四甲基偶氮唑蓝比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的作用

目的：建立一种用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的促生长作用，以测定其生物活性的方法。方法：在体外采用MTT法，观察促肝细胞生长素在不同浓度（6．2～800．0mg·L^-1）及不同的培养时间（24，48，72h），对不同浓度SMMC-7721细胞（1．5～100．0）×10^3个·mL^-1生长的影响作用，并考察了此方法的重复性、与对人胃癌MGC-830及结肠癌HT-29细胞相比较的特异性及与法定^3H-TdR掺法比较的相关性。结果：MTT法测定结果表明，浓度为100mg·L^-1的促肝细胞生长素在培养时间为48h时。对细胞浓度为2．5×10^4个·mL^-1的SMMC-7721细胞促生长作用最明显（刺激指数SI值≥6．0），此方法重复性好，并对SMMC-7721细胞具有特异性，与^3H-TdR掺法比较测定的SI值差异无显著性。结论：MTT法适用于促肝细胞生长素的活性测定。

四甲基偶氮唑蓝法测定植酸酮对HeLa细胞的作用

目的:分析植酸酮妇科清洗装置(商品名:美福康)Ⅱ型1号及2号对体外培养的HeLa细胞生长的抑制作用,为后期实验提供实验依据。方法:体外培养HeLa细胞,分为实验组和对照组,实验组从8个浓度水平上给药,分别经过24,48,72 h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对HeLa细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,经2种型号的药物作用后的HeLa细胞存活率降低,凋亡增加,作用呈时间-剂量依赖关系。结论:植酸酮妇科清洗装置Ⅱ型1号及2号均能有效抑制宫颈癌HeLa细胞的生长。

1,1′-二甲基-5,5′-偶氮四唑一水合物和2,2′-二甲基-5,5′-偶氮四唑的热安全性

借助不同加热速率(β)的非等温DSC曲线离开基线的初始温度(T0)、onset温度(Te)和峰顶温度(Tp),采用Kissinger法和Ozawa法求得热分解反应表观活化能(EK和EO)和指前因子(AK),Hu-Zhao-Gao方程求得be0(or p0),Zhao-Hu-Gao方程求得ae0(or p0),微热量法确定的比热容(Cp),以及密度(ρ)、热导率(λ)和分解热(Qd,取爆热之半)数据;根据Zhang-Hu-Xie-Li公式、Hu-Yang-Liang-Xie公式、Hu-Zhao-Gao公式、Zhao-Hu-Gao公式、热力学关系式、Smith方程、Friedman公式、Bruckman-Guillet公式、Frank-Kamenetskii公式和Wang-Du公式和Yoshida公式,计算了1,1′-二甲基-5,5′-偶氮四唑一水合物(1,1′-DMATZ)和2,2′-二甲基-5,5′-偶氮四唑(2,2′-DMATZ)在β→0时的T0、Te和Tp值(T00、Te0和Tp0)、分解反应的活化热力学参量(ΔG≠、ΔH≠、ΔS≠)、热爆炸临界温度(Tbe和Tbp)、绝热至爆时间(tTIad)、撞击感度50%落高(H50)、热点起爆临界温度(Tcr,hoto-spot)、热爆炸临界环境温度(Tacr)、热安全度(Sd)、热爆炸概率(PTE)、爆炸能力(Ep)和以间二硝基苯为基准的撞击敏感性(SS)。结果表明,(1)1,1′-DMATZ对热是稳定的;(2)1,1′-DMATZ对热的抵抗能力好于2,2′-DMATZ;(3)影响二甲基-偶氮四唑热安全的主要因素是甲基在分子中所处的位置。

四甲基偶氮唑蓝法测定肠毒素C活性初步研究

目的：探讨四甲基偶氮唑蓝（MTT）法替代升白实验测定肠毒素C（SEC）活性。方法：采用小鼠脾T淋巴细胞增殖试验，用MTT法对20批样品进行脾T淋巴细胞增殖活性测定，在酶联免疫仪上检测吸光度，与空白组比值作为生物活性标准指数。结论：MTT法可靠性、重复性好，易操作，适合替代升白实验作为高聚生的生物活性检测方法。

