亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与食管癌易感性的关系

目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因C6 77T多态性及其和烟酒茶嗜好相互作用与食管癌易感性的关系。方法 在上消化道癌高发区淮安市进行了一个病例 对照研究 (食管癌 93例 ,人群对照 2 0 0例 ) ,调查研究对象的生活习惯 ,采用PCR RFLP技术检测研究对象的MTHFR基因型。结果 1.食管癌组和对照组中MTHFR变异型等位基因携带者分别占 6 6 .7%和 6 8.5 % ,其差异无统计学显著性。 2 .在MTHFR野生型基因携带者中 ,吸烟习惯显著增加食管癌发生的危险性 (OR =3.2 2 ,95 %CI:1.0 9～ 9.5 3)。在MTHFR变异型基因携带者中 ,经常饮酒者发生食管癌的危险性显著升高 (OR =2 .30 ,95 %CI :1.0 2～ 2 .5 7)。在野生型和变异型基因携带者中 ,有饮茶习惯者发生食管癌的危险性均显著降低。结论 MTHFR基因的多态性影响吸烟、饮酒与食管癌之间的关系。调查生活习惯、同时检测MTHFR基因型有助于食管癌的预防。

轻度认知功能障碍患者载脂蛋白E基因、亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与情景记忆能力的关系

目的观察轻度认知功能障碍(MCI)患者情景记忆编码和提取成绩的变化,以及这种变化与载脂蛋白E基因(ApoE基因)、亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR基因)C677T位点多态性的关联。方法入组227例研究对象,其中MCI患者(MCI组)109例,正常对照组(NC组)118例,使用情景记忆编码及提取成绩检测方法,对两组间情景记忆编码及提取成绩和反应时间进行检测;并检测入组者ApoE基因多态性、MTHFR基因C677T位点基因多态性,分析MCI组与NC组间基因多态性分布的特点,以及两组间情景记忆成绩的关系。结果(1)MCI组编码、提取正确率均低于NC组,结果差异有统计学意义(P<0.05)。MCI组编码反应时间、提取反应时间均较NC组延长,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)MCI组ApoEε3/ε4、ε4/ε4基因型、MTHFR C677T位点TT基因型分布频率高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)两组间ApoE基因、MTHFR基因C677T位点不同基因型之间情景记忆编码成绩、提取成绩差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)广州市老年人MCI患者的情景记忆编码能力和提取能力均有下降。(2)ApoE基因、MTHFR基因多态性是广州市老年人MCI发病的重要危险因素,ApoE基因、MTHFR基因不同基因多态性对MCI患者情景记忆编码、提取成绩有影响。

血浆同型半胱胺酸水平和5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与原发性下肢深静脉血栓形成的相关性研究

目的:探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与原发性下肢深静脉血栓形成的关系。方法 :选择原发性下肢深静脉血栓患者220例(病例组)和同期对照者240例(对照组),收集年龄、性别和体重等临床资料,测定空腹血糖、血清总胆固醇、纤维蛋白原和D二聚体等生化指标,采用酶联免疫吸附法测定血浆Hcy水平,并应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法进行MTHFR C677T基因多态性的分析。两组年龄、性别、体质指数、空腹血糖和血清总胆固醇差异均无统计学意义(P>0.05),病例组纤维蛋白原、D-二聚体和血浆Hcy值高于对照组(P<0.05)。结果 :MTHFR TT基因型在病例组的分布频率为16.8%高于对照组6.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组CT基因型、TT基因型与CC基因型相比血浆Hcy水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);而在对照组中只有TT基因型与高于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05)。无论是CC基因型、CT基因型或TT基因型,病例组的血浆Hcy水平均高于对照组(P<0.05)。结论 :血浆高Hcy水平是原发性下肢深静脉血栓形成的危险因素。MTHFR C677T基因多态性中TT基因型可能是原发性下肢深静脉血栓形成的一个重要风险遗传因子。

