两色金鸡菊提取物对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨两色金鸡菊提取物对四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及其作用机制。方法通过正交试验得到两色金鸡菊的最佳提取工艺,利用LC-MS分析两色金鸡菊提取物的活性成分;应用CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型,考察两色金鸡菊提取物对急性化学性肝损伤的保护作用;利用HE染色观察对肝脏组织损伤情况,考察小鼠体内ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)、IL-6(白介素-6)及IL-1β(白介素-1β)等指标的变化情况。结果LC-MS分析结果显示,两色金鸡菊提取物中含有32种主要活性成分。动物试验结果显示,与空白组比较,模型组小鼠肝脏有明显病理性改变,两组小鼠ALT、AST、MDA、SOD、TNF-α、IL-6及IL-1β水平比较差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,两色金鸡菊给药组小鼠肝脏病理性改变及生化指标均有所改善,其中,ALT、AST、TNF-α、IL-6及IL-1β显著降低(P<0.01或P<0.05),MDA的含量显著下降(P<0.01或P<0.05),SOD的活力显著上升(P<0.01或P<0.05)。结论两色金鸡菊提取物对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,作用机制可能与其抗炎、抗氧化作用相关。

棉皮素在四氯化碳诱导的既存肝纤维化小鼠中的作用研究

目的 探讨天然类黄酮棉皮素对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化模型小鼠的作用。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CCl_(4)组和CCl_(4)+棉皮素组,每组6只。除对照组外,其余两组均采用20%CCl_(4)橄榄油溶液(0.75 μL/g, 2次/周,持续6周)腹腔注射,建立肝纤维化模型。CCl_(4)+棉皮素组于造模第6周开始每天腹腔注射棉皮素(10 mg/kg)进行干预,对照组与CCl_(4)组小鼠同一时间注射等体积的PBS溶液。末次给药24 h内,3组均取新鲜肝脏组织,并灌注固定制备石蜡切片;采用HE染色与Masson染色观察3组肝脏组织病理改变;免疫组化染色检测3组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase3)的表达情况;同时采用蛋白质印迹技术检测α-SMA表达情况。结果 与对照组相比,CCl_(4)组肝脏结构破坏,胶原纤维明显增生,形成纤维间隔,α-SMA、Caspase3、Cleaved Caspase3的蛋白表达水平升高(P<0.05),CCl_(4)+棉皮素组胶原纤维沉积减少,α-SMA、Caspase3的蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论 天然类黄酮棉皮素可减少CCl_(4)诱导的肝纤维化模型小鼠胶原纤维沉积、肝星状细胞激活和细胞凋亡,对肝脏起保护作用。

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨双术抗纤方改善四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的作用及机制

目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨双术抗纤方(黄芪、麸炒白术、柴胡、醋莪术、丹参、荔枝核)改善四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的作用及机制。方法采用皮下注射3.0 m L·kg^(-1)质量分数为40%的CCl4复制肝纤维化大鼠模型,每周注射2次,共注射8周。将SD大鼠随机分为空白对照组(8只)、模型组(7只)、阳性对照组(7只,灌胃43.19 mg·kg^(-1)水飞蓟宾)、中药低剂量组(6只,灌胃4.3 g·kg^(-1)双术抗纤方颗粒)、中药中剂量组(6只,灌胃8.6 g·kg^(-1)双术抗纤方颗粒)、中药高剂量组(7只,灌胃17.2 g·kg^(-1)双术抗纤方颗粒);每日1次,连续灌胃给药4周,除空白对照组外,余各组在给药同时继续皮下注射CCl4。采用HE、Masson染色法观察肝脏组织病理变化;ELISA法检测血清Ⅳ型胶原(ColⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;Western Blot法检测肝脏组织Wnt1、β-catenin、PPAR-γ蛋白表达水平;q PCR法检测肝脏组织Wnt1、β-catenin、PPAR-γm RNA表达水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肝脏出现肝细胞部分坏死,正常的肝小叶结构被破坏,肝细胞索排列紊乱,中央静脉或汇管区增大,炎症细胞大量浸润,形成桥接坏死;肝脏中央静脉或汇管区胶原纤维增生明显,形成纤维间隔,纤维化评分明显升高(P<0.05);血清ColⅣ、PCⅢ、HA、LN水平明显升高(P<0.05);肝脏组织Wnt1、β-catenin蛋白及m RNA表达水平明显升高(P<0.05),PPAR-γ蛋白及m RNA表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性对照组以及中药中、高剂量组大鼠肝细胞脂肪变性情况有所改善,坏死、炎性细胞浸润减少;肝脏纤维化程度有所改善,肝脏胶原纤维减少,纤维化评分明显降低(P<0.05);血清ColⅣ、PCⅢ、HA、LN水平明显降低(P<0.05);肝脏组织Wnt1、β-catenin蛋白及m RNA表达水平明显降低(P<0.05),PPAR-γ蛋白及m RNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论双术抗纤方有抗CCl4诱导大鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路及上调PPAR-γ表达有关。