四甲基偶氮唑盐法评价牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的体外细胞毒性

背景:越来越多的新型材料被纳入口腔领域应用的视野,对生物材料进行生物相容性评价是进入临床试验前的重点研究内容。目的:通过体外细胞毒性实验评价自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的生物相容性。方法:根据ISO标准,采用四甲基偶氮唑盐比色法行体外细胞毒性实验,阴性对照组为DMEM培养液,阳性对照组为含有0.1%苯酚的DMEM培养液,实验组为受试材料的浸提液。测试人牙龈成纤维细胞在牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料浸提液中培养1,3,5d的吸光度值,观察细胞形态变化,计算细胞相对增殖率,判断细胞毒性的级别。结果与结论:实验组体外细胞毒性实验吸光度值均与阴性对照组差异无显著性意义(P>0.05),与阳性对照组差异有显著性意义(P<0.01),自制牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料体外细胞毒性级别为0～1级,初步认为其具有良好的生物相容性。

四甲基偶氮唑盐比色法测定脑源性神经营养因子生物学活性的研究

目的:探索四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)实验方法的最佳条件,并检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的生物学活性。方法:根据MTT法的测定原理,采用三因素(细胞数量、MTT浓度、MTT染色时间)三水平的正交实验设计;并依据MTT的最优条件测定BDNF的生物活性。结果:MTT比色法检测SH-SY5Y细胞活性的最优条件为:每孔细胞数:(0.2×108个/L,100μl),MTT的染色时间(6小时),MTT的剂量(5g/L)。在ATRA诱导SH-SY5Y细胞产生TrkB受体后,随着BDNF浓度的增加,吸光值也增加,当BDNF浓度增加到50μg·L-1后,随着BDNF浓度的增加,吸光值增加并不显著。结论:建立了MTT比色法的最佳条件,并应用于BDNF细胞因子的活性检测中,在BDNF浓度为50μg·L^(-1)时。

甲基偶氮四唑热稳定性和热分解机理的量子化学研究

采用量子化学方法全优化计算了1-甲基-5-偶氮四唑(1-MAT)和2-甲基-5-偶氮四唑(2-MAT)热分解反应位能曲线,探讨了热稳定性和分解机理。热分解活化能计算值分别为245.9,183.2kJ/mol,静态分子结构和动态分解性质都显示出1-MAT比2-MAT有更好的热稳定性。裂解优先以开环方式发生。

四甲基氮唑蓝比色法预测胃癌细胞药物敏感性的探讨

目的通过对比胃癌患者单药与联合用药体外敏感性,为临床筛选对胃癌相对敏感的化疗药物提供参考依据。方法采用临床常用的19种化疗方案对30例胃癌的新鲜标本进行四甲基氮唑蓝比色法体外敏感性测定。结果不同个体对化疗药物的敏感性差异较大,联合用药比单个药物的平均抑制率高。结论胃癌化疗联合用药敏感性大。四甲基氮唑蓝比色法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为胃癌临床个体化化疗方案的选择提供参考。

骨肉瘤化疗药物体外四甲基偶氮唑盐药敏的实验研究

目的 探讨卡铂 (CBP)和其它抗骨肉瘤基本药物对OS_732细胞株的抑制作用。方法 应用体外四甲基偶氮唑盐药敏试验 ,选用CBP、顺铂 (CDP)、阿霉素 (ADM)和氨甲喋呤 (MTX) ,参考临床所能达到的血浆最大理论浓度设定不同浓度梯度 ,观察它们对OS_732细胞株的抑制率。 结果 上述药物在体外均有一定的抑瘤作用 ,其中以CDP、CBP、CDP +ADM和CBP+ADM的抑制率较好 (平均值分别为82.86%、80.85%、81.92 %和82.30% ) ,4组间的差别无显著性意义 (P>0.05) ;ADM次之 (66.63% ) ;MTX最差 (30.57% ) ,与前5组比较差别均有显著性意义 (均P<0.01)。 结论 临床使用的几种抗骨肉瘤药物对OS_732细胞株均有一定的抑制作用 。

四甲基偶氮唑盐法用于非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件。方法取25例非小细胞肺癌患者的瘤细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察9种化疗药物，在不同浓度、不同时间对瘤细胞的敏感性。结果9种化疗药物对瘤细胞的敏感性，有随着药物浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势，但每个药物都有各自的特点。结论非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值，药物作用时间应以48h为宜。

1,1′-二甲基-5,5′-偶氮四唑一水合物的放热分解反应动力学(英文)

在程序升温条件下,用DSC研究了1,1′-二甲基-5,5′-偶氮四唑一水合物的放热分解反应动力学参数。表明该反应的微分形式的经验动力学模式函数,表观活化能(Ea)和指前因子(A)分别为(1-α)-1.53,114.1kJ/mol和108.72s-1。该化合物的热爆炸临界温度为215.45℃。

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血NK细胞活性的改进

四甲基偶氮唑盐比色法测定人外周血ＮＫ细胞活性的改进杨建英李红育徐以珍（甘肃省地方病防治研究所，兰州７３００３０）关键词效靶比例（Ｅ／Ｔ）四甲基偶氮唑盐自然杀伤细胞自然杀伤细胞（ＮＫ）活性检测已作为临床观测肿瘤、病毒感染、免疫功能异常等常用指标之一。检...