全血直接扩增结合焦磷酸测序法测定亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性

亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C>T和1298A>C两个位点的多态性与临床常用抗肿瘤药物甲氨喋呤及氟尿嘧啶的作用密切相关,对这两个位点多态性的检测能指导临床合理用药。为进一步缩短检测时间,降低检测成本,本研究建立了基于全血直接PCR的焦测序检测方法,采用"HpH Buffer"直接扩增全血模板,仅需1μL全血样本即可对两个位点进行高效扩增。扩增产物经碱变性法制备单链模板后进行焦磷酸测序,经过条件优化,仅需5μL扩增产物和1μL微球即可完成高灵敏的焦测序反应。为验证方法的准确性,检测了12例临床样本,均能正确检测两个位点的基因多态性。本研究为临床基因多态性检测提供了一种操作简便,耗时短,成本低,准确度高的方法,本方法可用于指导甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶的个体化用药。

云南人亚甲基四氢叶酸还原酶基因型多态性与乳腺癌易感性的关联

目的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是叶酸代谢的关键性酶,其催化作用决定了DNA甲基化与DNA合成之间的平衡。MTHFR基因多态性可能会影响叶酸代谢结局,从而构成肿瘤风险因子。研究分析了MTHFR各基因型在云南籍乳腺癌人群和正常人群中的分布差异,初步探索了MTH-FR多态性与乳腺癌易感性之间的关系。方法以多重PCR-RFLP技术,对125例云南籍乳腺癌患者和103例正常人群MTHFR677位点1298位点多态性进行筛查。结果未发现MTHFRC677T和A1298C基因型频率在乳腺癌和对照样本之间存在显著差异。结论在目前样本条件下,上述两个MTHFR位点基因型多态性与云南籍人群的乳腺癌易感性之间无明显相关性。

血浆同型半胱氨酸、血清叶酸及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与结、直肠癌发病关系的研究

目的:研究血浆同型半胱氨酸、血清叶酸及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与结、直肠癌发病的关系。方法:采用PCR-RELP技术检测了216例结、直肠癌患者和111名健康人的MTHFRC677T及A1298C两个位点基因多态,血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平分别采用HPLC方法与96孔板微生物学法测定,并分析其与结、直肠癌的关系。结果:MTHFRC677T的CC、CT和TT基因在健康对照组中的分布频率分别为45.04%、47.74%和7.2%,结、直肠癌组为40.74%、47.2%和12.03%,病例组中TT基因显著高于对照组(χ2=7.81,P<0.05)。MTHFRA1298C的AA和AC基因在健康对照组分布频率分别为45.04%和54.95%,结、直肠癌组为48.8%和53.12%,MTHFRA1298C等位基因在两组人群分布频率的差异无统计学意义(χ2=0.56,P=0.4500)。结、直肠癌患者中拥有TT基因者其血浆总同型半胱氨酸水平显著高于携带CC和CT基因者[分别为(16.12±9.03)、(11.43±4.08)μmol.L-1,P=0.002],对照组中TT基因者其血浆总同型半胱氨酸浓度显著低于携带CC和CT基因者。结、直肠癌患者中拥有TT基因者其血清叶酸水平显著低于携带CC和CT基因者[分别为(4.54±2.78)、(6.86±2.03)mg.ml-1,P<0.05],对照组中TT基因者其血清叶酸浓度也显著低于携带CC和CT基因者。结论:MTHFRC677T位点多态性与高同型半胱氨酸、低血清叶酸在结、直肠癌发病过程中起一定作用。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性对甲氨蝶呤不良反应的影响

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性对类风湿关节炎治疗影响。方法收集类风湿关节炎(RA)病人210例,随机分为甲氨蝶呤(MTX)组,MTX+柳氮磺吡啶(SASP)组,MTX+来氟米特(LEF),SASP+LEF组。于治疗前及治疗后4,12,24及48周检查临床及实验室指标,评价治疗疗效,收集不良反应。同时测定病人的MTHFR基因C677T多态性。结果每组中3种不同基因型的病人之间的疗效差异无统计学意义。但前3组不良反应发生率TT和CT基因型组明显高于CC基因型组;CC基因型组病人随着病情好转,血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平逐渐下降,至48周,与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);而TT和CT基因型组病人随着病情好转,血浆Hcy水平下降不明显,均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。而SASP+LEF组中3组不同基因型病人之间不良反应发生率、血浆Hcy下降水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MTHFR基因C677T多态性与类风湿性关节炎病人使用MTX出现的不良反应相关,可能与Hcy相关。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T和A1298C多态与胃癌的遗传易感性

