一种噻二唑类杂环化合物抗K562肿瘤活性研究

研究噻二唑类杂环化合物对人白血病K562癌细胞的体外抗肿瘤活性筛选。方法:利用MTT法间接测定各化合物对肿瘤细胞后的生长情况,并计算出肿瘤细胞的抑制率,选择抑制率较高的化合物进行深入研究,计算其半数抑制浓度(IC50),并考察其浓度-生长率线性关系。结果:大部分化合物均显示了较好的人白血病K562癌细胞抑制活性,化合物1抑制率达92.01%,IC50为7.07×10-5mol/L,浓度-生长率R2=0.986。结论:噻二唑类杂环化合物具有较好的抗肿瘤活性。

医院制剂“醋酸强的松霜”的含量测定

目的 测定医院制剂“醋酸强的松霜”中醋酸泼尼松的含量。方法 采用四氮唑比色法。样品用无水乙醇溶解、提取、过滤,加入氯化三苯四氮唑试液和氢氧化四甲铵试液,于暗处放置45分钟,在485nm波长处测定吸收度。结果 线性范围为0.0625mg/l～0.5625mg/l,平均回收率99.97%,RSD=0.12%,n=5。结论 本法可作为“醋酸强的松霜”的含量测定方法。

药用分析化学综合练习B

本文是药物分析部分的综合练习,药物分析部分的教学要求和考试题型均与分析化学部分的要求相同.

常用化疗药物对不同组织类型非小细胞肺癌体外药敏实验

目的探讨三种组织类型的非小细胞肺癌(NSCLC)对5种临床常用化疗药物的敏感性。方法28例临床肺部肿瘤标本制备成组织细胞悬液,在体外(96孔细胞培养板内)培养,24 h后加入化疗药物。应用四氮唑蓝比色(MTT)法检测各孔的吸光度值并计算出肿瘤细胞对所试药物的敏感率。结果肺腺癌对异环磷酰胺、丝裂霉素、顺铂的敏感率分别为75%、83%和75%;鳞癌对异环磷酰胺、丝裂霉素、顺铂的敏感率均达到80%。肺腺癌、鳞癌对紫杉醇的敏感率不高,而腺鳞癌对该药的敏感率可达100%。肺腺癌对阿霉素的敏感率仅为33%,肺鳞癌对该药也无明显反应性。结论不同组织类型非小细胞肺癌对5种化疗药物的敏感性存在显著差异。

去细胞化肝脏生物支架材料的制备

目的探讨制备去细胞化肝脏生物支架(decellularize d liver biological scaffold,DLBS)的新方法,寻找适合肝脏组织工程的新型支架材料。方法 (1)采用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备去细胞化全肝脏生物支架,并观察去细胞化效果;(2)DLBS与C3A及骨髓间充质干细胞体外共培养,观察DLBS细胞相容性。(3)通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察DLBS对C3A的增殖作用。(4)将DLBS植入SD大鼠背部皮下,4周后处死大鼠,观察鉴定DLBS的组织相容性。结果通过HE染色、扫描电镜观察证实经过化学去垢剂—酶联合去细胞方法制备的去细胞化全肝生物支架不含细胞成分,只剩下胶原、弹性蛋白等支架成分;体外培养实验发现,L02及骨髓间充质细胞能够与DLBS粘连、生长。MTTAssay检测证实DLBS有促进C3A生长、增殖的作用。结论利用化学去垢剂—酶联合去细胞化技术制备的DLBS脱细胞彻底、细胞外基质保留较完整,并且有促进细胞粘附、增殖和分化的作用,是一种较为理想的生物支架材料。

山东沿海21种海洋无脊椎动物抗肿瘤活性初步筛选

采用四氮唑盐比色法(MTT)测定了21种青岛及其附近海域常见无脊椎动物94％乙醇粗提物对人白血病细胞HK-60和人肺腺癌细胞A-549的抑制率,同时测定了海筒螅Tubuariamarina Torrey等动物不同极性溶剂萃取物的活性。发现海燕Asterina pectinifera的正丁醇萃取物、海筒熄的乙酸乙酯萃取物、红条毛肤石鳖Acanthochiton rubrolineatus的94％的乙醇提取物对HL-60的抑制作用很强,在浓度为0.063mg/mL时抑制率分别为96.7％、63.9％、50.5％;海筒螅的乙酸乙酯萃取物对A-549的抑制率较高,浓度为0.063mg/mL时的抑制率可以达到65.4％。

MTT法体外检测脑胶质瘤细胞对化疗药物的敏感性

目的应用四氮唑盐比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测脑胶质瘤细胞体外对化疗药物的敏感性,为胶质瘤的个体化化疗提供参考。方法 39例胶质瘤进行原代细胞培养,采用MTT法检测胶质瘤对常用药物尼莫司汀(ACNU)、卡氮芥(BCNU)、长春新碱(VCR)、替尼泊甙(VM-26)、替莫唑胺(TMZ)、福莫司汀(Fotemus-tine)、顺铂(CDDP)、泰素(Taxol)的敏感性。结果 39例患者中37例获得检测结果,体外培养成功率达94.9%。37例胶质瘤细胞体外对8种化疗药物的敏感性从高到低依次为:VM-26>ACNU>Taxol>TMZ>CDDP>BCNU>VCR>Fotemustine。胶质瘤的病理级别及初发、复发对药物敏感性无显著性影响。结论 MTT检测可作为胶质瘤体外药敏试验的一种方法,MTT体外药敏试验对排除无效药物、筛选敏感药物,提高胶质瘤的化疗效果具有一定的参考价值。