四氯化碳诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化模型建立方法及优化

目的通过不同给药方式不同剂量四氯化碳诱导的C57BL/6J小鼠肝纤维化模型,通过影像学、分子生物学及组织病理学等方法进行比较,以此优化四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型。方法36只健康C57BL/6J雄性小鼠,适应性饲养1周后,随机分为空白组、2周组、3周组、4周组、6周组及8周组共6组(n=6),除空白组外均作为阳性对照组。空白组以橄榄油0.2 mL腹腔注射,每周3次,各阳性对照组以20%CCl4-橄榄油溶液腹腔注射,剂量为2 mL/kg,每周3次。记录各组小鼠体重变化情况。分别于第15、22、29、43及57天测量小鼠肝弹性值后取血,分别测量小鼠谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层黏蛋白(laminin,LN)、前Ⅲ型前胶原(pro-typeⅢcollagen,PC-Ⅲ)及Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,Ⅳ-C)含量,对肝组织进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)、Masson及天狼星红染色,Metavir评分系统评估肝纤维化程度。结果与空白组相比,各阳性对照组小鼠精神萎靡、扎堆喜卧。在小鼠体重方面,4周组、6周组、8周组与空白组相比均明显下降,而2周组与空白组相比体重明显升高。肝弹性超声显示,随着给药时间增加,弹性值呈进行性升高。生化结果显示,与空白组相比,各阳性对照组ALT、AST水平均显著升高,随着给药时间增加,各阳性对照组HA、LN、PC-Ⅲ及Ⅳ-C水平呈升高趋势。病理结果显示:随着给药时间增加,小鼠肝纤维化程度呈进行性加重,4周时符合肝纤维化病理诊断,6周时有假小叶形成趋势,而8周时已形成假小叶,提示早期肝硬化。结论20%CCl4-橄榄油溶液以每周3次、连续4周腹腔注射的方法能成功建立C57BL/6J小鼠肝纤维化模型,稳定性好、成模较快,可以作为肝纤维化模型制造的优化方案。

虫草菌丝调节AMPK/SirT1信号通路对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的作用

目的研究虫草菌丝(cultured mycelium Cordyceps sinensis,CMCS)对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型小鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMPK/SirT1)信号通路的作用机制。方法将C57BL/6小鼠(n=40)按体重分层随机分为5组:正常对照组、CMCS对照组(3.0 g/kg)、模型对照组、CMCS 1.5 g/kg组(1.5 g/kg)和CMCS 3.0 g/kg组(3.0 g/kg),采用腹腔注射10%CCl4(2 mL/kg)诱导小鼠肝损伤模型。造模与给药2周后,检测血清ALT、AST、TBil水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝炎症;天狼星红染色观察肝胶原沉积;Jamall’s法检测肝羟脯氨酸(Hyp)含量;流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测肝组织IL-6、MCP-1、IFN-γ、TNF、IL-10、IL-12p70水平;免疫组化观察肝组织CollagenⅠ和SirT1表达情况;RT-qPCR检测肝组织Prkaa1、Prkaa2、Lkb1和p53水平。结果CCl4染毒2周后,模型对照组血清ALT、AST、TBil水平均明显升高(P<0.05);HE染色和天狼星红染色分别提示肝内大量炎症细胞浸润和胶原沉积;肝Hyp含量及IL-6、MCP-1、TNF表达明显增多(P<0.05),IL-10和IL-12p70表达明显减少(P<0.01);免疫组化染色提示肝组织Collagen I表达增多;SirT1在肝窦间隙表达减少,在胶原沉积处表达增多;RT-qPCR检测提示肝组织Prkaa1、Prkaa2、Lkb1表达下降,p53表达增多(P<0.05)。CMCS可显著降低纤维化小鼠血清ALT、AST水平;降低肝组织IL-6、MCP-1、TNF表达(P<0.05),上调IL-10、IL-12p70水平(P<0.05);减少肝炎细胞浸润、胶原形成和Hyp含量,促进肝窦内SirT1表达,上调肝Prkaa1、Prkaa2、Lkb1表达(P<0.05);减轻肝内CollagenⅠ、p53表达(P<0.05)。与CMCS 1.5 g/kg组相比,CMCS 3.0 g/kg组抑制肝炎症、胶原沉积及上调AMPK/SirT1表达更为明显(P<0.05)。结论CMCS可通过上调AMPK/SirT1信号通路而发挥抗CCl4诱导小鼠肝纤维化的作用。

