被逆转(P<0.01)。结论:miR-323a-3p通过靶向下调肺癌A549细胞中TM4SF1的表达抑制细胞的增殖、迁移、侵袭和裸鼠移植瘤生长。

TM4SF1对结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的利用生物信息学方法分析四次跨膜蛋白L6家族成员1(Transmembrane-4 L-six family member-1,TM4SF1)在结直肠癌组织中表达的情况,并探究TM4SF1对结直肠癌增殖、迁移及凋亡的影响。方法通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库利用生物信息学方法分析TM4SF1在结直肠癌组织和正常组织中表达情况。qRT-PCR方法检测TM4SF1 mRNA在结直肠癌细胞中表达情况。构建下调TM4SF1的结直肠癌细胞株,分为三组进行研究,包括对照组(未做任何处理的细胞)、NC组(加入空载质粒载体)、si-TM4SF1组(加入TM4SF1-siRNA质粒),应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR,qRT-PCR),验证转染效率;采用CCK-8实验观察各组细胞在48 h的增殖情况;采用Transwell实验检测各组细胞迁移能力;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果TCGA数据库分析结果显示与正常结直肠组织相比TM4SF1 mRNA在结直肠癌组织中表达增高(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,与对照组、NC组相比,si-TM4SF1组中TM4SF1 mRNA表达量明显降低(P<0.01);同时,CCK-8实验结果显示,与对照组、NC组相比,si-TM4SF1组中SW1116细胞增殖能力明显降低(P<0.01);Transwell实验结果表明,si-TM4SF1组中SW1116细胞迁移能力与对照组、NC组相比明显降低(P<0.01);流式细胞术结果显示,与对照组、NC组相比,si-TM4SF1组中SW1116细胞凋亡明显增加(P<0.01)。结论下调TM4SF1可以抑制结直肠癌SW1116细胞的增殖、迁移能力,促进结直肠癌细胞凋亡。