耳廓软骨天然生物支架材料的制备及初步研究

目的探讨制备兔耳廓天然软骨细胞外基质材料的新方法,制备适用于组织工程应用的天然生物支架材料。方法①采用多步骤去污剂—酶处理技术抽提兔耳廓软骨细胞制备天然软骨细胞外基质(Nature Extracellular Matrix,NECM),对NECM行HE染色、澳新蓝染色、维多利亚蓝染色、VanGieson染色并进行组织学及扫描电镜观察;②以灰家兔NECM为支架材料和新西兰大白兔耳廓软骨细胞为种子细胞进行体外培养,倒置显微镜下观察其亲水性和对细胞的吸附力,并通过四氮唑盐比色法(MTTAssay)观察NECM对软骨细胞的增殖作用。结果通过HE染色、蛋白多糖、胶原及弹力纤维特染、扫描电镜观察分析证实经过多步骤去污剂—酶法抽提软骨细胞制备的天然生物支架材料里,不含细胞及细胞器成分,仅含有不溶解的胶原、弹性蛋白和蛋白多糖,亦即NECM;体外培养实验发现,兔耳廓软骨细胞易进入脱细胞异体软骨基质结构裸露的空穴,且生长旺盛,组织学检查证实兔耳廓软骨NECM上裸露的骨陷窝已部分被软骨细胞占据。MTTAssay检测证实NECM对软骨细胞增殖有促进作用。结论本实验制备的NECM脱细胞彻底、细胞外基质成分保留较完整,并具有促进细胞粘附、增殖和分化生长的作用,是一种较为理想的天然生物支架材料。

雄黄对乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的逆转及机制研究

目的 探讨中药雄黄对乳腺癌多药耐药细胞系 (MCF 7/ADM )的逆转作用及可能的逆转机制。方法 药物敏感试验采用四氮唑蓝 (MTT)比色法 ,细胞内药物浓度测定采用荧光分光光度法 ;基因表达水平检测采用RT -PCR法。结果 雄黄在 0～ 2 5 μg/ml浓度范围内对MCF 7/ADM细胞未见明显毒副作用 ;15 μg/ml、2 5 μg/ml雄黄逆转倍数分别为 2 0倍和 2 8倍 ,并能明显抑制mdr 1基因的转录水平。 结论 雄黄可以逆转MCF 7/ADM细胞的多药耐药性 ,并呈剂量依赖性 ;可能的逆转机制为下调mdr

辛伐他汀对大鼠血管外膜成纤维细胞增殖迁移和胶原合成的影响

为观察辛伐他汀对血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成的影响 ,用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞 ,以四氮唑蓝比色法测定细胞增殖 ,以Sarkar方法测定血管外膜成纤维细胞迁移距离 ,以3 H 脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果发现 ,随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的A4 90值呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的A4 90值分别为 0 .2 91± 0 .0 11、0 .2 6 5± 0 .0 0 6、0 .2 34± 0 .0 0 8和 0 .2 14± 0 .0 0 6 ,与对照组(0 .335± 0 .0 18)差异显著 (P均 <0 .0 1) ;随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的迁移距离呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的迁移距离分别为 6 .5± 1.1mm、5 .3± 1.2mm、4 .1± 1.0mm和 2 .9± 0 .9mm ,与对照组 (8.1± 1.8mm)差异显著 (P均 <0 .0 1)。随着辛伐他汀浓度的增高的3 H 脯氨酸掺入率呈递减趋势。 10 -7、10 -6 、10 -5及 10 -4mol/L组血管外膜成纤维细胞的3 H 脯氨酸掺入率分别为 (cpm/ 5 0 0 0细胞 ) 385± 5 1、2 72± 4 8、16 1± 38和 14 1± 36 ,与对照组 (6 5 5± 5 8)差异显著 (P均 <0 .0 1)。此结果提示 ,辛伐他汀可以剂量依赖地抑制血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成 ,这可能对改善血管重塑有一?