沙利度胺对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响

目的探讨沙利度胺对急性肝损伤模型小鼠的影响。方法将48只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、复方甘草酸苷组(0.035 mg/g)及沙利度胺低、中、高剂量组(0.01,0.03,0.05 mg/g),各8只。腹腔注射0.6%四氯化碳(CCl_(4),0.01 mL/g)以复制急性肝损伤小鼠模型,建模前12 h及建模后12 h、24 h时均灌胃给予相应药物或生理盐水。称定肝组织质量及体质量,并计算肝指数。以苏木精-伊红(HE)染色,观察小鼠肝组织病理形态变化。检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,酶联免疫吸附试验法检测小鼠肝组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,Western blot法检测小鼠肝组织匀浆中CD68蛋白表达水平。结果与模型组比较,复方甘草酸苷组及沙利度胺中剂量组小鼠肝细胞坏死、炎性浸润程度减轻;复方甘草酸苷组及沙利度胺低、中、高剂量组小鼠肝指数及血清中ALT、AST水平显著降低(P<0.05);复方甘草酸苷组及沙利度胺中、高剂量组小鼠肝组织匀浆中TNF-α表达水平显著降低(P<0.01);复方甘草酸苷组及沙利度胺中剂量组小鼠肝组织匀浆中CD68蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论沙利度胺可显著改善CCl_(4)诱导的小鼠急性肝损伤,其作用机制可能与抑制转氨酶活性及CD68蛋白的表达有关。

乙醛不能使溴的四氯化碳溶液退色吗

综合分析近期文献中有关乙醛能否使溴的四氯化碳溶液退色的研究与表述。通过实验验证了乙醛能使溴的四氯化碳溶液退色,打破了高中教学中对于这部分知识的原有认知。通过验证反应过程中产生的气体,以及改用甲醛进行对比实验,确认了乙醛与溴之间反应的基团,并进一步探讨了其反应机理。从实验和理论两个方面证实乙醛可以使溴的四氯化碳溶液退色。

碱蓬黄酮对四氯化碳诱导的雌性小鼠肝纤维化的保护作用

目的观察碱蓬黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化防治作用。方法采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析碱蓬黄酮的组分。用四氯化碳诱导建立小鼠肝纤维化模型,通过分析小鼠血脂、肝功能、肝组织外观及病理变化,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)及1型胶原蛋白(Col1α1)mRNA水平,阐明碱蓬黄酮对小鼠肝纤维化防治的有效性及可能的作用机制。结果碱蓬黄酮包含35种化合物。碱蓬黄酮能有效降低四氯化碳诱导的小鼠血脂水平,改善肝脏外观,减轻组织病变,恢复肝功能,下调TIMP-1和Col1α1而上调MMP-9转录水平。结论碱蓬黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化有较好的缓解作用。