目的：探讨代谢叶酸的亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因单核苷酸多态与胃癌风险的关系。方法：以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法分析170例胃癌病人和性别、年龄配对的140例正常对照者的MTHFR基因C677T和A1298C基因型及其与胃癌风险的相关性。结果：在正常对照中，MTHFR基因677CC、CT、TT基因型频率分别为47．9％、40％和12．1％，而在胃癌病人中分别为35．9％、45．9％和18．2％。在病例组中677（CT＋TT）变异型基因者占64．1％，显著高于对照组中的52．1％，差异具有显著意义（X^2=4．54，P〈0．05）。与677CC基因型者相比，变异型基因者和下r型基因者发生胃癌的危险性分别高1，67倍（OR为1．67，95％CI为1．06—2．64）和2．67倍（OR为2．67，95％CI为1．382—5．341）。A1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义。但进一步分析发现，1298变异基因型与677变异基因型之间有协同作用。携带MTHFR677TT/1298AC基因型个体发生胃癌的风险是携带MTHFR677CC／1298AA基因型个体的3．684倍（95％CI为0．829～25．776）。结论：MTHFR单核苷酸多态是胃癌的遗传易感性因素。

纤维蛋白原β基因148C/T及亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C/T多态性与脑梗死的关系研究

目的探讨纤维蛋白原(Fg)β基因148(β148)C/T及亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)677C/T多态性与脑梗死易感性的关系。方法按年龄、性别、有无高血压病史及糖尿病史选取相匹配的病例组及对照组各100例,利用聚合酶链反应-变性高效液相色谱法(PCR-DHPLC)确定Fgβ148及MTHFR 677基因型。结果大动脉粥样硬化组(TOAST分型)及相应对照组Fgβ148 CC、CT/TT基因型分布差异有显著性(P=0.035),余各组两个多态位点的基因型分布差异无显著性。吸烟或饮酒的FgβCT/TT基因型携带者在病例组和对照组的分布差异有显著性(均P<0.05)。结论Fgβ148 CT/TT基因型可能是大动脉粥样硬化性脑梗死的危险因素,携带FgβCT/TT基因型同时吸烟或饮酒可能是脑梗死的危险因素。

血清同型半胱氨酸水平、亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与糖尿病肾病相关性研究

目的:探讨血清同型半胱氨酸水平、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的分布情况与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法:利用聚合酶链反应和限制性片断长度多态性(PCR鄄RELP)方法检测了47名健康对照组和40名2型糖尿病肾病患者MTHFR基因的677碱基多态性突变C→T情况,同时测定其血清同型半胱氨酸(Hcy)水平和叶酸水平,并加以对照分析。结果:2型糖尿病肾病患者MTHFR基因突变型C677T基因的频率明显高于对照组,差异极显著(P<0.05),且Hcy水平明显高。在叶酸浓度≤6.92nmol/L时,DN组TT型发生频率及T等位基因频率明显高于对照组(P<0.05);但当叶酸浓度>6.92nmol/L时,DN组TT型发生频率及T等位基因频率与对照组无差异(P>0.05)。结论:MTHFR基因C677T位碱基突变导致血浆同型半胱氨酸水平升高是糖尿病肾病发病的重要危险因素。

佛山汉族高血压患者亚甲基四氢叶酸还原酶基因的分布

目的探讨广东佛山汉族地区高血压患者亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的分布。方法选择高血压患者共998例进行MTHFR基因检测。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)法,精准定位基因型;应用高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸(HCY)。结果参与检测的高血压患者共998例(男494例,女504例),MTHFR基因检测结果为TT型82例(8.22%),CT型338例(33.87%),CC型578例(57.92%)。其中男性TT型54例(10.93%),CT型168例(34.01%),CC型272例(55.06%),女性TT型28例(5.56%),CT型170例(33.73%),CC型306例(60.71%)。男性TT型比例高于女性(10.93%vs5.56%,P<0.01)。同时进行检测HCY者共有739例(男351例,女388例),为H型高血压者389例(52.64%),男性224例(63.82%),女性165例(42.53%),男性比例也高于女性。结论佛山地区TT型为8.22%,基因频率低。H型高血压为52.64%,偏低。表明基因多态性分布存在地区差异。H型高血压及TT型基因男性均高于女性。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性、同型半胱氨酸和叶酸与冠脉病变支数的关系