纳米锶磷灰石的体外细胞毒性研究

目的对纳米锶磷灰石进行体外细胞毒性试验,评价其生物安全性,为将其应用于骨折临床修复奠定基础。方法将不同浓度的纳米锶磷灰石浸提液与小鼠成纤维细胞L929体外共培养2d、4d、7d,倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化;用四氮唑盐比色法(MTT)检测,计算细胞相对增殖度,用六级毒性分类法进行评级。结果培养期细胞贴壁生长,形态良好,随着培养天数的增加细胞大量增殖,毒级为0～1级。相同时间点不同浓度的纳米锶磷灰石浸提液的吸光度值无明显差异性(p>0.05)。结论初步证实纳米锶磷灰石具有人体应用的生物安全基础,无细胞毒性。

化毒补虚方含药血清对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的实验研究

目的:观察不同浓度、不同时间化毒补虚方诱导肺腺癌细胞A549的抑制增殖作用及促进凋亡作用。方法:应用四氮唑蓝比色法(MTT法)检测化毒补虚方对人肺腺癌细胞增殖的影响,同时筛选出起有效抑制作用的浓度;并应用倒置显微镜观察细胞形态的变化及荧光显微镜、透射电子显微镜(TEM)观察细胞超微结构的变化。结果:MTT实验显示化毒补虚方抑制肺腺癌细胞增殖,其中50%浓度含药血清组对A549细胞抑制作用明显,在48 h达作用高峰;观察细胞形态及超微结构发现A549细胞形态发生明显改变,并可见凋亡小体。结论:化毒补虚方通过杀伤肺腺癌细胞、诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。

白细胞介素1α对鼠甲状腺细胞增殖的影响

目的 :观察 TSH存在和缺乏时白细胞介素 - 1α( IL- 1α)对鼠甲状腺细胞增殖的影响。 方法 :FRTL - 5细胞培养 ,经不同浓度 IL - 1α(含 TSH或不含 TSH)孵育 ,用四氮唑蓝 ( MTT)比色法检测细胞增殖。 结果 :在无 TSH条件下 IL- 1α2 0～ 2 0 0 0 k U/ L,对 FRTL- 5细胞无明显促增殖作用 ;在 TSH存在时 IL- 1α2 0和 2 0 0 k U/ L 对 FRTL- 5细胞增殖亦无明显抑制作用 ,IL- 1α2 0 0 0 k U/ / L则可显著抑制 TSH介导的 FRTL- 5细胞增殖。 结论 :本研究提示较高浓度的 IL-1α能抑制

MTT法测定复发转移性乳腺癌体外化疗药物敏感性实验研究

目的探讨MTT法体外药敏试验在复发转移性乳腺癌化疗中的价值。方法取35例复发转移性乳腺癌患者肿瘤组织,简易机械法制备细胞悬液,应用MTT法体外药敏试验测定其对10种常用化疗药物的敏感性,并指导临床用药,同时与临床疗效进行相关分析。结果MTT法检测复发转移乳腺癌患者药敏试验的成功率为91.4%,体外药敏试验的敏感性为86.4%,特异性为80.0%,阳性预测值为90.5%,阴性预测值为72.7%,总的预测准确率为84.4%。结论MTT法可作为临床上指导复发转移乳腺癌个体化化疗的有效方法。

MTT法药敏试验应用于晚期乳腺癌

[目的]探讨MTT法体外药敏试验在复发转移性乳腺癌化疗中的价值。[方法]取40例复发转移性乳腺癌患者肿瘤组织,以简易机械法制备细胞悬液,应用MTT法体外药敏试验测定其对10种常用化疗药物的敏感性,并指导临床用药,同时与临床疗效进行相关分析。[结果]MTT法检测复发转移乳腺癌患者药敏试验的成功率为92.5%,敏感性为87.5%,特异性为69.2%,阳性预测值为84.0%,阴性预测值为75%,总的预测准确率为81.1%。[结论]MTT法简便快速,可作为临床上指导复发转移乳腺癌个体化化疗的有效方法。

晚期非小细胞肺癌患者体外药敏试验及临床疗效观察

目的探讨体外药敏试验在晚期非小细胞肺癌化疗中的价值。方法取40例晚期非小细胞肺癌患者的肿瘤组织,以简易机械法制备细胞悬液,应用四氮唑盐比色(MTT)法体外药敏试验测定其对10种常用化疗药物的敏感性,并指导临床用药,同时与临床疗效进行相关分析。结果MTT法检测晚期非小细胞肺癌患者药敏试验的成功率为92.5%,敏感性为87.5%,特异性为69.2%,阳性预测值为56.7%,阴性预测值为75%,总的预测准确率为81.1%。结论MTT法简便快速,在临床上可有效指导晚期非小细胞肺癌个体化化疗。

5种着色氧化锆陶瓷的细胞毒性评价

目的:对掺杂5种微量着色剂的氧化锆陶瓷的生物安全性进行初步评价。方法:采用四氮唑盐比色法(MTT)细胞毒性评价方法,用5种着色氧化锆陶瓷材料的浸提液体外培养L929小鼠成纤维细胞2d、4d、7d,于倒置相差显微镜下观察细胞形态;用MTT检测各实验组和对照组的吸光度值(OD值),计算各组细胞的相对增殖率,并按照6级毒性分类法对各实验组进行评级。结果:培养期细胞贴壁生长,细胞形态正常。随着培养天数增加细胞大量增殖,各实验组的毒性评级为0-1级。结论:添加5种微量着色剂的氧化锆陶瓷无细胞毒性,具备体内应用的生物安全基础。