GB/T 5750.8—2023顶空-气相色谱法测定饮用水中三氯甲烷和四氯化碳的问题与建议

对GB/T 5750.8—2023中的顶空-气相色谱法测定生活饮用水中三氯甲烷和四氯化碳方法确认中影响定量准确性的因素,如分流比、色谱柱、基质空白、标准曲线配制等进行了讨论,并结合实验室的7697A顶空自动进样器、7890B气相色谱仪及所用DB-1701石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)对方法进行了条件优化.采用优化后的试验条件对方法进行了确认.结果表明,三氯甲烷和四氯化碳分别在质量浓度为0.1~10.0μg/L和0.01~1.0μg/L范围内线性良好,检出限分别为0.025和0.0020μg/L,定量限分别为0.083和0.0067μg/L,相关系数r均大于0.999,相对标准偏差分别为4.2%~6.5%和1.8%~4.0%,加标回收率分别为96.8%~102.5%和104.0%~107.2%.优化后的方法可满足生活饮用水中三氯甲烷和四氯化碳的测定要求,为水中三氯甲烷和四氯化碳含量相关测试提供参考.

鸡骨草浓缩液对四氯化碳诱导的犬肝损伤治疗效果研究

为探究鸡骨草浓缩液对四氯化碳诱导犬只肝损伤的治疗效果,将20只犬分为A组(空白对照组)、B组(模型组)、C组(高剂量组,造模+灌胃鸡骨草浓缩液50 g/kg体重)、D组(中剂量组,造模+灌胃鸡骨草浓缩液30 g/kg体重)、E组(低剂量组,造模+灌胃鸡骨草浓缩液10 g/kg体重),检测各组犬只体温、体重、谷丙转氨酶活力、谷草转氨酶活力和碱性磷酸酶活力。结果表明:B、C、D、E组犬只,造模处理期间体温均显著高于A组(P<0.05),4组犬只造模处理后的体重较造模前降低9%,且显著低于A组(P<0.05);经鸡骨草浓缩液灌胃10 d后,C、D、E组犬只体重均显著高于B组(P<0.05);给药第3天开始,C、D、E组犬只的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶活力均显著低于B组(P<0.05),活力随给药时间的延长呈逐渐下降趋势,且于给药第12天均恢复到正常水平。实验结果表明:鸡骨草浓缩液对四氯化碳诱导的犬只肝损伤有显著的治疗效果。

灵芝孢子油对四氯化碳联合高脂饮食诱导大鼠肝纤维化的作用研究

探究灵芝孢子油(GSO)对四氯化碳(CCl_(4))联合高脂饮食诱导的大鼠肝纤维化的改善作用及机制。将雄性SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型对照组、阳性药物组和灵芝孢子油低、中、高剂量组(人体推荐量的5、15、30倍)。采用CCl_(4)联合高脂饲料诱导6周建立大鼠肝纤维化模型,造模过程中灌胃GSO干预8周。通过检测血清生理生化指标和大鼠肝脏组织形态、氧化应激水平、纤维化相关蛋白,评价GSO对肝纤维化的保护作用。研究结果表明,中、高剂量GSO能够显著提升肝纤维化大鼠的存活率,使得大鼠存活率恢复至空白对照组水平。病理染色结果表明,GSO处理的大鼠肝组织纤维化得到不同程度的改善,GSO中、高剂量处理显著降低大鼠肝脏胶原面积占比及面密度。GSO高剂量干预可显著降低大鼠血浆肝功能相关指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶)水平,减少血浆中肝纤维化指标(透明质酸、层黏蛋白、Ⅳ型胶原、羟脯氨酸)水平。同时,高剂量GSO干预还显著降低肝组织中丙二醛含量,提高还原型谷胱甘肽含量与超氧化物歧化酶活性,显著升高基质金属蛋白酶-9的表达。研究结果证实,中、高剂量GSO(人体推荐量的15、30倍)可提高肝纤维化模型大鼠存活率、抗氧化能力,具有改善大鼠生存状态和肝脏纤维化的作用。

