可逆抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达转基因小鼠子宫基因转录谱分析

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)对子宫中基因表达水平及信号通路的调控作用。方法:利用四环素可逆调节VEGF基因表达的转基因小鼠,通过新一代测序数字基因表达谱(DGE)方法分析在VEGF表达被抑制情况下的子宫基因表达水平。采用实时定量PCR验证部分表达异常的基因。结果:检测到在小鼠子宫中表达的基因约6×106个。其中在VEGF基因表达被抑制条件下,表达水平变化比较明显的基因有2 398个,其中上调的基因为1 231个,主要包括调节细胞内激酶基因、细胞分裂的基因、蛋白折叠的基因等;下调的基因为1 167个,主要包括调节肌肉发育的基因、细胞内基质形成的基因、血管形成的基因等。荧光定量PCR验证表明,基因表达水平变化与转录谱结果高度相关,VEGF抑制后小鼠子宫内表达上调的基因有P2ry14、Eln、Rnf187、Oxtr、Inhbb、Pabpn1、Car2和Mif1(r=0.972),表达下调的基因VEGF、Acta2、Pcx、Tnc、Igfbp3、Cnn1和Hopx(r=0.931)。结论:VEGF表达水平与子宫功能的维持密切相关,为不明原因不孕的诊治提供了新思路。