1,1＇-二甲基-5,5＇-偶氮四唑提高得率的研究

本文介绍一种改进的分离方法,提高了题称化合物的得率。

四甲基偶氮唑蓝法检测自然杀伤细胞活性

四甲基偶氮唑蓝法检测自然杀伤细胞活性崔晓明，谢海宝，林茂芳，张丽娟，叶刚本研究对四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）比色法的有关实验条件及其在检测自然杀伤细胞（ＮＫ）活性中有关的影响因素及可行性作了探讨。一、材料与方法１．试剂和仪器：ＭＴＴ为Ｓｉｇｍａ公司产品，...

MTT、MTS、WST-1在细胞增殖检测中最佳实验条件的研究

目的:探讨MTT、MTS、WST-1三种四唑盐在细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法:取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞,用10%胎牛血清DMEM培养液制成不同浓度的细胞悬液加入96孔培养板中培养24h,分别加入三种试剂后在450nm、492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定三种试剂的最佳实验波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定三种试剂各自的最适细胞浓度。取最适浓度的B16细胞分别加入三种试剂在0.5h、1h、2h和4h四个不同时间点测定吸收值,根据OD值确定最佳的检测时间。结果:MTT、MTS法的最佳波长为492nm,WST-1法为450nm。MTT的最适细胞接种浓度为1.6×103—2.56×104/mL,MTS的最适细胞接种浓度为5×10—6.4×103/mL,WST-1的最适细胞接种浓度为2.5×10—1.6×103/mL。三种方法的最佳测定时间均为4h。结论:MTT、MTS、WST-1分别适用于不同条件下检测细胞的存活与增殖,可为抗病毒及抗癌药物的筛选提供实验依据。

羧甲基葡聚糖体外抗肿瘤作用的研究

目的研究不同取代度羧甲基葡聚糖(CMG)的体外抗肿瘤作用。方法以HL-7702正常肝细胞、HepG-2肝癌细胞、MGC-803胃癌细胞为实验材料,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析。结果各种取代度的CMG对HL-7702的生长影响较小,但对HepG-2和MGC-803的抑制作用明显,并且随浓度升高对HepG-2、MGC-803的抑制作用也随之增强,尤以取代度为0.556的CMG2最为显著。CMG2浓度达到500μg/mL时对HepG-2的生长抑制率为54.3%,浓度为1 000μg/mL时对MGC-803抑制率达到51.3%。结论在体外实验中,取代度0.55左右的CMG能有效抑制HepG-2肝癌细胞、MGC-803胃癌细胞的生长。

MTT、WST-8法测定细胞生长抑制率的结果比较

体外培养的乳腺癌细胞给予不同浓度的A p igen in处理,72h后分别用M TT、W ST-8法检测细胞生长抑制率。结果两种方法测定的乳腺癌细胞M CF-7生长抑制率结果相似,但W ST-8法步骤少,操作更为简便,值得推广。

HSS体外生物学活性测定的MTT比色法优化及改进(英文)

筛选测定HSS体外生物学活性的MTT比色法的最佳实验条件。分析比较不同条件下MTT显色反应的特点 ,确定适用于人肝癌细胞株SMMC772 1的最佳实验条件 ,并采用优化条件检测不同剂量下HSS的体外生物学活性。结果表明SMMC772 1细胞数量与MTT比色法的吸光度成正相关 ,线性良好。正交实验优化条件为 :5× 10 4 cells/ml细胞密度 ,6h后加入HSS ,最适浓度为 10 0 μg/ml,作用 3 6h后加入MTT溶液。MTT用量 5 0 μg ,孵育时间 6h ,DMSO溶解反应产物Formazan ,于5 70nm处测定吸光值。在优化条件下测定HSS体外生物学活性 ,灵敏度明显高于已发表的方法。一定剂量范围内 ,活性随剂量增加而增大 ,超过一定剂量后活性反而下降。应用优化的MTT比色法 ,以SMMC72 2 1细胞株 。