河北省市政供水三氯甲烷和四氯化碳的健康风险

目的评估河北省市政供水中三氯甲烷和四氯化碳的人群健康风险。方法收集2017—2021年河北省市政供水三氯甲烷和四氯化碳的监测数据,运用环境健康风险评估模型分析两种物质平均浓度的致癌风险和慢性非致癌风险。对不同水期、不同类型、不同水源、不同地区的结果进行分层分析,对不同年份结果进行趋势性检验。结果12578份水样中,三氯甲烷和四氯化碳的平均浓度为6.14×10^(-3)和1.07×10^(-4)mg/L。三氯甲烷和四氯化碳致癌风险为3.75×10^(-6)和1.48×10^(-7);两种化学物质慢性非致癌风险均小于1。三氯甲烷的健康风险丰水期高于枯水期,地表水高于地下水,末梢水和二次供水高于出厂水。四氯化碳的健康风险地下水高于地表水,出厂水高于末梢水和二次供水。三氯甲烷的健康风险存在逐年上升的趋势,四氯化碳的健康风险为逐年下降趋势。健康风险存在地区差异。结论2017—2021年河北省市政供水中三氯甲烷的致癌风险在可接受范围内,四氯化碳的致癌风险较低,两种物质的慢性非致癌风险处于可接受水平。

姜黄素对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的预防机制

研究姜黄素(Curcumin, CUR)对四氯化碳(CCl_(4))诱导小鼠急性肝损伤的预防作用及其机制。ICR雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、姜黄素(50、100、200 mg/kg)组、联苯双酯(150 mg/kg)组。姜黄素组和联苯双酯组给予相应剂量的药物灌胃,每天1次,连续8 d。末次给药后,除正常对照组外,每只小鼠腹腔注射0.1%CCl_(4)花生油溶液,禁食不禁水16 h后收集小鼠血清和肝脏。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及肝组织谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察各组小鼠肝脏组织病理学变化。检测肝脏中活性氧(ROS)水平和硫氧还蛋白1(Trx-1)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平。结果显示,与模型组相比,CUR预处理组肝组织的炎症细胞浸润和肝细胞坏死程度均明显降低,血清ALT、AST、AKP和LDH活性显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织GSH、CAT、T-SOD活性显著升高(P<0.05或P<0.01),MDA含量和ROS活性显著降低(P<0.05或P<0.01);CUR显著提高Trx-1蛋白和mRNA表达,降低TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的蛋白和mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。综上所述,姜黄素可通过调控ROS/TXNIP/NLRP3通路预防CCl_(4)诱导的小鼠急性肝损伤。

金茵利胆胶囊对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠的保护作用

目的探讨金茵利胆胶囊(JYLD)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、水飞蓟素(阳性药)组、JYLD低剂量组和JYLD高剂量组,每组8只。除空白对照组外,其余各组大鼠均给予40%CCl4腹腔注射每周2次、连续6周诱导大鼠肝纤维化模型,造模期间水飞蓟素组和JYLD低、高剂量组分别给予0.1 g/kg水飞蓟素、0.6 g/kg JYLD、1.2 g/kg JYLD灌胃,每天1次,连续6周。实验结束后计算大鼠肝脏指数和脾脏指数,采用H-E染色和Masson染色观大鼠肝脏组织的病理变化和纤维化程度,用全自动生化仪检测大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和总胆汁酸(TBA)的含量,用超氧化物歧化酶检测试剂盒测定大鼠血清抗氧化能力,用ELISA检测试剂盒测定大鼠血清中炎症指标IL-6、IL-1β和TNF-α的水平,用免疫组织化学染色检测大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,用qPCR法检测大鼠肝组织中胶原蛋白(Col)Ⅰ、ColⅢ、ColⅣ、NF-κB、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、TGF-β1 mRNA的相对表达量并计算MMP-2/TIMP-1比值。结果与模型组比较,JYLD低、高剂量组大鼠的肝脏指数降低(P均<0.01),血清中ALT、AST和TBA含量下降(P<0.05,P<0.01),肝组织纤维化程度改善,血清中SOD活性升高(P均<0.01),IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),α-SMA阳性表达减少(P<0.05,P<0.01),肝组织中ColⅠ、ColⅢ、ColⅣ、NF-κB、MMP-2、TIMP-1、TGF-β1 mRNA的相对表达量下降(P<0.05,P<0.01),MMP-2/TIMP-1比值降低(P<0.05,P<0.01)。结论JYLD对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有保护作用,其作用机制可能与抗炎、减少肝细胞外基质沉积、抑制肝星状细胞活化有关。