近10余年的大多数研究表明血中同型半胱氨酸(homoc-ysteine,HCY)轻度升高和冠状动脉粥样硬化关系密切,可能是冠心病的一个重要危险因素.HCY是蛋氨酸代谢中间产物,叶酸和VitB12、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因突变对HCY的血浓度均产生影响,本研究分析中国人冠心病患者中HCY、叶酸、VitB12和亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性诸因素与冠脉病变支数间的关系.

叶酸拮抗亚甲基四氢叶酸还原酶基因沉默的实验研究

目的:探讨叶酸补充拮抗5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因下调的作用机制。方法:MTT法检测叶酸梯度补充后拮抗MTHFR基因功能下调对细胞增殖的影响;流式细胞仪分析MTHFR基因功能下调补充叶酸前后细胞周期的改变。结果:MTHFR基因功能下调后,不同剂量叶酸补充可以逆转MTHFR基因功能下调对EPM细胞的不良影响,影响程度与补充叶酸的浓度在一定范围内具有剂量依赖性。结论:MTHFR基因是重要的先天性唇腭裂候选基因,叶酸补充可以拮抗MTHFR基因功能下调对胚胎腭突发育的不良影响。

PCR-RFLP法检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变

目的 建立一种简便、实用的检测亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)等位基因 C677T点突变的方法 ,并初步观察部分健康老人和老年血管性痴呆 (VD)患者中 MTHFR等位基因 C677T点突变情况。方法 PCR特异性扩增 MTHFR基因序列 ,扩增产物用限制性内切酶 Hinf 酶切 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离、溴化乙锭染色后 ,观察酶切位点的限制性片段长度多态性 (RFLP)图谱。共检测标本 1 67例 ,其中健康老人(≥ 65岁 ) 1 38例、老年 VD 2 9例 ,并计算了各基因型频率和等位基因频率。结果 健康老人组和老年 VD患者组均检测到 C等位基因野生型 (CC)、杂合子 (CT)和 T等位基因纯合子 (TT)基因型 ,各组 MTHFR基因的 C677T点突变中 T突变位点的频率分别为 43.8%、51 .7%。结论 该方法简便、实用 ,适于一般实验室应用及流行病学调查。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性、生活习惯与贲门癌易感性的关系

[目的]研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性及其与烟酒茶嗜好相互作用与贲门癌易感性的关系。[方法]在上消化道癌高发区淮安市进行了病例-对照研究(贲门癌89例,对照人群223例),调查研究对象的生活习惯,采用PCR鄄RFLP技术检测研究对象的MTHFR基因型。应用SAS软件或EPIInfo软件进行统计学分析。[结果]①男性吸烟者和女性饮酒者与男性不吸烟者和女性不饮酒者相比患贲门癌的风险增高;不饮茶者与饮茶者相比发生贲门癌的危险性升高。②贲门癌组中MTHFRC/T+T/T基因型携带者占82.0%,显著高于对照组的70.3%。与携带MTHFRC/C基因型相比,C/T+T/T基因型携带者发生贲门癌的危险性(OR)为2.12(95%CI1.14～3.95),调整性别、年龄、吸烟、饮酒、饮茶及生蔬菜、水果、肉和豆制品摄取习惯后OR为2.05(95%CI1.05～2.03)。③在吸烟、每周饮酒≥2次和不饮茶者中,携带MTHFRC/T+T/T基因型者发生贲门癌的危险性显著上升。[结论]MTHFR基因型与贲门癌的易感性有关;MTHFR基因多态性影响吸烟、饮酒和饮茶与贲门癌之间的关系。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与冠心病患者冠状动脉病变及叶酸水平相关性研究

