四氢黄连碱体内抗炎作用的研究

目的通过多种炎症模型观察四氢黄连碱的体内抗炎作用。方法采用由多种炎性介质参与的角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、二甲苯致小鼠耳肿胀模型以及小鼠内毒素休克模型,从整体上评价四氢黄连碱的体内抗炎作用。角叉菜胶致大鼠足肿胀模型分为:空白对照组、四氢黄连碱高剂量组(21 mg/kg)、低剂量组(7 mg/kg)以及阳性药地塞米松组(5 mg/kg),空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,30 min后,足跖皮下注射角叉菜胶,并分别在致炎前及致炎后1、2、3、4、5 h测量大鼠足趾厚;二甲苯致小鼠耳肿胀模型分为:空白对照组、四氢黄连碱高剂量组(30 mg/kg)、低剂量组(10 mg/kg)以及阳性药地塞米松组(5 mg/kg),空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,连续给药7 d,末次给药30 min后于小鼠右耳涂抹二甲苯,左耳为对照,l h后处死,取相同部位的耳片并称重;小鼠内毒素休克模型分为:空白对照组、阴性组、四氢黄连碱高剂量组(30 mg/kg)以及低剂量组(10 mg/kg),阴性组和空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,给药后30 min,阴性组和四氢黄连碱组腹腔注射LPS(20 mg/kg),空白对照组给予等体积的生理盐水,每隔12 h记录1次小鼠的存亡情况,连续观察72 h。结果角叉菜胶致大鼠足肿胀模型中,四氢黄连碱可显著抑制大鼠足肿胀,高剂量组(21 mg/kg)对足肿胀的最大抑制率达到77.82%,低剂量组(7 mg/kg)对足肿胀的最大抑制率为62.39%,和阳性药地塞米松组(5 mg/kg,最大抑制率80.54%)的作用相当;二甲苯致小鼠耳肿胀模型中,四氢黄连碱可显著抑制小鼠的耳肿胀,其中高剂量组(30 mg/kg)对耳肿胀的抑制率达到74.03%,低剂量组(10 mg/kg)对耳肿胀的抑制率为53.93%,和阳性药地塞米松组(5 mg/kg,抑制率64.71%)的作用相当;四氢黄连碱可显著性提高内毒素休克小鼠的存活率,其中高剂量组(30 mg/kg)内毒素休克小鼠72 h内的存活率为70%,低剂量组(10 mg/kg)为40%,四氢黄连碱组的存活率与阴性组(30%)相比差异有统计学意义。结论四氢黄连碱具有较强的抗炎、抗内毒素休克作用,且抗炎机制可能与抑制炎性物质的渗出和炎症细胞因子的分泌有关。

四氢黄连碱体外抗炎作用及机理研究

【目的】观察四氢黄连碱(THC)的体外抗炎作用及其相关机理。【方法】将体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞分为空白对照组,模型对照组,四氢黄连碱低、中、高剂量组。以脂多糖(LPS)刺激小鼠原代腹腔巨噬细胞建立体外细胞炎症模型,作为模型对照组。四氢黄连碱低、中、高剂量组分别以不同浓度(终浓度为1、2、3μmol/L)的四氢黄连碱预培养小鼠巨噬细胞24 h后,加入LPS(终浓度为10μg/mL)。空白对照组加入相同体积的细胞培养液。继续培养12 h后,采用硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;实时定量PCR(q PCR)法检测细胞内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞上清液中TNF-α、IL-6含量;ELISA检测细胞内核因子kappa B(NF-κB)与DNA的结合活性。【结果】与空白对照组比较,模型对照组小鼠巨噬细胞上清液中NO、TNF-α、IL-6含量,巨噬细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达及NF-κBp65与DNA的结合活性均显著升高(P <0.001);经四氢黄连碱预处理小鼠巨噬细胞24 h后,上述指标均显著降低,且呈剂量依赖性(P <0.05或P <0.01或P <0.001)。【结论】四氢黄连碱具有显著的体外抗炎作用,其机理可能与阻断细胞内NF-κB信号通路的激活,从而下调促炎因子NO、TNF-α及IL-6的表达和分泌有关。

四氢黄连碱中间体的合成

以高原儿茶酸为起始原料,经甲基化、溴化、偶联反应、酯水解、缩合酰化,五步反应得到目标化合物四氢黄连碱中间体,总收率64%。利用核磁共振对各中间体及目标化合物的化学结构进行了表征。

四氢黄连碱型季铵化合物的合成及生物活性研究

为评价四氢黄连碱型季铵化合物降血糖、降血脂的作用,本文以盐酸黄连碱(2)为起始原料,经硼氢化钠还原得到四氢黄连碱,再对其进行季铵化衍生,合成了15个新型黄连碱衍生物4～18,通过1H NMR、HR-MS进行了化学结构确证,并在HepG2细胞葡萄糖消耗模型上评价了所有化合物体外促葡萄糖消耗活性。对于活性较好的化合物进一步评价了其体内降血脂活性。结果表明:化合物5、7、8、9表现出了较好的体外促葡萄糖消耗活性,化合物5、8在高脂血症小鼠和金黄地鼠模型上显示出较好的体内降血脂活性,但作用效果没有阳性对照药辛伐他汀显著。