赶黄草泡腾片的制备及其对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的优化赶黄草泡腾片制备工艺,探讨其对四氯化碳(CCl_(4))诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法在单因素试验基础上,以酸碱总量、酸碱比例、甜味剂用量为影响因素,色泽、澄清度,口感,崩解效果为评价指标,通过响应面法优化制备工艺。将小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组(0.15 g/kg)及赶黄草泡腾片高、中、低剂量组(8、4、2 g/kg),灌胃给予相应药物21 d,末次给药后除空白组外,其余各组腹腔注射0.1%CCl_(4)花生油溶液,禁食16 h后处死,检测小鼠血清中ALT、AST活性及TNF-α水平,肝组织中SOD活性及GSH、MDA水平,观察肝组织病理学变化。结果赶黄草泡腾片的最佳制备工艺条件为崩解剂(柠檬酸∶碳酸氢钠=1.4∶1)用量34.0%、赶草浸膏粉用量10.0%、甜菊糖苷用量5.0%、PEG6000用量6.0%、乳糖用量45.0%,综合评分为4.19分。与模型组比较,赶黄草泡腾片中、高剂量组小鼠肝脏指数降低(P<0.05,P<0.01),赶黄草泡腾片各剂量组小鼠ALT、AST活性降低(P<0.01),TNF-α、MDA水平降低(P<0.05),SOD活性和GSH水平升高(P<0.05),且对CCl_(4)诱导的肝脏病理损伤具有一定的保护作用。结论该方法简单稳定,可用于赶黄草泡腾片的工业生产。赶黄草泡腾片对CCl_(4)诱导小鼠急性肝损伤具有保护作用,可能是通过抑制ALT、AST、TNF-α的释放,抑制脂质过氧化损伤、氧化应激反应,提高抗氧化活性发挥作用。

连续性血液透析滤过对四氯化碳模型大鼠肝肾肠功能的保护作用

背景四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))中毒是化工从业人员常见的中毒类型,但目前尚无特效的临床药物能治疗此类中毒导致的肝、肾、肠损伤.目的探索连续性血液透析滤过(continuous blood purification,CBP)对口服CCl4中毒大鼠肝、肾、肠功能的保护作用及其潜在干预机制.方法将斯泼累格·多雷大鼠分为对照组、模型组(CCl4)和CBP治疗组(CCl_(4)+CBP),利用CCl4灌胃建立大鼠模型.收集外周血用于检测白细胞和中性粒细胞数以及血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Cr)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(alanine aminotransferase,AST)、D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)、肠性脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)和降钙素(procalcitonin,PCT)的水平.将收集的肝肾肠组织进行相关病理检测,免疫组化法和免疫印迹法检测核转录因子(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)通路的相对表达水平.结果CBP处理可显著降低CCl_(4)引起的白细胞和中性粒细胞增多(P<0.05)以及血清BUN、Cr、CRP、ALT、AST、D-LA、I-FABP和PCT的水平的增高(P<0.05),并降低肾脏组织中损伤标记物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的表达以及肝、肾、肠相关病理形态改变.免疫组化和免疫印迹法检测显示,CBP处理能降低CCl4引起的NF-κB通路激活(P<0.05).结论CBP对CCl4引起的肝、肾、肠损伤具有保护效果,其可能通过降低CCl_(4)引起NF-κB通路激活从而改善肝、肾、肠损伤的症状.

水飞蓟素缓解四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的机制

目的 探讨水飞蓟素(SM)通过沉默信号调节器1(SIRT1)/叉头转录因子1(FOXO1)通路对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤(ALD)和脂质代谢异常的影响。方法 60只雄性小鼠随机均分为对照组、模型组、SM低、SM中和SM高剂量组。SM低、SM中和SM高剂量组灌胃给予SM溶液,末次给药后制备ALD小鼠模型。测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;ELISA法测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物岐化酶(SOD)的水平;HE染色观察肝组织病理学变化;RT-PCR和Western blot检测SIRT1、FOXO1 mRNA和蛋白表达情况。结果 与模型组比较,SM低、SM中和SM高剂量组小鼠血清TG、TC、LDL-C、ALT、AST和肝组织MDA水平降低,HDL-C、GSH-Px、SOD、SIRT1、FOXO1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05)。结论 水飞蓟素可降低ALD小鼠血脂水平,提高抗氧化能力,在一定程度上修复肝功能,可能与激活SIRT1/FOXO1信号通路有关。