目的:探究冠心病患者冠状动脉病变及叶酸水平与其亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)C677T多态性的相关性。方法:将98例冠心病患者以及同期接受健康检查的35例正常人作为研究对象,将其分为冠心病组与正常组,对两组受检者MTHFR C677T多态性和叶酸水平进行检验并分析患者的冠状动脉病变程度差异,对其之间的关系进行详细分析。结果:两组受检者MTHFR C677T基因型及等位基因频率分布无统计学差异(P>0.05),冠心病组患者的同型半胱氨酸(Hcy)水平显著高于正常组(P<0.05)。从受检患者MTHFR C677T基因型分布情况来看,随着患者冠状动脉病变情况的程度加深患者TT及TC基因型频率分布和患者Hcy水平逐渐增加,CC基因型频率分布逐渐下降,TC、CC基因型和Hcy水平组间对比差异无统计学意义(P<0.05),TT基因型频率分布组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。从MTHFR C677T基因型与叶酸水平的关系来看,TT、TC基因个体的叶酸水平均较CC基因个体高(P<0.05)。结论:MTHFR C677T基因多态性与叶酸水平以及冠心病患者发病风险之间存在明显的关系,患者血清Hcy水平上升也就是叶酸浓度降低以及MTHFR C677T基因型多态性尤其是携带T基因型的患者具有较高的冠心病患病风险,同时MTHFR C677T基因型多态性还与冠心病患者的病情进展存在一定联系,能够对冠心病患者的病情进展状况进行判断,增加了临床针对性治疗和患者疗效评价的有效参考指标。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与精神分裂症伴抑郁的关系

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与精神分裂症伴抑郁的关系。方法:采用卡尔加里精神分裂症抑郁量表(CDSS)对413例稳定期精神分裂症患者(病例组)进行抑郁症状评估,并分为伴抑郁亚组(n=198)与不伴抑郁亚组(n=215)。采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评估患者的精神症状,使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)进行C677T位点基因多态性分析;结果与452名健康对照者(对照组)比较。比较两亚组间MTHFR基因C677T位点基因型及等位基因频率。结果:伴抑郁亚组T等位基因频率明显高于不伴抑郁亚组(P<0.05)。PANSS评分在病例组不同基因型患者间差异无统计学意义。CDSS评分在不同基因型患者间差异具有统计学意义,TT基因型的患者CDSS评分显著高于CT或CC基因型患者(P<0.05)。结论:MTHFR基因与精神分裂症患者伴发抑郁之间存在相关性,C677T位点TT基因型携带者可能与抑郁症状的发生有关。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因在氯氮平诱导代谢综合征中的作用

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)在氯氮平诱导代谢综合征(MS)中的作用。 方法:根据《美国国家胆固醇教育项目成人治疗组第三次指南》(NCEP-ATPⅢ)标准,将服用氯氮平≥2年的576例患者分为MS组(n=246)和非MS组(n=330);测量入组者身体及糖脂生化指标;使用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测入组者MTHFR基因C677T位点基因型及等位基因频率,分析各基因型间的生化指标。结果:MS组体质量指数(BMI)、腰围、空腹血糖(GLU)、血清三酰甘油(TG)水平及血压显著高于非MS组,血清高密度脂蛋白(HDL)水平显著低于非MS组(P<0.05或P<0.01)。MS组C677T位点TT基因型及T等位基因频率显著高于非MS组(P<0.05或P<0.01);与TC及CC基因型比较,TT基因型患者BMI及GLU水平显著增高,HDL水平显著降低(F=12.14,F=4.62,F=7.64;P均<0.001)。 结论:MTHFR基因C677T位点多态性影响血浆同型半胱氨酸代谢,增加氯氮平诱导MS的风险。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态与2型糖尿病脑梗死的关系

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶 (methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因 C6 77T多态与中国东北汉族 2型糖尿病患者合并脑梗死的关系。方法 应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (PCR-RFL P)方法检测了对照组、2型糖尿病无大血管病变组和 2型糖尿病脑梗死组共 2 0 8名的 MTHFR基因 C6 77T多态性分布。结果 经 χ2检验 ,MTHFR基因各基因型频率在对照组、2型糖尿病组和 2型糖尿病脑梗死组之间均无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;各等位基因频率在 3组人群中均无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 未发现 MTHFR基因C6 77T多态与 2型糖尿病脑梗死之间存在相关关系。