高效液相色谱法同时测定延胡索中5种生物碱含量的方法学研究

目的建立高效液相色谱法测定延胡索中海罂粟碱、延胡索乙素、原阿片碱、四氢黄连碱、紫堇碱5种生物碱的含量。方法色谱柱:BETASIL-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.01%三乙胺溶液(70∶30)等度洗脱,柱温:30℃,流速:0.5 mL·min-1,检测波长:280 nm,进样量:20μL。结果海罂粟碱、延胡索乙素、原阿片碱、四氢黄连碱、紫堇碱的线性范围(n=6)分别为0.0050～0.1592 mg·mL-1(r=0.9996)、0.0049～0.1560 mg·mL-1(r=0.9997)、0.0008～0.0248mg·mL-1(r=0.9995)、0.0014～0.1460 mg·m L-1(r=0.9995)、0.0119～0.3792 mg·m L-1(r=0.9995);平均加样回收率(n=6)分别为97.8%、98.4%、99.2%、97.4%、97.8%,RSD分别为0.94%、1.3%、0.37%、0.90%、1.4%。结论该方法简单,准确,可靠,为延胡索的质量控制与评价提供了有效的手段。

高效液相色谱一测多评法同时测定木丹颗粒中9种成分

目的建立高效液相色谱一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为280 nm[检测巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素和去氢紫堇碱]和254 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素)。以延胡索乙素为内参物,建立其他8种成分的相对校正因子,测定含有量。结果巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素分别在4.91~98.20,3.57~71.40,1.03~20.60,2.39~47.80,1.62~32.40,1.79~35.80,1.06~21.20,0.58~11.60,1.86~37.20μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.9991),平均加样回收率(RSD)分别为100.01%(0.73%)、99.17%(0.59%)、97.93%(0.78%)、98.81%(0.98%)、98.78%(0.43%)、97.74%(0.60%)、96.99%(0.62%)、96.96%(0.46%)和99.28%(0.37%),一测多评法所得结果与外标法结果无明显差异。结论该方法操作便捷、结果准确,重复性好,可用于同时测定木丹颗粒中巴西苏木素、(±)原苏木素B、四氢非洲防己碱、四氢黄连碱、延胡索乙素、去氢紫堇碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素含量。

延胡索的传说与药用

据传,唐末年间,浙江省东阳县,有座青山叫做西门岩。山上奇峰突起,洞穴相连。有一天,一位采药老人攀上这座山的顶峰,不慎失足,翻滚下山,昏迷不醒。只见他鼻青眼肿,身上青一块,紫一块的,动弹不得。儿孙们闻讯赶到,见此情景,惊恐万状,嚎淘大哭。过了二个时辰。

延胡索中生物碱类成分的质量控制

目的:建立RP-HPLC同步测定延胡索中11种生物碱成分的方法,为该药材的质量控制提供参考。方法:Kromasil Eternity C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1 mol·L-1乙酸铵溶液(每1 L溶液中加冰乙酸0.5m L)(B)梯度洗脱(0~50 min,20%~55%A;50~55 min,55%~65%A;55~60 min,65%A),流速1.0 m L·min-1,柱温25℃,检测波长280 nm,进样量10μL。结果:11种待测成分的线性关系良好,相关系数均>0.999;精密度试验RSD 0.1%~2.0%,稳定性试验RSD 0.2%~2.1%,重复性试验RSD 1.7%~4.1%,平均加样回收率98.2%~100.8%(RSD 1.6%~3.5%),均符合中药质量分析要求。结论:建立的RP-HPLC灵敏、简便、可靠,可用于延胡索药材中多种生物碱成分的同步测定。

基于多成分含量测定结合化学计量学考察延胡索不同加工方法对成分稳定性的影响

目的考察不同加工方法对延胡索Corydalis yanhusuo药材、饮片长期贮存中成分稳定性的影响,进而选择合理的加工方法,确保药材质量。方法将新鲜延胡索分为大个延胡索(直径>1 cm)和小个延胡索(直径<1 cm),分别进行个子货烘干、晒干,切片烘干、切片晒干,水煮、水蒸、醋煮及采用最优工艺醋蒸。通过超高效液相色谱(UPLC)同时测定四氢非洲防己碱、原阿片碱、四氢黄连碱、非洲防己碱、延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、去氢紫堇碱8种生物碱含量,结合化学计量学评价不同加工方法对延胡索成分稳定性影响。结果延胡索药材及饮片经过18个月贮存后,所测指标性成分延胡索乙素均符合《中国药典》2015年版规定。烘干、晒干法处理药材、饮片成分在储藏过程中下降率大,稳定性差。醋制和蒸煮处理有利于增加延胡索药材贮藏的稳定性。醋蒸法样品稳定性好,干燥时间短、效率高,有利于长期贮藏。结论制备延胡索药材时宜选用水蒸后烘干,制备醋延胡索饮片时选用鲜品切片后醋蒸法。