没食子酸对四氯化碳诱导小鼠肾损伤的保护作用

为了探讨没食子酸对四氯化碳(CCl 4)诱导小鼠肾损伤的保护作用,本试验将50只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、没食子酸低、中和高剂量组,每组10只。没食子酸低、中、高剂量组每天分别给予62.5、125.0和250.0 mg/(kg·bw)的没食子酸溶液灌胃。1周后,模型组和没食子酸各剂量组分别腹腔注射给予0.2 mL/(10 g·bw)的40%CCl 4玉米油溶液,每周注射2次,连续注射4周,对照组均使用等量生理盐水。试验结束后各组小鼠取血和肾脏组织,分光光度法测定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和氧化损伤指标,H.E.染色观察肾脏组织病理学变化。结果显示:与模型组比较,没食子酸高剂量组小鼠血清中BUN和Cr水平显著降低(P<0.05);肾脏组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H 2O 2)水平显著降低(P<0.05),而超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平显著升高(P<0.05);肾脏组织的炎性浸润程度减轻。结果表明,没食子酸能有效改善CCl 4所致的肾组织化学性损伤,其作用机制可能与没食子酸能减轻氧化损伤有关。

丹桃养肝丸对四氯化碳致肝纤维化大鼠的保护作用研究

目的观察丹桃养肝丸对四氯化碳(CCl 4)诱导肝纤维化大鼠的保护作用。方法取80只SD大鼠,随机选择14只作为对照组,其余大鼠采用连续9周轮替四肢内侧皮下注射CCl 4方法制备肝纤维化模型。将造模成功大鼠随机分成5组,秋水仙碱组给予秋水仙碱0.75 mg/kg灌胃,丹桃养肝丸高、中、低剂量组分别给予6 g/kg、3 g/kg、1.5 g/kg丹桃养肝丸灌胃,对照组和模型组给予去离子水灌胃,均1次/d,连续灌胃21 d。大鼠处死后,全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GTT)水平,计算AST/ALT值;分离肝、脾和胸腺,计算脏器指数;ELISA法检测肝组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;HE染色观察肝脏组织纤维化程度,并根据评分标准进行评分。结果与对照组相比,模型组血清ALT、AST、GGT、ALP水平有上升趋势,AST/ALT有下降趋势,肝组织中Hyp含量、肝纤维化评分均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,丹桃养肝低剂量组血清AST水平,丹桃养肝中、低剂量组AST/ALT值,秋水仙碱组和丹桃养肝高、中剂量组肝组织中Hyp含量和肝纤维化评分均明显降低(P均<0.05),秋水仙碱组和丹桃养肝高、中剂量组胸腺指数均明显增高(P均<0.05)。结论丹桃养肝丸能够改善肝纤维化大鼠肝功能,增强脏器免疫功能,减少胶原纤维生成,减轻肝纤维化损伤。

新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠治疗作用

目的探讨新型磷酸二酯酶5抑制剂CPD1对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl 4)诱导的肝纤维化小鼠肝组织结构损伤和肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化的影响。方法SPF级雄性C57BL/6 J小鼠随机分为正常对照组、模型组、CPD1治疗组、他达拉非治疗组,模型组和治疗组小鼠腹腔注射CCl 4(每周2次)。造模4周后治疗组分别给予CPD1(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))、他达拉非(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃治疗,持续4周。模型到期后,通过组织病理学染色、免疫荧光技术观察CPD1治疗对肝纤维化小鼠肝形态、组织结构损伤、胶原沉积及HSCs活化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、人肝星状细胞系LX-2细胞中纤维连接蛋白(fibronectin)表达和分布的影响。结果与正常组相比,模型组小鼠肝组织出现肝细胞坏死,炎症细胞浸润增加,肝小叶结构破坏,汇管区出现胶原沉积,α-SMA表达和分布明显增加;CPD1治疗可明显减轻模型小鼠肝组织损伤程度,减少肝细胞坏死和炎症细胞浸润,减轻胶原纤维的沉积,降低α-SMA的表达及分布,且治疗效果优于他达拉非;同时CPD1明显抑制LX-2细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的fibronectin和PAI-1蛋白的表达。结论磷酸二酯酶5抑制剂CPD1通过抑制HSCs的激活,减少肝组织中胶原纤维蛋白的产生,延缓肝纤维化的进展。