四神丸挥发油对慢性溃疡性结肠炎小鼠TLR/MyD88信号通路的调控作用

目的:从Toll样受体(TLR)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路,探讨四神丸挥发油有效治疗慢性溃疡性结肠炎的可能机制。方法:将BALB/c小鼠随机分成正常组,模型组,四神丸挥发油组,二神丸挥发油组,五味子散挥发油组和美沙拉嗪组,采用葡聚糖硫酸钠(DSS)建立慢性溃疡性结肠炎小鼠模型,灌胃给药7 d后,通过体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度、结肠镜下损伤评分评价其疗效;用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结肠组织上清液中白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21)和γ干扰素(IFN-γ)水平,同时用蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组小鼠结肠黏膜中TLR/MyD88信号通路相关蛋白,包括TLR2,MyD88,Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1),白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4),白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1),肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6),转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1(TAB1),转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白2(TAB2),丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组结肠长度显著降低,结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著升高,IL-10水平显著降低,IL-4,IL-21和IFN-γ水平明显升高(P<0.05,P<0.01),TLR2,MyD88,Rac1,IRAK4,IRAK1,TRAF6,TAB1,TAB2,MKK6,p38 MAPK和CREB蛋白表达量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,经四神丸挥发油干预后,小鼠结肠长度显著增加,结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著降低,且小鼠结肠组织中IL-10水平明显升高,而IL-4,IL-17A,IL-21和IFN-γ水平明显降低(P<0.05,P<0.01),同时小鼠结肠组中TLR2,MyD88,Rac1,IRAK4,IRAK1,TRAF6,TAB1,TAB2,MKK6,p38 MAPK和CREB蛋白表达量均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:四神丸挥发油能有效改善慢性溃疡性结肠炎的炎性损伤,可能是通过抑制TLR/MyD88信号通路实现的。