四氢小檗红碱及其前药的比格犬药代动力学研究

目的建立同时定量检测比格犬全血中抗焦虑新药四氢小檗红碱(THB)及其前药9-乙酰四氢小檗红碱硫酸盐(ATHBS)的LC-MS/MS方法,并研究四氢小檗红碱在比格犬体内的药代动力学及生物利用度。方法建立检测全血中THB和ATHBS的LC-MS/MS方法,进行专属性、线性、回收率、稳定性、精密度和准确度等方法学验证。比格犬单次口服和静脉注射3 mg.kg-1ATHBS后考察了前药与活性代谢产物THB的血药浓度-时间变化,应用WinNonlin软件得到药代动力学参数和口服生物利用度。结果 ATHBS和THB在2～2 000μg·L-1的浓度范围内呈良好的线性(r>0.9985),定量下限均为2μg·L-1。THB和ATHBS的回收率分别大于78.74%和75.52%,日内和日间精密度(RSD)均在10.79%之内,准确度(RE)在-10.3%～3.92%的范围内。比格犬单次静注和口服ATHBS后,前药均能快速转化成为活性产物,血中浓度在60 min降至检测限之下。静注组THB在2 min达峰,Cmax为(605.99±102.88)μg·L-1,消除半衰期T12为(7.03±1.77)h,AUC(0-t)为(718.64±143.01)h·μg·L-1。口服组THB在15min达到(77.71±26.60)μg.L-1的峰值,药-时曲线在6 h出现第2个小峰,T 12为(5.89±3.95)h,AUC(0-t)为(179.62±91.64)h·μg·L-1,口服生物利用度为26.2%。结论建立的LC-MS/MS定量方法快速、简便、灵敏,可用于同时研究前药和THB的药代动力学。比格犬口服或静注ATHBS后,前药在体内可快速转化成为活性产物,THB达峰迅速,血药浓度消除较快,口服生物利用度较好。

新型化合物乙酰四氢小檗红碱的受体结合及抗焦虑效应(英文)

目的 探讨延胡索四氢小檗碱同类物衍生物乙酰化四氢小檗红碱（THBr-A）的脑内受体结合特点及其抗焦虑效应。方法 ① 体外实验：制备稳定转染人肾上腺素α1，β1，多巴胺D2，多巴胺D3，γ-氨基丁酸（GABA）-A，GABA-B，N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA），5-羟色胺1A（5-HT1A），5-HT2A受体基因的HEK293细胞膜，加入THBr-A 1×10-10 mol·L-1放射性配体结合实验观察THBr-A的脑内作用靶点。制备稳定转染人多巴胺D2受体基因的HEK293细胞膜，单独加入THBr-A 1×10-10~1×10-5 mol·L-1，或先加入喹吡罗10 μmol·L-1后再加入THBr-A 1×10-10~1×10-5 mol·L-1；或制备富含5-HT1A受体的SD大鼠海马组织细胞膜，单独加入THBr-A 1×10-10~1×10-5 mol·L-1[35S]GTP-γS实验观察D2和5-HT1A受体的内在活性。② 体内实验：雄性HaM/ICR小鼠按照分组分别于实验前60 min单次ig给予THBr-A 5，10，20，40和80 mg·kg-1，通过自发活动、孔板、高架十字迷宫及明暗穿箱实验观察THBr-A对小鼠自发活动和焦虑行为的影响。结果 ① 体外实验：放射性配体结合实验结果显示，THBr-A主要作用于D2，D3和5-HT1A受体，相应的百分抑制率分别为96.43%，77.61%和78.31%。[35S]-GTP-γS实验结果显示，THBr-A具有D2拮抗（IC50=11.54 nmol·L^-1）和5-HT1A部分激动（EC50=55.37 nmol·L-1）的内在活性。② 体内实验：自发活动实验结果显示，单次给予THBr-A 5~8 mg·kg^-1对小鼠给药后60 min内的自发活动数无影响（F（5，54）=1.247，P=0.300）。孔板实验结果显示，单次给予THBr-A 20，40和80 mg·kg^-1，小鼠的探头次数（F（6，63）=8.667，P〈0.01）和探头时间（F（6，63）=6.067，P〈0.01）明显增加。高架十字迷宫实验显示，单次给予THBr-A 20和40 mg·kg^-1，小鼠的入开臂时间百分比（F（6，63）=9.382，P〈0.01）和入开臂次数百分比（F（6，63）=8.957，P〈0.01）明显增加。明暗穿箱实验显示，单次给予THBr-A 20和40 mg·kg^-1，小鼠的穿梭次数（F（6，63）=8.217，P〈0.01）和明箱滞留时间（F（6，63）=8.457，P〈0.01）明显增加。结论 THBr-A主要作用于脑内多巴胺和5-HT系统，并具有D2拮抗、5-HT1A部分激动的内在活性，有效地改善动物的焦虑样行为，提示THBr-A有望成为抗焦虑症新药。

四氢小檗红碱的化学拆分研究

目的:通过化学拆分法获得四氢小檗红碱的2种光学异构体。方法:以盐酸小檗碱为原料制备(±)-四氢小檗红碱,以(+)-二对甲苯甲酰酒石酸为拆分剂在95%乙醇中对其进行拆分。结果:拆分所得的2种四氢小檗红碱异构体旋光值与文献报道一致。结论:通过化学拆分法成功获得了(+)-和(-)-四氢小檗红碱。